Урок 3 Первая стадия очистки

Концентрирование бактерий

1. Подпишите микроцентрифужную пробирку «+» и вашим именем. Выньте ваши жидкие культуры из термостата и посмотрите под ультрафиолетом. Обратите внимание на какую-либо разницу в цвете. Возьмите чистую пипетку и перенесите 2 мл культуры из культуральной пробирки с надписью «+» в подписанную микроцентрифужную пробирку. Открутите пробирку в центрифуге 5 минут на максимальной скорости. На этом этапе можно использовать одну и ту же пипетку на всех шагах, промывая ее водой в стакане.

2. Вылейте супернатант и посмотрите на осадок под УФ.

3. Используя промытую пипетку, добавьте 250 мкл ТЕ в пробирку. Тщательно ресуспендируйте осадок, пипетируя раствор в пробирке (гоняя жидкость в пипетке)

4. Используя промытую пипетку, добавьте 1 каплю лизоцима к ресуспендированным клеткам, чтобы начать ферментативное расщепление клеточных стенок. Аккуратно перемешайте содержимое, встряхивая пробирку пальцем. Пронаблюдайте за происходящим в пробирке под УФ.

5. Поместите микроцентрифужную пробирку в морозилку до следующего этапа работы. Замораживание-оттаивание полностью разрушит бактериальные клетки.

Дата добавления: 2015-08-10