Студопедия
Случайная страница | ТОМ-1 | ТОМ-2 | ТОМ-3
АрхитектураБиологияГеографияДругоеИностранные языки
ИнформатикаИсторияКультураЛитератураМатематика
МедицинаМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогика
ПолитикаПравоПрограммированиеПсихологияРелигия
СоциологияСпортСтроительствоФизикаФилософия
ФинансыХимияЭкологияЭкономикаЭлектроника

Последнее разведение сыворотки, в котором наблюдается агглютинация, считают ее титром.

ИММУНОЭЛЕКТРОФОРЕЗ | Твердофазный радиоиммунный анализ | РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ | Реакция преципитации в агаре. | РЕАКЦИЯ СВЯЗЫВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТА | РЕАКЦИЯ ТОРМОЖЕНИЯ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ | РТГА с целью проведения серологической диагностики | Постановка реакции нейтрализации на лабораторных животных | Реакция нейтрализации по методу цветной пробы. | Титрование антител в цветной реакции. |


Читайте также:
  1. Highway to Heaven: Ошибки, цена котором – Жизнь!.
  2. III. Перед ткацким станком Арны Бродской, на котором натянуто недотканное покрывало.
  3. Quot;Очень хорошо, Джойс. Со мной так много произошло за последнее время".
  4. quot;Природный" русский язык Аввакума, на котором он писал, был языком кротким и приветным, не "высокословным".
  5. Бог, которому ты поклоняешься, может быть тобой
  6. БОГ, КОТОРОМУ ТЫ ПОКЛОНЯЕШЬСЯ, МОЖЕТ БЫТЬ ТОБОЙ.
  7. Богатые приобретают актив Бедные лишь несут расходы Средний класс приобретает пассив, который считают активом.

Постановка развёрнутой реакции агглютинации объём­ным способом.

Для постановки реакции агглютинации требуются компонен­ты:

1) сыворотка крови, подлежащая исследованию, в количестве 0,1-0,2 мл;

2) изотонический раствор хлорида натрия;

3) корпускулярный антиген, взвесь живых или убитых бактерий (диагностикум).

Приготовление разведений сыворотки больного. Из иссле­дуемой сыворотки готовят ряд последовательных двукратных разведений, чаще всего от 1:50-1:100 до 1:1600-1:3200. В отдель­ной пробирке готовят первое, основное, разведение сыворотки, обычно 1:50 или 1:100. Основное разведение сыворотки исполь­зуют для приготовления ряда последовательных разведений.

Две последние пробирки ряда предназначены для контроля антигена и сыворотки (КА - контроль антигена и КС - контроль сыворотки)

Последнее разведение сыворотки, в котором наблюдается агглютинация, считают ее титром.

Условия: строгое участие и подбор всех компонентов

Во все пробирки, за исключением первой и последней (КС), наливают по 1 мл изотонического раствора хлорида на­трия. Затем из пробирки с основным разведением сыворотки (например, 1: 100) берут З мл и наливают по 1мл в 1-ю, 2-ю и в последнюю пробирку (КС). Далее 1 мл содержимого 2-й пробир­ки переносят в 3-ю, из 3-й пробирки такое же количество - в 4-ю, из 4-й - в 5-ю. Из 5-й пробирки (последняя опытная) 1мл со­держимого выливают в банку с дезинфицирующим раствором для сохранения одинакового объема (1мл) во всех пробирках.

Таким образом, разведение сыворотки в первой пробирке соответствует основному ее разведению (1:100); в последующих пробирках получается ряд последовательных двукратных разве­дений: 1:200, 1:400, 1:800, 1:1600.

По окончании разведений во все пробирки ряда, за исключе­нием КС, прибавляют по 1-3 капли антигена, содержащего 2 млрд. живых или убитых микробных тел в 1 мл. После этого жидкость в пробирках становится слегка мутноватой.

После добавления антигена к разведенной сыворотке штатив с пробирками встряхивают для лучшего перемешивания сыво­ротки с изотоническим раствором хлорида натрия, ставят на 2 ч в термостат при 37 °С, а затем учитывают предварительный ре­зультат реакции. Окончательный результат регистрируют через 18-20 ч. Нахождения пробирок при комнатной температуре. Положительный результат реакции агглютинации характе­ризуется образованием на дне пробирки осадка с выраженным просветлением надосадочной жидкости. Остаток на дне пробир­ки, образовавшийся, в результате склеивания микробных тел, называется агглютинатом.

Механизм реакции основан на взаимодействии детерминантных групп антигена с активными центрами иммуноглобулина в электролитной среде. Реакции протекают в две фазы - соединение антигена с антителом, вторая фаза - выделение в осадок образовавшегося ком­плекса АГ+АТ. Характер осадка зависит от природы антигена: жгутиковые бактерии дают крупнохлопьевый осадок, безжгутиковые и бескапсулярные - мелкозернистый, капсульные – тяжистый.

Учет результатов реакции агглютинации начинают с про­смотра контрольных пробирок. Реакция может считаться поло­жительной лишь в том случае, если в пробирках с контролями жидкость остается совершенно однородной, в КА - слегка мут­ной, в КС - прозрачной.

Для регистрации результатов реакции агглютинации пользу­ются четырехкрестной системой обозначения:

+ + + + полная агглютинация, при которой большой оса­док на дне располагается кучкой или в форме открытого перевер­нутого зонтика, надосадочная жидкость в пробирке совершенно прозрачна,

+ + +почти полная агглютинация, осадок такой же, как

в предыдущем случае, жидкость почти прозрачная,

+ +слабая агглютинация, небольшой осадок, жидкость непрозрачная

+отмечают следы агглютинации, осадок едва заметен, жидкость непрозрачная,

—отрицательная реакция, содержимое пробирок равномерно мутное, без осадка, по виду неотличимо от содержи­мого пробирки КА.

Реакцию агглютинации исполь­зуют для определения антител в сыворотке крови больных, на­пример при брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля), бру­целлезе (реакции Райта, Хеддлсона), туляремии и других инфек­ционных болезнях, а также для определения возбудителя, вы­деленного от больного. Эта же реакция применяется для опре­деления групп крови.


Дата добавления: 2015-09-05; просмотров: 1746 | Нарушение авторских прав


<== предыдущая страница | следующая страница ==>
Авторские программы на радио, их разновидности.| Определение серологического типа выделенного микро­ба.

mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.005 сек.)