Читайте также:
|
Клонирование животных. Нужно получить трансген, а дальше можно получать идентичное потомство. Решение проблемы - в установлении клеток, способных сохранять плюрипотентность. В 90 годах - клетки эпителия молочной железы у овец. У коров и коз использовать клетки молочной железы не удалось. Считают, что надо брать клетки эмбрионов.
Брали клетки молочной железы овцы - 277 клеток. Из них только 9 дали эмбрионы, родилась одна. Введение ядер - с помощью слияния с применением полиэтиленгликоля, на коровах - микроманипуляторы. После слияния - дробление такой клетки. Должно дойти до опеределенной стадии, и имплантация в матку. Клетки молочной железы в определенной фазе, иначе выход совсем маленький. Почему получилось на овцах и не получилось на других. У овец - особенности дробления. Первые 3 деления - несколько суток. У других - гораздо быстрее. А в период дробления ни один ген не экспрессируется. Считается, что перенесенное ядро при этом осовобождается от репрессоров и связывается с активирующими белками яйцеклетки. Считается, что более детальное изучение формирования ранних стадий может дать прогресс в отношении других млекопитающих.
Птицы
Сложность в том, что при оплодотворении в яйцеклетку проникает несколько сперматозоидов, какой сольется - неизвестно. Введение в муж пронуклеус невозможно. Пробовали вводить в цитоплазму, не получилось. Выяснилось, что можно трансфецировать можно зародыши. Подошли ретровирусные вектора млекопитающих. Использовали маркерные гены, полученные цыплята и перепелята наследовали маркерный ген и не продуцировали вирусов. Возникло возражение, что присутствие ретровирусного генома нежелательно. Используют липосомы для введения ДНК на других векторах. Используют бластомеры куриных эмбрионов. Когда начинается развитие эмбриона, его разделяют на клетки и смешивают с суспензией липосом. Добиваются слияния и далее суспензию вводят в подзародышевую область свежеотложенных яиц предварительно облученных радиацией. Облучение необходимо для гибели части клеток исходного зародыша. Трансфецированные бластомеры с большей вероятностью закрепляются в эмбрионе (660 рад/час). Дальше инкубация - птенцы, где в одних клетках есть маркеры, в других нет. Химеры. Дальше химерных цыплят разводят и анализируют пока, не окажется, что маркер - в любой клетке. Это основатель чистой линии.
Получение пород кур, устойчивых к инфекциям.
Получение пород с измененным составом желтка и мяса. Не употребляют из-за жира и холестерола. Клонированные гены овальбумина, вычленили промоторы и хотят поменять состав белков, хотят вводить гены человека, чтобы из яичного белка получать мед перпараты.
Рыбы
Выделять ДНК научились довно. Вводят электропорацией, трансфекцией, микроинъекции. Можно вводить прямо в цитоплазму. Вводят на вирусных векторах и конкретных генов, ДНК может быть линейной. Либо в цитоплазму яйцеклеток, либо на стадии 4 клеток при дроблении. Дальше оставляют в оптимальных условиях. 70% содержат чужДНК. Хотят модифицировать лосося. Была использована кДНК гена гормона роста лосося под промотором гена антифризного белка североамериканской бельдюги. Лосось - нерка. Такая нерка в возрасте одного года весла в 10 раз больше обычной. Аналогичный эффект - на форели. Хотят перевести на карпа. Для этих рыб проблема болезней и стрессовых воздействий. Большая проблема карпа - гибнут без видимой причины. Причем варьирует от года к году. Будут искать другие гены. Работать на рыбах легче. Главное - найти гены для улучшения их качества при разведений. разы
Дата добавления: 2015-11-16; просмотров: 48 | Нарушение авторских прав
| <== предыдущая страница | | | следующая страница ==> |
| Создание моделей наследственных болезней человека | | | Применение специализированных (дифференцированных) клеток из растущих организмов для восстановительного лечения поврежденных органов. |