Разделение и идентификация смеси 2-х аминокислот в присутствии «свидетелей».

Учебная задача: Разделить и идентифицировать методом восходящей хроматографии известную смесь аминокислот в присутствии «свидетелей».

Методика выполнения: Для выполнения работы используется высокий цилиндр (хроматографическая камера), закрытый стеклом (желательно пришлифованным), в который наливается жидкость (система). В цилиндр помещают полоску хроматографической бумаги с учетом размера цилиндра, на которую предварительно нанесены вещества для хроматографирования, таким образом, чтобы нижний конец полоски был погружен в жидкость, а бумага свободно свисала вниз, не касаясь стенок сосуда. Под действием капиллярных сил подвижная жидкость поднимается вверх по бумаге и разделяет компоненты смеси, которые движутся по слою бумаги с неодинаковой скоростью. Опыт считается законченным, когда фронт растворителя достигнет верхнего края полоски, не доходя 1-1,5 см. После этого хроматограмму вынимают, отмечают линию фронта, высушивают и проявляют нингидридом. Определяют состав смеси аминокислот по R_f и сравнивают с R_f «свидетеле». Хроматограмму вклеивают в журнал.

Примечание: 1. Линия старта должна быть выше уровня жидкости в цилиндре.

2. Чтобы избежать посторонних пятен, следует насколько возможно не касаться листа бумаги руками.

3. При проявлении хроматограммы следует опрыскивать её несколько раз из пульверизатора раствором нингидрида так, чтобы бумага становилась слегка влажной и на ней не образовывались струйки раствора. Просушить на воздухе, а затем в сушильном шкафу до проявления.

Дата добавления: 2015-07-25