Читайте также:
|
|
Особенности экспрессии клонированных эукариотических генов в клетках E. coli. Универсальность генетического кода подразумевает, что в прокариотической клетке возможна транскрипция и трансляция любой последовательности, при условии сигналов инициации и терминации транскрипции и трансляции, правильно узнаваемых прокариотической клеткой.
Так как большинство эукариотических генов раздроблены, они не могут быть в своем первичном виде экспрессированы в прокариотических клетках, где отсутствует система сплайсинга. Для преодоления данного препятствия используют зрелые матричные РНК, выделенные из эукариотических клеток, на основе которых с помощью обратной транскриптазы синтезируют комплиментарные цепи ДНК (кДНК), а затем на них достраивают комплиментарную цепь, получая двухцепочечные ДНК-копии мРНК. Такие фрагменты ДНК можно встраивать в подходящий вектор.
Гибридные гены – у которых кодирующая последовательность – эукариотическая, а сигналы инициации и терминации транскрипции и трансляции – бактериальные.
Экспрессирующие векторы E. coli делятся на 2 основные группы:
а) обеспечивающие экспрессию целевого полипептида в составе химерного белка;
б) обеспечивающие экспрессию индивидуального целевого белка.
Дата добавления: 2015-08-27; просмотров: 67 | Нарушение авторских прав
<== предыдущая страница | | | следующая страница ==> |
VII. Фагмиды | | | Векторы, обеспечивающие экспрессию целевого полипептида в составе химерного белка |