Читайте также: |
|
ЛИНЕЙНОСТЬ
Для установления максимума светопоглощения раствора кислоты глутаминовой снимают спектр поглощения раствора СО в воде очищенной. Приготовление раствора описано ниже при построении градуировочного графика. Также измеряют спектр поглощения таблеток кислоты глутаминовой (методика приготовления раствора таблеток приведена в разделе «Прецизионность»). Максимумы поглощения должны совпадать при λmax.
Построение градуировочного графика
Точную навеску кислоты глутаминовой (около 0,05 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 50 мл воды очищенной, нагревают на водяной бане до растворения. После охлаждения доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).
В мерные колбы вместимостью 50 мл последовательно вносят 0,5 мл; 1,0 мл; 1,5 мл; 2,0 мл; 2,5 мл раствора А, прибавляют 1 мл фосфатного буферного раствора с рН 6,8 и 3 мл 1% спиртового раствора нингидрина, нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Затем охлаждают и доводят водой очищенной до метки.
Оптическую плотность каждого раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 490 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.
Раствор сравнения
В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл воды, 1 мл фосфатного буферного раствора с рН 6,8 и 3 мл 1% спиртового раствора нингидрина, нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин., затем охлаждают и доводят водой очищенной до метки.
Данные заносят в таблицу.
Таблица 26. Результаты измерения оптической плотности.
V р-ра СО кислоты глютаминовой(мл) | 0,5 | 1,0 | 1,5 | 2,0 | 2,5 |
Конц. р-ра, г/мл | 0,000005 | 0,00001 | 0,000015 | 0,00002 | 0,000025 |
Оптическая плотность А |
Строят градуировочный график, рассчитывают уравнение градуировочного графика и коэффициент корреляции.
ПРАВИЛЬНОСТЬ
Приготовить три модельных смеси таблеток кислоты глутаминовой.
Таблица 27. Приготовление модельных смесей таблеток кислоты глутаминовой
Модельная смесь | 1 (А1) | 2 (А2) | 3 (А3) |
Навеска кислоты глутаминовой - субстанции (г) | 0,200 | 0,250 | 0,300 |
Таблеточная масса – натрия хлорид (г) | 0,200 | 0,150 | 0,100 |
Средняя масса | 0,400 | 0,400 | 0,400 |
.
Модельная смесь А1. Точные навески кислоты глутаминовой – субстанции (0,200 г) и таблеточной массы – натрия хлорида (0,200 г) смешивают в ступке до однородной массы.
Модельная смесь А2. Точные навески кислоты глутаминовой – субстанции (0,250 г) и таблеточной массы – натрия хлорида (0,150 г) смешивают в ступке до однородной массы.
Модельная смесь А3. Точные навески кислоты глутаминовой – субстанции (0,300 г) и таблеточной массы – натрия хлорида (0,100 г) смешивают в ступке до однородной массы.
Растворы Б1, Б2, Б3. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по 0,10 г модельной смеси А1 (1) и далее проводят определение как указано в разделе «Линейность».
Растворы Б4, Б5, Б6. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по 0,10 г модельной смеси А2 (2) и далее проводят определение как указано в разделе «Линейность».
Растворы Б7, Б8, Б9. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по 0,10 г модельной смеси А3 (3) и далее проводят определение как указано в разделе «Линейность».
Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 490 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.
Параллельно измеряют оптическую плотность СО 0,001% раствора кислоты глутаминовой.
Приготовление раствора СО кислоты глутаминовой:
Точную навеску кислоты глутаминовой (0,05 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане, доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).
В мерную колбу вместимостью 50 мл вносят 1,0 мл раствора А и далее проводят определение как указано в разделе «Линейность».
1 мл раствора содержит 0,00001 г/мл СО кислоты глутаминовой.
Расчет содержания кислоты глутаминовой в процентах (открываемость) проводят по формуле:
(1),
где: Ах – оптическая плотность исследуемого раствора;
Ао – оптическая плотность раствора СО кислоты глутаминовой;
ах – масса навеска исследуемого образца таблеточной массы кислоты глутаминовой (0,2 г; 0,25 г; 0,3 г);
0,00001 – содержание кислоты глутаминовой в г в 1 мл раствора СО;
С1, С2, С3 – содержание кислоты глутаминовой в модельных смесях.
Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).
ПРЕЦИЗИОННОСТЬ
Приготовить модельный раствор таблеточной массы кислоты глутаминовой № 2 (табл. 2).
Готовят параллельно по три раствора.
Растворы А1, А2, А3. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают точную навеску (около 0,05 г) таблеточной массы кислоты глутаминовой модельной смеси 2 и далее проводят определение по методике, приведенной в разделе «Линейность».
Растворы А4, А5, А6. В другие три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают точную навеску (около 0,1 г) таблеточной массы кислоты глутаминовой модельной смеси 2 и далее проводят определение по методике, приведенной в разделе «Линейность».
Растворы А7, А8, А9. В следующие три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают точную навеску (около 0,15 г) таблеточной массы кислоты глутаминовой модельной смеси 2 и далее проводят определение по методике, приведенной в разделе «Линейность».
Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 490 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора СО кислоты глутаминовой.
Расчет содержания кислоты глутаминовой в г/мл проводят по формуле:
(2),
где: Ах – оптическая плотность исследуемого раствора;
Ао – оптическая плотность раствора СО кислоты глутаминовой;
0,00001 – содержание кислоты глутаминовой в г в 1 мл раствора СО;
ах – навеска таблеточной массы кислоты глутаминовой, г;
Рср – средняя масса таблеток кислоты глутаминовой, г.
Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).
Дата добавления: 2015-10-21; просмотров: 207 | Нарушение авторских прав
<== предыдущая страница | | | следующая страница ==> |
Алкалиметрическим методом | | | Левомицетина в максимуме светопоглощения |