Бактериальной культуры
- Осмотрите ваши чашки LB/amp и LB/amp/ara из работы по трансформации бактерий. Посмотрите на них при обычном освещение и под ультрафиолетом в темной комнате. Запишите, была ли разница.
Чтобы не повредить кожу или глаза, минимизируйте время работы с ультрафиолетом. Никогда не смотрите незащищенными глазами прямо на лампу. Если возможно, носите защитные очки.
- Найдите несколько отдельных зеленых колоний на чашке LB/amp/ara и отдельную белых на чашке LB/amp. Обведите их фломастером с обратной стороне чашки.
- Возьмите две культуральные пробирки со средой LB/amp/ara. Подпишите одну «+», другую «-». Возьмите стерильную петлю и мягко коснитесь петлей одной зеленой колонии, стараясь не царапать агар; потом опустите петлю в пробирку с надписью «+». Покрутите петлю между большим и указательным пальцами, чтобы суспендировать всю колонию. Повторите процедуру для белой колонии с чашки LB/amp. Очень важно, чтобы на петле были клетки только из одной отдельной колонии.
- Закройте пробирки крышками и поместите их на качалку или шейкер на 24 часа при 32º или на двое суток при комнатной температуре. Если качалки в лаборатории нет, закройте пробирки и интенсивно потрясите, как баллончик с краской, не менее 30 секунд. Поместите в горизонтальном положении в термостат на 32º на 24 часа. Во время инкубации по мере возможности вытаскивайте и встряхивайте пробирки.
Условия культивирования
| Требуемое время
|
32º, на качалке
| 1 день
|
32º, без перемешивания
| 1-2 дня*
|
Комнатная температура, на качалке
| 2 дня
|
Комнатная температура, без перемешивания
| Не рекомендуется
|
Дата добавления: 2015-08-10; просмотров: 94 | Нарушение авторских прав
Читайте в этой же книге: Разлейте жидкую питательную среду | Урок 4 Вторая стадия очистки: удаление бактериального дебриса | Отбор на устойчивость к антибиотикам | Гидрофобная хроматография | Бактериальных культур | Урок 3 Первая стадия очистки | Урок 4 Вторая стадия очистки | Урок 5 Третья стадия очистки | Макромолекула, состоящая из цепи аминокислот | Потому что супернатант состоит из среды выращивания и не содержит GFP. |
mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.007 сек.)