Создание моделей наследственных болезней человека

Есть ряд болезней, где непонятен механизм и участие тех или иных генов: артрит, мышечная дистрофия, ряд нейродегенеративных нарушений (в т.ч. Старческие) и раковые. Когда линии делаются для изучения - одно направление. Другое - продукты каких генов могут компенсировать пат изменения, происходящие при таких болезнях. Цель - получение белков для компенсации дефекта. Именно на мышах начали отрабатывать системы секреции таких белков в молоко. Перспектива - получение в других млекопитающих.

Переход от мышей на других животных осуществлялся. Один из объектов - корова. В коровьем молоке - 35 г/л белка. Они самые высокоудойные. Начали работу в начале 90 годов. Использовали ооциты, которые легко получить с мясокомбинатов. Ооциты вымывают из яичников и создают условия для созревания в яйцеклетки. Проводят слияние яйцеклеток со сперматозоидами и тут же подвергают суспензию центрифугированию по особой методике с целью уплотнить желток и сделать видимым муж пронуклеус. Далее микроинъекция (конструкция на вирусных векторах) и создают условия для развития зиготы в эмбрион. Эмбрионы вводят в матку коровы. Все проходит нормально без хирургического вмешательства. На определенной стадии развития эмбрионов отбирают небольшое количество клеток и при помощи ПЦР определяют, есть ли в геноме введенная последовательность. Главное - усовершенствовать весь процесс.

• Из молока хотят получать белки для помощи гемофиликам.
• Ведутся разработки по получению безлактозного молока. Вводят лактазу.
• Молоко, обогащенное каппа-казеином - за счет игперэкспрессии коровьего гена. Производство сыра зависит от этого белка.

Устойчивость к инфекционным заболеваниям. 20% стоимости продукции - стоимость ветиринарного обслуживания. Пути:

• Введение в геном конкретных генов, соответствующих нужным антителам.

Считают, что применимо к крупному, мелкому и свиньям. В отношении мелкого - работают по получению вариантов по получению в молоке белков. Сделано даже больше чем на коровах. Промоторы бета-лактоглобулина, лактоказеина козы - стандартные последовательности, работают в мышах, коровах и овцах. Промотор дает экспрессию в клетках млечной железы. Соединяли с активатором плазминогена, альфа-антитрипсином (очень перспективно), фактором свертываемости VIII, IL-2 (может быть эффективен при лечении рака почек, меланомы), лактоферином, урокиназой.

Полученные овцы и козы не имеют отклонений в лактации и молоком можно вскармливать потомство.

Из других вариантов - повышение овец с повышенной скоростью роста шерсти. Ген инсулиноподобного фактора роста I овец под промотором из гена кератина мыши (для экспрессии в эпидермальных клетках).

Дата добавления: 2015-11-16