РТГА с целью проведения серологической диагностики

При использовании РТГА с целью проведения серологиче­ской диагностики вирусных инфекционных заболеваний, берут парные сыворотки пациента, первую сыворотку получают в на­чале заболевания, вторую - спустя 2 недели и более.

Диагностическое значение имеет возрастание титра антител в 4 раза и более, что свидетельствует о положительной серологи­ческой диагностике вирусного инфекционного заболевания.

Для проведения серологической диагностики в РТГА в лун­ках планшета готовят двукратные разведения исследуемых сы­вороток пациента в изотоническом растворе хлорида натрия по 0,25 мл. Предварительно определяют титр вирусного антигена в реакции гемагглютинации с целью выбора рабочей дозы. Рабочее разведение берут в 16 раз меньше титра. К разведениям сыво­ротки добавляют по 0,25 мл рабочего разведения антигена, инку­бируют 2 часа при температуре 37°С и добавляют по 0,5 мл 1% взвеси куриных эритроцитов. После инкубирования в течение 2 часов регистрируют результат реакции. В положительном случае на дне лунки образуется плотный осадок эритроцитов в виде дис­ка с ровными краями. Устанавливают титр антител по последнему разведению сыворотки при котором отмечается поло­жительный: результат реакции, подавляется гемагглютини-рунлная активность антигена.

В РТГА ставят три контроля: I) контроль эритроцитов (0,5мл изотонического раствора хлорида натрия +0,5 мл использован­ной взвеси эритроцитов; 2) контроль используемой сыворотки на способность агглютинировать эритроциты (0,25 мл исходного разведения сыворотки + 0,25 мл изотонического раствора хлори­да натрия +0,5 мл взвеси эритроцитов); 3) контроль специфично­сти антигена (при ретроспективной диагностике инфекций) со стандартной иммунной сывороткой (0,25 мл иммунной сыворот­ки в разведении 1:10 + 0,25 мл рабочего разведения антигена + 0,5 мл взвеси эритроцитов. Широко применяется для диагностики вирусных инфекций с целью обнаружения специфических антител и для идентификации многих вирусов по их антигенам.

Дата добавления: 2015-09-05