Студопедия
Случайная страница | ТОМ-1 | ТОМ-2 | ТОМ-3
АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатика
ИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханика
ОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторика
СоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансы
ХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника

Кислоты глутаминовой спектрофотометрическим методом

Читайте также:
  1. A. Подавляют всасывание фолиевой кислоты
  2. A. Производное гидрозида изоникотиновой кислоты
  3. Алкалиметрическим методом
  4. АЛКАЛИМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ
  5. АМИНОКИСЛОТЫ
  6. АРГЕНТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ
  7. Б) Методом измерения

ЛИНЕЙНОСТЬ

 

Для установления максимума светопоглощения раствора кислоты глутаминовой снимают спектр поглощения раствора СО в воде очищенной. Приготовление раствора описано ниже при построении градуировочного графика. Также измеряют спектр поглощения таблеток кислоты глутаминовой (методика приготовления раствора таблеток приведена в разделе «Прецизионность»). Максимумы поглощения должны совпадать при λmax.

Построение градуировочного графика

Точную навеску кислоты глутаминовой (около 0,05 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 50 мл воды очищенной, нагревают на водяной бане до растворения. После охлаждения доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).

В мерные колбы вместимостью 50 мл последовательно вносят 0,5 мл; 1,0 мл; 1,5 мл; 2,0 мл; 2,5 мл раствора А, прибавляют 1 мл фосфатного буферного раствора с рН 6,8 и 3 мл 1% спиртового раствора нингидрина, нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Затем охлаждают и доводят водой очищенной до метки.

Оптическую плотность каждого раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 490 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

Раствор сравнения

В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл воды, 1 мл фосфатного буферного раствора с рН 6,8 и 3 мл 1% спиртового раствора нингидрина, нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин., затем охлаждают и доводят водой очищенной до метки.

Данные заносят в таблицу.

Таблица 26. Результаты измерения оптической плотности.

V р-ра СО кислоты глютаминовой(мл) 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5
Конц. р-ра, г/мл 0,000005 0,00001 0,000015 0,00002 0,000025
Оптическая плотность А          

Строят градуировочный график, рассчитывают уравнение градуировочного графика и коэффициент корреляции.

ПРАВИЛЬНОСТЬ

Приготовить три модельных смеси таблеток кислоты глутаминовой.

Таблица 27. Приготовление модельных смесей таблеток кислоты глутаминовой

Модельная смесь 1 (А1) 2 (А2) 3 (А3)
Навеска кислоты глутаминовой - субстанции (г) 0,200 0,250 0,300
Таблеточная масса – натрия хлорид (г) 0,200 0,150 0,100
Средняя масса 0,400 0,400 0,400

 

.

Модельная смесь А1. Точные навески кислоты глутаминовой – субстанции (0,200 г) и таблеточной массы – натрия хлорида (0,200 г) смешивают в ступке до однородной массы.

Модельная смесь А2. Точные навески кислоты глутаминовой – субстанции (0,250 г) и таблеточной массы – натрия хлорида (0,150 г) смешивают в ступке до однородной массы.

Модельная смесь А3. Точные навески кислоты глутаминовой – субстанции (0,300 г) и таблеточной массы – натрия хлорида (0,100 г) смешивают в ступке до однородной массы.

Растворы Б1, Б2, Б3. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по 0,10 г модельной смеси А1 (1) и далее проводят определение как указано в разделе «Линейность».

Растворы Б4, Б5, Б6. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по 0,10 г модельной смеси А2 (2) и далее проводят определение как указано в разделе «Линейность».

Растворы Б7, Б8, Б9. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по 0,10 г модельной смеси А3 (3) и далее проводят определение как указано в разделе «Линейность».

Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 490 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность СО 0,001% раствора кислоты глутаминовой.

Приготовление раствора СО кислоты глутаминовой:

Точную навеску кислоты глутаминовой (0,05 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане, доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).

В мерную колбу вместимостью 50 мл вносят 1,0 мл раствора А и далее проводят определение как указано в разделе «Линейность».

1 мл раствора содержит 0,00001 г/мл СО кислоты глутаминовой.

Расчет содержания кислоты глутаминовой в процентах (открываемость) проводят по формуле:

(1),

где: Ах – оптическая плотность исследуемого раствора;

Ао – оптическая плотность раствора СО кислоты глутаминовой;

ах – масса навеска исследуемого образца таблеточной массы кислоты глутаминовой (0,2 г; 0,25 г; 0,3 г);

0,00001 – содержание кислоты глутаминовой в г в 1 мл раствора СО;

С1, С2, С3 – содержание кислоты глутаминовой в модельных смесях.

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

ПРЕЦИЗИОННОСТЬ

Приготовить модельный раствор таблеточной массы кислоты глутаминовой № 2 (табл. 2).

Готовят параллельно по три раствора.

Растворы А1, А2, А3. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают точную навеску (около 0,05 г) таблеточной массы кислоты глутаминовой модельной смеси 2 и далее проводят определение по методике, приведенной в разделе «Линейность».

Растворы А4, А5, А6. В другие три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают точную навеску (около 0,1 г) таблеточной массы кислоты глутаминовой модельной смеси 2 и далее проводят определение по методике, приведенной в разделе «Линейность».

Растворы А7, А8, А9. В следующие три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают точную навеску (около 0,15 г) таблеточной массы кислоты глутаминовой модельной смеси 2 и далее проводят определение по методике, приведенной в разделе «Линейность».

Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 490 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора СО кислоты глутаминовой.

Расчет содержания кислоты глутаминовой в г/мл проводят по формуле:

(2),

где: Ах – оптическая плотность исследуемого раствора;

Ао – оптическая плотность раствора СО кислоты глутаминовой;

0,00001 – содержание кислоты глутаминовой в г в 1 мл раствора СО;

ах – навеска таблеточной массы кислоты глутаминовой, г;

Рср – средняя масса таблеток кислоты глутаминовой, г.

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).


Дата добавления: 2015-10-21; просмотров: 207 | Нарушение авторских прав


Читайте в этой же книге: Анализа ингредиентов лекарственных средств по показателю | Валидационная оценка методик титриметрического и | Валидационная оценка определения прецизионности титриметрическим и спектрофотоколориметрическим методами | ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОПРОВЕРКИ | МЕТОДИК КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИОДИМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ | ПРАВИЛЬНОСТЬ | КИСЛОТЫ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ | КИСЛОТЫ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ АЛКАЛИМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ | В минимуме светопоглощения | Левомицетина СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ |
<== предыдущая страница | следующая страница ==>
Алкалиметрическим методом| Левомицетина в максимуме светопоглощения

mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.008 сек.)