Приложение №2.

Определение активности ревматического процесса по

наличию и титру анти – О – стрептолизина.

1 этап: Определение О-стрептолизина, его рабочей дозы.

Ингридиенты	Разведения О-стрептолизина
Стрептолизин в мл	0,05	0,10	0,15	0,20	0,25	0,30	-
Физ. раствор в мл	0,25	0,20	0,15	0,10	0,05	-	0,3
Эритроциты 3% взвесь	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2
В термостат на 30 мин. при +37^0С.
Учёт результатов	Гемолиза нет	Гемолиз эритроцитов	Гемолиза нет

Рабочая доза О-стрептолизина – это его минимальное количество, которое даёт чёткий чёткий гемолиз эритроцитов. В данном примере она равна 0,15 мл.

2 этап: Определение титра анти-О-стрептолизина.

Ингредиенты	Опытные пробирки	Контроль
					Сыворотки (0,5:50)	О-стрептолизина
Разведения сыворотки больного, мл	1:50 0,5	1:100 0,5	1:200 0,5	1:400 0,5	1:800 0,5	0,5	-
О-стрептолизин в рабочей дозе, мл	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15	-	0,15
Эритроциты 5% взвесь	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2
Физ. раствор	-	-	-	-	-	0,15	0,5
В термостат на 30 мин. при +37^0С.
Учёт результатов	Задержка гемолиза	Гемолиз	Нет гемолиза	Гемолиз

Титр анти-О-стрептолизина – 1:200 (то максимальное разведение сыворотки с антителами к О-стрептолизину, которое ещё заделживает гемолиз.

Приложение № 3.

Определение титра антигиалуронидазы.

1 этап. Определение титра и рабочей дозы гиалуроновой кислоты.

Ингредиенты	Пробирки
Гиалуроновая кислота, мл	0,05	0,1	0,2	0,25	0,3
Дистилированная вода, мл	0,25	0,2	0,1	0,05	-
В термостат, +37^0С на 30-40 мин.
Уксусная кислота, капли	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.
Учёт результатов	Нет сгустка	Сгусток

Рабочая доза равна 0,2 мл. Это то минимальное количество, которое под действием уксусной кислоты даёт сгусток.

2 этап. Определение титра гиалуронидазы.

Ингредиенты	Пробирки
					6к
Гиалуронидаза, мл	0,05	0,10	0,12	0,15	0,20	0,25
Дистилированная вода, до 0,25 мл	0,20	0,15	0,13	0,10	0,05	-
Гиалуроновая кислота в рабочей дозе, мл	0,20	0,20	0,20	0,20	0,20	0,20
В термостат, +37^0С на 30 мин.
Уксусная кислота	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.
В термостат, +37^0С на 30 мин.
Учёт результатов	Сгусток	Нет сгустка

Титр гиалуронидазы 0,12 мл (минимальный объём при котором сгусток уже не образуется в результате разрушения гиалуроновой кислоты ферментом гиалуронидазы ).

3 этап. Определение титра антигиалуронидазы (антител против

гиалуронидазы).

Ингредиенты	Пробирки	Контроли
					Сыворотки 1:50	Гиалуро нидазы	Гиалуроновой кислоты
Сыворотка крови больного (разведения), мл	1:50 0,5	1:100	1:400 0,5	1:800 0,5	1:1600 0,5	0,5	-	-
Гиалуронидаза в рабочей дозе, мл	0,12	0,12	0,12	0,12	0,12	-	0,12	-
В термостат, +37^0С на 30-40 мин.
Гиалуроновая к-та в рабочей дозе, мл	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	-	-	0,2
Дистилированная вода, мл	-	-	-	-	-	0,32	0,7	0,62
Уксусная кислота	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.
В термостат, +37^0С на 30-40 мин.
Учёт результатов	Сгусток	Нет сгустка	Есть

8.5. Источники информации:

Список рекомендуемой литературы:

Основная:

1. Лекции

2. Методическая разработка

3. Борисов Л.Б. с соавт. Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. - М., 2002.

4. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология /Под ред. Л.Б. Борисова, А.М. Смирновой. - М., 2008.

5. Микробиология, вирусология иммунология/ под ред. В.Н. Царева.- М., 2009. – 543с.

6. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: Учебник для мед. вузов.- 3-е изд.- СПб.: СпецЛит, 2008.

7. Поздеев О.К. Медицинская микробиология: учебное пособие (под ред. Покровского В.И. - 4 изд.). М., 2008.

Оснащение практического занятия.

- набор тестов для вводного и итогового контроля

- набор ситуационных задач,

- слайды с учебными таблицами, схемами, рисунками, оверхет.

Дата добавления: 2015-10-30