Обессоливание

Обессоливание образцов было одним из первых применений техники гель-фильтрации и до сих пор остается одним из важнейших. Термин «обессоливание» не только означает удаление солей из раствора, но и отделение низкомолекулярных компонентов от раствора макромолекул. Для процесса обессоливания подбирают такой тип носителя, чтобы высокомолекулярная фракция выходила в свободном объеме колонки, в то время, как низкомолекулярные примеси распределяются между порами геля и подвижной фазой. А поскольку разделение между низко- и высокомолекулярными фракциями весьма хорошее, возможно проводить нанесение больших объемов образца (до 30% от общего объема колонки).

Здесь следует отметить еще один немаловажный аспект. При проведении гель-хроматографии происходит разбавление нанесенного образца по мере его прохождения по хроматографической колонке. При малых объемах наносимого образца, разбавление на выходе может достигать 4 и более раз. При загрузке больших объемов образца степень разбавления снижается, напр. при загрузке образца объемом около 30% от объема колонки, он разбавляется не более, чем на ¼.

Обессоливание при помощи гель-фильтрации значительно эффективнее и быстрее диализа, поэтому используется при работе с лабильными биологическими объектами.

После проведения химических модификаций макромолекул избыток реагентов может быть также удален гель-фильтрацией.

Дата добавления: 2015-10-02