Урок 4 Вторая стадия очистки

Лизис бактерий

1. Выньте микроцентрифужную пробирку из морозильника и оттайте в руках. Осадите бактериальный дебрис, открутив пробирку в центрифуге 10 минут на максимальной скорости.

2. Пока пробирка центрифугируется, подготовьте колонку для хроматографии. Снимите верхнюю крышку и отломите нижнюю. Пусть вся жидкость вытечет из колонки, это займет 3-5 мин.

3. Уравновесьте колонку, осторожно добавив 2 мл буфера для уравновешивания на поверхность сорбента. Это делается двумя порциями по 1 мл промытой пипеткой. Позвольте буферу стечь до отметки 1 мл, после чего закройте колонку сверху и снизу и сохраняйте ее при комнатной температуре до следующего занятия.

4. Сразу же после окончания 10-минутного центрифугирования выньте вашу пробирку из центрифуги. Посмотрите на пробирку под ультрафиолетом. Взяв новую пипетку, осторожно перенесите 250 мкл супернатанта в чистую микроцентрифужную пробирку, подписанную «+». Хорошо промойте пипетку для последующих шагов этого этапа.

5. Хорошо промытой пипеткой добавьте 250 мкл буфера для связывания к отобранному супернатанту. Поместите пробирку в холодильник до следующего занятия.

Дата добавления: 2015-08-10