Читайте также:
|
Реакцию вирусной гемагглютинации ставят на предметных стёклах, в пробирках, в лунках полистероловых планшетов. Компоненты реакции - вируссодержащий материал (аллантоисная и амниотическая жидкости), 1% взвесь эритроцитов к исследуемому вирусу. Постановка реакции на стекле: перечисленные компоненты смешивают и через 1-2 мин отмечают результат реакции. При положительном результате регистрируют появление хлопьевидного осадка, агглютинацию эритроцитов.
Постановка реакции в пробирках:
Готовят ряд двукратных разведений вируссодержащего материала с помощью изотонического раствора хлорида натрия (1:2,1:4, 1:8,1:32, 1:64), во все пробирки вносят 1% взвесь эритроцитов. Пробирки встряхивают и оставляют при 37, 22 или 4°С в зависимости от свойств вируса. Регистрация реакции проводится после оседания эритроцитов в контроле. В положительном случае степень агглютинации эритроцитов отмечают плюсами (оценка по 4х-крестовой системе). При чёткой реакции ++++ образуется плёнка из склеенных эритроцитов на дне пробирки (зонтик). Устанавливают титр реакции, за титр принимают предельное разведение вируссодержащего материала, которое вызвало агглютинацию эритроцитов на ++. Указанное разведение содержит одну гемагглютинирующую единицу вируса (1АБ).
Видовую принадлежность вирусов устанавливают' с помощью РТГА (реакции торможения гемагглютинации).
РТГА, Сущность реакции: При взаимодействии вирусных антигенов (гемагтлютининов) и специфических антител происходит образование иммунного комплекса антиген-антитело, торможение гемагглютинации.
С помощью данной реакции возможно проведение видовой идентификации вирусов и осуществление серологической диагностики вирусных инфекционных заболеваний. При постановке ориентировочной реакции торможения гемагглютинации (РТГА) на стекле на чистые обеззараженные предметные стекла наносят на некотором расстоянии друг от друга по одной капле типоспецифических иммунных и нормальной сывороток. Затем к ним добавляют по одной капле испытуемого материала и 5% взвеси эритроцитов. Компоненты перемешивают и учитывают результаты после появления хлопьевидного осадка в смеси, содержащей нормальную сыворотку.
Иммунная сыворотка, специфическая для выделенного вируса, подавляет его гемагглютинирующую активность, и эритроциты не агглютинируются.
Дата добавления: 2015-09-05; просмотров: 147 | Нарушение авторских прав
| <== предыдущая страница | | | следующая страница ==> |
| РЕАКЦИЯ СВЯЗЫВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТА | | | РТГА с целью проведения серологической диагностики |