Робота № 72. Методи стерилізації посуду, інструментів і допоміжних матеріалів

Основні відомості. Чистота і стерильність – головні вимоги роботи в біотехнологічній лабораторії. Стерилізація приміщення, ламінарів, інстру-

ментів, посуду, живильних середовищ, рослинного матеріалу на всіх етапах роботи є основою спіху і в багатьох випадках набагато важливіші, ніж спеціальне обладнання.

Мета роботи. Оволодіти основними способами стерилізації посуду, інструментів і допоміжних матеріалів.

Матеріали, реактиви, обладнання. Колби, пробірки, чашки Петрі, мірні піпетки, скальпелі, пінцети, 96° спирт, папір для загортання посуду, целофан, фільтрувальний папір, металевий або скляний пенал для інструментів, спиртівка, термостат, автоклав, ламінар-бокс.

Хід роботи.

1. Стерилізація посуду.

Стерилізація сухим жаром. Лабораторний посуд (колби, пробірки, чашки Петрі тощо) перед наповненням живильним середовищем попередньо стерилізують сухим жаром у сушильній шафі. Піпетки зручно стерилізувати в скляних пеналах, на дно яких необхідно покласти вату, щоб запобігти обламуванню носиків піпеток.

Тривалість стерилізації: за 150°С – 2,5 год, за 160°С – 2 год, за 170°С – 1 год.

Примітка. Слід пам’ятати, що до цього часу стерилізації необхідно додавати час, який потрібний для нагрівання завантажених у шафу предметів до заданої температури.

Стерилізація сухим паром. Посуд загорнутий у папір або зватними тампонами стерилізують автоклавуванням. За автоклавування піпеток верхню частину закривають ватним тампоном (приблизно на 2 см) і кожну окремо загортають у папір.

Залежно від заповнення автоклава автоклавування триває 30...40 хв. за тиску 2 атм і температури 133 °С.

Примітка. Камера автоклава заповнюється не більш як на 2/3 об’єму.

2. Стерилізація інструментів. Стерилізація сухим жаром. Інструменти попередньо стерилізують сухим жаром у сушильній шафі так само як і посуд.

Стерилізація полум’ям. У боксі безпосередньо перед роботою інструменти занурюють у порцеляновий стакан із 96°спиртом і стерилізують обпалюванням у полум’ї спиртівки. Стерильний інструмент використовують лише для одноразової маніпуляції. Перед повторним використанням його знову необхідно простерилізувати спиртом і обпалити.

3. Стерилізація допоміжних матеріалів.

Вату, корки, марлю, папір, целофан, фольгу стерилізують автоклавуванням.

4. Перед початком операцій ламінарний бокс необхідно підготувати до роботи. Для цього упродовж 30 хв. його стерилізують ультрафіолетом, після чого робочу поверхню протирають 70...96°спиртом.

Контрольні питання

1. Що таке біотехнологія?

2. Чому біотехнологію поділяють на класичну і сучасну?

3. У чому полягає суть методу культури in vitro клітин, тканин та органів рослин?

4. Як на практиці застосовують культуру тканин?

5. Який посуд використовують для роботи з культурою ізольованих клітин, тканин та органів рослин?

6. Як здійснюється стерилізація посуду та допоміжних матеріалів?

7.Назвіть методи стерилізації інструментів.

Дата добавления: 2015-07-15