Хід визначення. В скляну пробірку відміряють 5 мл молока і додають 5 крапель розчину йодисто-калієвого

В скляну пробірку відміряють 5 мл молока і додають 5 крапель розчину йодисто-калієвого крохмалю і 5 крапель 0,5%-ного розчину пероксиду водню, перемішуючи колоподібними рухами вміст пробірки після внесення кожного реактиву.

Якщо використовують окремо розчини крохмалю і йодисто-калієвого крохмалю, то у кожну пробірку з молоком додають 0,5 мл 1%-ного розчину крохмалю, 2 краплі 10%-ного розчину калію йодистого і 5 крапель 0,5%-ного розчину пероксиду водню, перемішуючи вміст пробірок після внесення кожного реактиву.

Наявність пероксидази визначають за зміною забарвлення. При відсутності ферменту в молоці його колір не змінюється. Це свідчить, що молоко пастеризували з дотриманням температурного режиму. При наявності пероксидази в молоці вміст пробірок не більш як через 2 хвилини набуває сіро-синього забарвлення, яке поступово переходить у темно-синє. Отже, молоко не піддавалося пастеризації або піддавалося пастеризації при температурі нижче 80°С, чи було змішане з непастеризованим. Поява забарвлення в пробірках через 2 хв після внесення йодисто-калієвого крохмалю і пероксиду водню не свідчить про відсутність пастеризації. Чутливість методу дає змогу виявити додавання не менше 5% непастеризованого молока до пастеризованого.

7.2.3. Реакція на фосфотазу із застосуванням фенолфталеїнфосфату натрію

Фосфатаза, присутня у сирому молоці, при нагріванні його до 72°С протягом 20с руйнується, при нагріванні до більш високих температур руйнується миттєво. Натрієва сіль фенолфталеїн фосфату у буферному розчині рН 9,8 не має забарвлення. Під час гідролізу фосфатаза молока відщеплює від неї фосфат, внаслідок чого вивільнюється фенолфталеїн, який у лужному середовищі дає яскраво-рожеве забарвлення.

Фермент фосфатаза інактивується при низькій температурі і кислій реакції, тому реакція на цей фермент у заморожених кисломолочному сирі і сметані чи після їх тривалого зберігання у холодильнику може бути негативною, якщо вони виготовлені із сирих молока і вершків. Тому досліджувати продукти на фосфатазу слід перед відправленням на зберігання. Сир, з кислотністю вище стандартної, на ефективність пастеризації не досліджують.

Припади і реактиви. Прилади такі ж, як і при виявленні фосфатази за реакцією з 4-аміноантипірином; аміак водний, ч.д.а, розчин концентрацією 1 моль/дм³; амоній хлористий, х.ч. або ч.д.а., розчин концентрацією 1 моль/дм³; суміш буферна аміачна; натрію фенолфталеїнфосфат порошкоподібний, 0,1%-ний розчин; пробірки з безбарвного скла з нанесеними поділками на 2мл; піпетки на 1 і 2мл; пробки гумові; дистильована вода.

Дата добавления: 2015-07-16