Сопоставление результатов диагностики ВГВ и ВГС, полученных методами ПЦР и ИФА

Наиболее важным, значимым и часто используемым тестом в диагностике вирусного гепатита В является определение НВз-антигена методом ИФА. Нами проведено ПЦР исследование 765 НВэ - положительных образцов крови. В 79,1±1,5% из них выявлена вирусная ДНК. В пробах, где ДНК обнаружить не удалось, как правило, определялись низкие концентрации НВз-антигена (титры 1/4 - 1/64). В образцах крови с титрами НВз-антигена 1/128 и выше ДНК выявлялась в 100% случаев. Несмотря на более высокую чувствительность, метод ПЦР оказался менее эффективным, чем ИФА—тест на НВБ-антиген. Это может быть объяснено тем, что концентрация НВз-антигена в крови больных намного превышает концентрацию ДНК-содержащих частиц Дейна. Полученные результаты свидетельствуют о нецелесообразности использования метода ПЦР для первичной диагностике вирусного гепатита В.

Для вируса гепатита С к настоящему времени не разработано ИФА тестов, для выявления компонентов вирусной частицы, сопоставимых по чувствительности и эффективности с ПЦР. При диагностике ВГС проводят исследования на наличие антител к одному или нескольким антигенам вируса. Недостатком этого варианта исследования является то, что он не позволяет получить объективную информацию о размножении вируса.

В связи с этим, представляло интерес проанализировать частоту обнаружения вирусной РНК у больных хроническим ВГС. Для этого было проведено ПЦР исследование образцов крови, от пациентов с различными спектрами антител к разным антигенам ВГС. Кроме этого обследованы пациенты с клиническими признаками вирусного гепатита, у которых не обнаружено белковых маркеров ВГВ и ВГС. Полученные результаты представлены в таблице 20.

Таблица 20.

Выявление вирусной РНК у больных хроническим ВГС, имеющих различные классы антител и у пациентов с подозрением на вирусный гепатит.

Антитела к антигенам ВГС	Кол-во обследованных	Выявлена РНК	% РНК. позитивных
Cor суммарн.			54,5±1,4
Cor IgG			51,1±3,1
Cor IgM			65,3±2,6
NS 5			59,5±2,9
NS3 4 5			64,5±3,1
Cor суммарн. NS 3 4 5			65,9±4,2
Cor IgG NS3 4 5			66,4±4,6
Cor IgM NS3 4 5			71,7±4,2
Cor IgG IgM NS3 4 5			76,5±6,1
Антитела не выявлены			1,2±0,6

Во всех образцах, содержащих антитела, независимо от их класса, более чем в 51,1% случаев выявлена РНК ВГС. Реже всего она обнаруживалась у пациентов с антителами класса IgG к Cor антигену и суммарными антителами к Cor антигену - 51Д±ЗД - 54,5±1,4%. У больных с антителами класса IgM к Cor антигену и антителами к неструктурным белкам NS3, NS4, NS5 эффективность репликации несколько выше: РНК выявлена в 59,5±2,9 - 65,3±2,6%. При наличии антител нескольких классов, как правило, репликация вируса отмечается чаще. Наивысшая активность вируса (частота выявления РНК ВГС - 76,5±6,1%) наблюдалась у больных, имеющих антитела IgM и IgG к Cor - антигену и антитела к антигенам NS3, NS4, NS5. Полученные результаты согласуются с данными литературы, из которых известно, что неструктурные белки NS3, NS4, NS5 являются активными участниками репликации вирусной РНК [90].

У пациентов, не имеющих антител к ВГС, РНК обнаружена в 1,2±0,6% случаев. Очевидно, в данном случае, выявлено серонегативное окно в процессе развития заболевания. Несмотря на то, что количество больных ВГС в период серонегативного окна невелико, считаем целесообразным и необходимым проведение ПЦР обследования пациентов с клиническими признаками вирусных гепатитов, не имеющих антител к ВГС, поскольку чем раньше установлен диагноз и начато специфическое лечение, тем больше шансов на положительный исход и меньше вероятность хронизации процесса.

Дата добавления: 2015-07-20