Робота 6

Визначення осмотичного тиску клітинного соку плазмолітичним методом

Плазмолітичний метод визначення осмотичного тиску ґрунтується на тому, що рослинні об’єкти поміщають у розчини різних концентрацій і під мікроскопом за ступенем плазмолізу виявляють ізотонічний розчин. Враховуючи те, що плазмоліз простежується лише в розчинах плазмолітиків, знаходять таку концентрацію, при якій відбувається початковий етап плазмолізу в 50% клітин у полі зору. Концентрація ізотонічного розчину буде мати середнє значення між концентрацією цього розчину і наступного, меншої концентрації, при якому плазмоліз ще не відбувається.

Мета роботи: визначити та порівняти величину осмотичного тиску клітин епідермісу внутрішніх і зовнішніх лусок цибулі.

Прилади і матеріали дослідження: мікроскоп, скальпель або бритва, предметні та накривні скельця, пробірки, 1М розчин цукрози або NaCl, фільтрувальний папір, цибуля.

Хід виконання роботи

1. Із 1М розчину NaCl або цукрози за допомогою мірних циліндрів готують по 10 мл розчинів таких концентрацій: 0,7М; 0,6; 0,5; 0,4; 0,3; 0,2М у двократній повторності. Для цього користуються даними таблиці:

2. У кожну пробірку одного концентраційного ряду, починаючи з найвищої концентрації, занурюють по відрізку зовнішнього епідермісу луски цибулі. Кожен відрізок витримують у відповідному розчині 20 хв. Далі виймають епідерміс з досліджуваного розчину і у краплі цього ж розчину на предметному склі розглядають під мікроскопом при малому збільшенні.

Таблиця 1

Концентрація розчину, М	0,7	0,6	0,5	0,4	0,3	0,2
Об’єм 1М NaCl (цукрози), мл
Об’єм Н2О, мл

3. У кожну пробірку іншого концентраційного ряду занурюють по відрізку внутрішнього епідермісу луски цибулі за таким же принципом. Розглядають усі відрізки в тій самій послідовності, в якій їх занурювали у розчин. Визначають ступінь плазмолізу клітин і встановлюють, у якому із розчинів проявляється початкова стадію плазмолізу. Результати спостережень фіксують у таблиці 2:

Таблиця 2

Концентрація розчину, моль/л	0,7	0,6	0,5	0,4	0,3	0,2
Ступінь плазмолізу
Рисунок клітини

4. Знаходять ізотонічну концентрацію. Її визначають як середнє між тією концентрацією, при якій плазмоліз тільки починається, і концентрацією, при якій плазмолізу ще немає.

5. Розраховують величину осмотичного тиску клітини за формулою:

P = i C R T,

де Р – осмотичний тиск, атм (1 атм = 1,013 бар = 0,1 МПа);

R – універсальна газова стала (0.0821 л•атм/К•моль);

Т – абсолютна температура, К;

С – ізотонічна концентрація, моль/л;

і – ізотонічний коефіцієнт (див. табл.3).

Таблиця 3

Значення ізотонічного коефіцієнта (і) для розчинів NaCl різних концентрацій

Концентрація, моль/л	1,0	0,8	0,7	0,6	0,5	0,4	0,3	0,2	0,1	0,01
Ізотоніч­ний коефіцієнт	1,62	1,64	1,66	1,68	1,70	1,73	1,75	1,78	1,83	1,93

6. У висновках порівяти величину осмотичного тиску у клітинах зовнішнього і внутрішнього епідермісу луски цибулі.

Дата добавления: 2015-07-17