Читайте также:
|
При проведении серологической диагностики вирусных инфекций с помощью реакции нейтрализации определяют динамику нарастания титра вируснейтрализующих антител по известному вирусу. Для этого пользуются парными сыворотками, взятыми от больного в разные сроки - в начале и в конце заболевания, диагностическое значение имеет 4 кратное и более возрастание титра антител, регистрируемое в ходе заболевания.
Готовят двукратно возрастающие разведения используемой сыворотки, каждое из которых в объеме 0,25 мл вносят в пробирки параллельных рядов, количество которых соответствует числу взятых в опыт серологических типов вирусов. Во все пробирки добавляют по 0,25 мл вирусной суспензии, содержащей 100 ЦПД5о. Смеси инкубируют 1 ч при комнатной температуре, добавляют по 0,25 мл суспензии клеток, термостатируют при 37°С. Опыт сопровождают тремя контролями: 1) контроль клеток; 2) контроль токсичности используемой сыворотки; 3) контроль дозы вируса
Пробирки инкубируют в термостате в течение 6—7 дней и оценивают результаты, ориентируясь на состояние контролен клеточных суспензий.
В пробирках, содержащих полиостью нейтрализованный антителами вирус, метаболизм клеток не нарушается и цвет среды становится желтым. При частичной нейтрализации вируса антителами часть клеток остается живой, и среда приобретает оранжевый цвет. При отсутствии антител вирус вызывает дегенерацию клеток, метаболическая активность их подавляется и среда остается красной.
За титр антител принимают то предельное разведение сыворотки, которое нейтрализует действие 100 ЦПД50 вируса и предотвращает угнетение метаболической активности клеток (желтый цвет среды).
Дата добавления: 2015-09-05; просмотров: 89 | Нарушение авторских прав
| <== предыдущая страница | | | следующая страница ==> |
| Реакция нейтрализации по методу цветной пробы. | | | ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД |