Определение группы крови системы АВО по стандарт-ным отмытым эритроцитам с известной групповой принадлежностью

Оснащение: стандартные эритроциты О (I), A (II), В (III)групп в одной серии во флаконах; глазные пипетки, сы-воротка исследуемой крови в пробирке с подписанной фамилией и инициалами лица, которому она принадле-жит; тарелка или планшетка со смачиваемой поверхнос-тью; карандаш; длинная стеклянная пипетка с резино-вой грушей; изотонический раствор хлорида натрия; часы; спирт; вата; резиновые перчатки.

Техника определения:

• определяют пригодность стандартных эритроцитов к работе. На этикетке флакончика со стандартными эрит-роцитами О (I) группы, кроме обозначения групповой' принадлежности, по диагонали имеется одна черная полоса, на этикетке стандартных эритроцитов А (II) группы — две параллельные синие полосы, на этикет-ке В (III) группы — три параллельные красные полосы. На каждом флаконе указаны срок действия, титр анти-генов (1:32). Внешне стандартные эритроциты представ-ляют собой однородную темно_красную жидкость;

• карандашом делят тарелку (планшетку) на три секто-ра и обозначают их О, А, В. По краю тарелки подпи-сывают фамилию и инициалы человека, у которого определяется группа крови;

• в длинную стеклянную пипетку с помощью резиновой груши набирают около 1 мл сыворотки исследуемой крови и наносят по большой капле (0,1 мл) в центр каждого сектора тарелки;

• отдельными глазными пипетками наносят по одной маленькой капле стандартных эритроцитов 0 (I), A (II),

2*

36 Общехирургические навыки

В (III) групп на пластинку, соответственно обозначен-ным секторам, каждую рядом с каплей сыворотки ис-следуемой крови; капли перемешивают отдельными стеклянными палоч-ками;

покачивают тарелку в течение 3 минут, затем добавля-ют по капле изотонического раствора хлорида натрия, для исключения неспецифической гемагглютинации, пе-ремешивают капли покачиванием тарелки и через 2 ми-нуты после этого оценивают результат (рис. 2.3).

Оценка результатов:

реакция агглютинация отсутствует с эритроцитами О (I) группы и определяется с эритроцитами А (II) и В (III) групп. Исследуемая кровь 0 (1)группы;

Рис. 2.3. Определение группы крови системы АВО по стандартным эритроцитам с известной групповой принадлежностью:

а — группа крови 0 (1); б — группа крови А (II);

в — группа крови В (III); г — группа крови АВ (IV)

2. Переливание крови

• реакция агглютинация отсутствует с эритроцитами О (I)

и А (II) групп и определяется с эритроцитами В (III) группы. Исследуемая кровь А (II) группы;

• реакция агглютинации отсутствует с эритроцитами О (I)

и В (III) групп и определяется с эритроцитами А (II) группы. Исследуемая кровь В (III) группы.

• реакция агглютинация отсутствует с эритроцитами О (I), A (II) и В (III) групп. Исследуемая кровь АВ (IV) группы.

Перекрестный способ определения группы крови по системе АВО при помощи стандартных изогемагглю_ тинирующих сывороток и стандартных эритроцитов Определение группы крови перекрестным способом

заключается в одновременном определении групповых агглютиногенов в эритроцитах испытуемой крови при помощи стандартных гемагглютинирующих сывороток и групповых агглютининов в сыворотке исследуемой кро-ви при помощи стандартных эритроцитов.

Оснащение: стандартные изогемагглютинирующиесыворотки О (I), A (II), В (III) групп двух серий каждой группы, АВ (IV) группы одной серии; стандартные эрит-роциты О (I), A (II), В (III) групп одной серии каждой груп-пы; пробирка с центрифугированной исследуемой кро-вью с указанием фамилии и инициалами лица, которому она принадлежит; физиологический раствор; планшетка со смачиваемой поверхностью; длинная стеклянная пи-петка с резиновой грушей; стеклянные палочки; каран-даш; часы; эмалированный лоток; резиновые перчатки.

Техника определения:

• оценивают пригодность к работе стандартных гемаг-глютинирующих сывороток и стандартных эритроци-тов (рассмотрено выше);

• планшетку обезжиривают спиртом, вытирают и высу-шивают;

38 • • Общехирургические навыки

• карандашом проводят горизонтальную линию, разде-ляя планшетку на две половины. В верхней половине планшетки слева направо тремя вертикальными ли-ниями обозначают секторы для стандартных изоге_ магглютинирующих сывороток ab, b и а. В нижней половине планшетки таким же образом обозначают сек-торы для стандартных эритроцитов тоже слева напра-во О, А, В. По краю планшетки подписывают фами-лию и инициалы лица, кровь которого исследуют;

• глазной пипеткой набирают стандартную гемагглю_ тинирующую сыворотку О (I) группы и помещают 2 капли в сектор ab в верхней половине планшетки. Ниже, в этот же сектор, другой пипеткой наносят такое же число капель стандартной гемагглютиниру_ ющей сыворотки О (I) группы второй серии. Отдель-ными пипетками точно так же в секторы b и а нано-сят стандартные сыворотки А (II) и В (III) групп двух серий. Таким образом в верхней половине планшет-ки всего получится 6 капель, которые образуют два ряда капель;

• в длинную стеклянную пипетку с помощью резиновой груши из пробирки с центрифугированной исследуе-мой кровью набирают 0,5 мл сыворотки (осторожно, чтобы не взболтать эритроциты) и наносят по одной капле (0,1 мл) в нижнюю половину планшетки в каж-дый сектор (секторы 0, А, В);

• набирают со дна этой же пробирки около 0,5 мл эрит-роцитов исследуемой крови и добавляют их по малень-кой капле (0,01 мл) рядом с каждой каплей стандарт-ных гемагглютинирующих сывороток, расположенных в верхней половине планшетки;

• отдельными пипетками рядом с каждой каплей иссле-дуемой сыворотки, расположенных в нижней полови-не планшетки, размещают по маленькой капле (0,01 мл)

2. Переливание крови

стандартных эритроцитов О (I), A (II) и В (III) групп со-ответственно секторам О, А и В;

• отдельными стеклянными палочками перемешивают каждую из девяти капель сывороток и крови. План-шетку периодически покачивают в течение 3 минут, затем во все капли добавляют по одной капле изото-нического раствора хлорида натрия, продолжают по-качивать планшетку еще 2 минуты и оценивают ре-зультат (рис. 2.4).

Оценка результатов. Осуществляется раздельно поданным реакции гемагглютинации стандартных сыво-роток с эритроцитами исследуемой крови (верхняя по_

Рис. 2.4. Перекрестный способ определения группы крови системы АВО:

а — группа крови О (I); б — группа крови А (II);

в — группа крови В (III); г — группа крови АВ (IV)

_4С Общехирургические навыки

ловина планшетки) и реакции гемагглютинации иссле-дуемой сыворотки со стандартными эритроцитами (ниж-няя половина планшетки). При совпадении получен-ных результатов устанавливается соответствующая группа крови.

Дата добавления: 2015-07-11