Результаты количественного определения суммы флавоноидов в драже

с использованием метода добавок ГСО рутина

Содержание суммы флавоноидов в аликвоте, мкг	Добавлен ГСО ру-тина, мкг	Ожидаемое содержание, мкг	Полученное содержание, мкг	Ошибка
абс., мкг	отн.,%
157,5		207,5	212,78	5,28	2,49
157,5		257,5	255,27	-2,23	0,87
157,5		307,5	310,04	2,54	0,82

Предлагаемая методика оценена по критериям правильность, прецизионность, линейность и специфичность. На основании полученных результатов рекомендуется ввести в проект ФС драже норму показателя «содержание флавоноидов» - не менее 1,0%. По результатам проведенных исследований предложены критерии подлинности и технологические показатели качества драже: внешний вид, влажность не более 2%, целостность 99,33±0,17%, прочность 4±1 кг/см², средняя масса 0,45±0,04 г, средний размер драже 9,05±0,07 мм, распадаемость 300±15мин. Изучена стабильность драже в процессе хранения и установлен срок годности – 2 года.

Фармакологические исследования

Исследования безопасности разработанных растительных средств (сбора, экстракта сухого и драже) показали что, они относятся к группе практически нетоксических веществ.

Изучение эффективности применения разработанных растительных средств проводили при моделировании дисбактериоза кишечника на животных. Введение канамицина сульфата сопровождалось выраженными дисбиотическими изменения-ми в тонком и толстом кишечнике – резко возрастало содержание E.coli с одновременным снижением важных для микробиоценоза показателей, как количество бифидо- и лактобактерий, появлением значительного количества условно-патогенных микроорганизмов, в частности стафилококка и дрожжеподобных грибов рода Candida sp. При изучении профилактического действияисследуемых растительных средств, которые вводили параллельно с канамицином, было отмечено, что явления дисбактериоза в тонком и толстом кишечнике при их применении были выражены, но в значительно меньшей степени, чем в контрольной группе. Изучение лечебного действия исследуемых препаратов, которые применяли после 5-ти дневного введения канамицина сульфата показало, что под влиянием исследуемых объектов, значительно быстрее происходило восстановление нормальных показателей микробиоценоза. Так, на 7-е сутки эксперимента содержание E.coli и условно-патогенных микроорганизмов еще незначительно отличались от контрольной группы, хотя были ниже, а содержание бифидо - и лактобактерий начинало возрастать. На 14-е сутки восстановление микроэкологии кишечника было уже более выраженным и на 21-е сутки показатели полностью нормализовались.

ВЫВОДЫ

1. На основании анализа литературных данных и результатов собственных исследований по определению биологической активности разработан и обоснован рациональный состав растительной композиции, рекомендуемой для профилактики и лечения нарушений микрофлоры кишечника.

2. Установлены макро - и микродиагностические признаки растительной композиции, позволяющие идентифицировать ее составные компоненты.

3. С помощью качественных реакций, хроматографических методов исследования изучен качественный состав биологически активных веществ сбора; методом ВЭЖХ подтверждено присутствие флавоноидов, фенолкарбоновых, оксикоричных и органических кислот. Выделены и идентифицированы индивидуальные вещества (рутин, кверцетин, гесперидин, лютеолин-7-глюкозид, апигенин, галловая кислота), структура которых установлена на основании УФ-, ИК-, ¹Н-ЯМР-, ¹³С-ЯМР-спектров и физико-химических констант. Методом хроматомасс-спектрометрии изучен компонентный состав эфирного масла сбора.

4. Определено количественное содержание в сборе эфирных масел 1,140±0,025%; аскорбиновой кислоты 0,0430±0,002%; органических кислот 4,07±0,13%; полисаха-ридов 3,08±0,12%; оксикоричных кислот 1,26±0,04%; кумаринов 0,32±0,01%; антра-ценпроизводных 0,96±0,02%; каротиноидов 0,035±0,001%, сапонинов 1,18±0,03%, суммарное содержание аминокислот (6,15%). Изучен элементный состав сбора и установлено присутствие макро -(K, Na, Ca, P) и микроэлементов (Zn, Fe, Mn, Cu, J).

5. Разработаны методики количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин и суммы дубильных веществ; проведена их валидационная оценка, которая показала соответствие критериям правильность, прецизионность, линейность и специфичность.

6. Установлены числовые показатели качества сбора и нормы их содержания: влаж-ность - не более 14%; зола общая - не более 11%; зола, нерастворимая в 10% растворе HCl, - не более 3%; содержание примесей органических - не более 2% и минеральных - не более 1%; содержание частиц, не проходящих сквозь сито с d=5 мм, - не более 10% и частиц, проходящих сквозь сито с d=0,18 мм, - не более 8%; содержание дубильных веществ - не менее 9 %; суммы флавоноидов в пересчете на рутин не менее - 1,4%; показатели микробиологической и радиологической чистоты, рекомендуемый срок годности - 2 года.

7. Разработан способ получения экстракта сухого из сбора с учетом подобранных оптимальных условий экстракции, а также контроля выхода биологически активных веществ на различных стадиях технологического процесса и в конечном продукте; изучены его технологические характеристики и определены показатели качества.

8. Разработан оптимальный состав соотношения кишечнорастворимой лекарствен-ной формы на основе экстракта сухого из сбора в виде драже: растительный экстракт 0,1г, вспомогательные вещества (желатин, крахмал, глюкоза, ацетилфта-лилцеллюлоза, коллидон, сахарный сироп) до массы 0,45 г; предложена технологическая схема их получения, определены критерии подлинности и качества драже, проведена валидация методики количественного определения флавоноидов.

9. Методами фармакологических исследований доказана безопасность разработанных растительных средств (сбора, экстракта сухого и драже) и эффективность их применения для профилактики и лечения нарушений микро-флоры кишечника при экспериментально моделированном дисбактериозе.

10. Разработаны проекты фармакопейных статей на сбор и лекарственную форму.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Влияние растительного сбора на дисбактериоз кишечника / К.А. Пупыкина, Н.Ж. Басченко, … Е.А. Клыш [и др.] // «Фармация». - 2007. - №6. - С. 37-39.

2. Сравнительное изучение антиоксидантной активности растительных сборов / С.Р. Хасанова, Т.И. Плеханова,…Е.А.Клыш [и др.] // «Вестник ВГУ. Секция Химия. Биология. Фармация». – Вып.1. – 2007. – С.163-166.

3. Клыш, Е.А. Разработка оптимальных условий получения эфирного масла из растительного сбора и изучение его компонентного состава / Е.А.Клыш, К.А.Пупыкина // «Башкирский химический журнал». – Т.16, №4. 2009.–С.129–130.

4. Патент РФ № 2332226 на изобретение «Сбор лекарственных растений для профилактики и комплексного лечения дисбактериоза кишечника» // К.А. Пупыкина, В.А. Лиходед, Г.А. Павлова, Е.А. Клыш // Бюл. № 24 от 27.08.2008г. - 3с.

5. Клыш, Е.А. Оценка влияния экстракта из растительного cбора на восстановление нормального микробиоценоза кишечника / Е.А. Клыш, К.А. Пупыкина // «Традиционная медицина» –2010.-№3 (22) // Сборн.научн.трудов II Рос.фитотерапевт.съезда. – С. 43-44.

6. Фармакогностическое изучение сборов для комплексного лечения язвенной болезни желудка, двенадцатиперстной кишки и дисбактериоза / К.А. Пупыкина, В.А. Лиходед, Е.А. Клыш, Л.В. Рогачева //«Запорожский медицинский журнал». - 2007. - №2.- С.134-136.

7. Пупыкина, К.А. Исследования растительного сбора для комплексного лечения дисбактериоза на содержание макро- и микроэлементов / К.А. Пупыкина, Е.А. Клыш //«Медицинский вестник Башкортостана» (спец. выпуск) «Актуальные вопросы современной фармации и фарм. образования». - Уфа, 2006. – Т.4, №1 – С.135-136.

8. Пупыкина, К.А. Аминокислотный состав растительного сбора для комплексного лечения дисбактериоза / К.А. Пупыкина, Е.А. Клыш // Матер. межвуз. науч.-практ. конф. «Актуальные проблемы технических, естественных и гуманитарных наук».–Уфа, 2006 г.– С.312-314.

9. Изучение острой токсичности сборов для комплексного лечения язвенной болезни желудка, двенадцатиперстной кишки и дисбактериоза /К.А. Пупыкина, Н.Ж. Басченко, …Е.А. Клыш [и др.] // Матер. Всерос. научно-практ. конф. «Новые достижения в создании лекарственных средств растительного происхождения» - Томск, 2006.– С. 287-288.

10. Пупыкина, К.А. Фармакогностическое изучение сбора для комплексного лечения дисбактериоза / К.А. Пупыкина, Е.А. Клыш // Матер. научно-практ конф. «Вопросы теоретической и практической медицины».- Уфа, 2006. С.445-446.

11. Разработка оптимальных условий получения экстрактов из растительных сборов при заболеваниях желудочно-кишечного тракта / К.А. Пупыкина, Л.В. Рогачева, Е.А. Клыш //«Медицинский вестник Башкортостана» (спец. выпуск).-Сборн. научн. трудов юбил. конф. - Уфа, 2006. – Т.4, №1 – С.160-162.

12. Применение фитотерапии в комплексном лечении дисбактериоза кишечника / К.А. Пупыкина, Е.А. Клыш, Г.А. Павлова [и др.]//«Медицинский вестник Башкортостана».-Т.1, №1 (спец. вып.) «Актуальные вопросы современной фитотерапии».– Уфа, 2006.– С. 62-64.

13. Изучение возможности использования лекарственных растительных средств для комплексного лечения заболеваний ЖКТ / К.А. Пупыкина, Е.А. Клыш, Л.В. Рогачева // Матер. респ. конф. «Медицинская наука-2006». - Уфа, 2006. – 120-122.

14. Пупыкина, К.А. Фитотерапия в комплексном лечении дисбактериоза кишечника. / К.А. Пупыкина, Е.А. Клыш // «Практическая фитотерапия», 2006. - №3.– С. 22-25.

15. Комплексное лечение дисбактериоза кишечника с использованием растительного сбора / К.А. Пупыкина, Е.А. Клыш, Г.А. Павлова, О.В. Позолотина // «Традиционная медицина-2007»: Сборн. научн.трудов конгресса. – Москва,2007. - С.81-82.

16. Пути переработки растительных сборов, разработанных для профилактики и комплексного лечения заболеваний ЖКТ / К.А. Пупыкина, Л.В. Старцева, Е.А. Клыш // Сборн. научн. тр. Междунар. симп. «Новые и нетрад. растения и перспективы их использования». - Т. III - Пущино, 2007. - С. 399-401.

17. Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в сборах / К.А. Пупыкина, С.А. Мещерякова, Е.А. Клыш [и др.] // Матер. Рос. науч.-практ.конф., посвящ.70-летию ПФГА. – Пермь, 2007. – С. 455 – 458.

18. Клыш, Е.А. Разработка условий получения экстракта из растительного сбора / Е.А. Клыш, К.А. Пупыкина //«Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» Сборн. научных трудов. – Пятигорск, 2010. – С. 196 – 198.

19. К вопросу изучения экстракта из сбора для профилактики и комплексного лечения дисбактериоза // А.З.Хасанова, Е.А. Клыш, К.А. Пупыкина [и др.] // Матер. респуб. научн. студ. и мол.уч.«Вопросы теорет.и практ. медицины». -Т.2.-Уфа, 2010.- С. 189 – 190.

20. Разработка состава и технологии получения драже с растительным экстрактом из сбора для комплексного лечения дисбактериоза / Е.А. Клыш, Ю.В. Шикова, К.А. Пупыкина [и др.] // Вестник ПГФА, №7, 2010. - Матер. Рос. науч.-практ.конф. – Пермь, 2010. – С. 88-89.

21. Изучение возможности использования растительного сбора для профилактики и комплексного лечения кишечных инфекций / К.А.Пупыкина, Е.А.Клыш, Д.А.Валишин [и др.] // Сбор.тез.V Междунар. фор.«Интегративная медицина».–Москва, 2010.- С.180-181.

__________________________________________________________________

Лицензия № 0177 от 10.06.96г.

Подписано к печати 01.04.2011г.

Отпечатано на ризографе с готового оригинал-макета,

представленного авторами.

Формат 60х84 ¹/₁₆. Усл.-печ.л. 1,63.

Тираж 100 экз. Заказ № 22.

450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3,

ГОУ ВПО «Башгосмедуниверситет Росздрава»

Дата добавления: 2015-07-07