Векторы, совмещающие в себе элементы нитевидного фага и плазмиды. Впервые фагмиды созданы в 1981 г.
(a) При этом по EcoRI-участку плазмиды pBR322 был встроен фрагмент репликативной формы нитевидного фага f1 размером 1.3 т.п.н., который включает все элементы генома, необходимые для репликации и морфогенеза фага и получена фагмида pD4. При инфицировании культуры E. coli, содержащей pD4, неизмененным фагом f1, около половины секретируемых вирусных частиц несут одноцепочечную ДНК фагмиды. Вторая половина несет одноцепочечную ДНК фага f1.
(б) Фрагмент генома фага f1 был перенесен в плазмиду pUC, не нарушая при этом ее генетических детерминант. Так была создана фагмида pEMBL. В зависимости от ориентации вcтроенного фрагмента чужДНК в фагмиде, секретируемые вирусные частицы впоследствии несут в своем капсиде либо +-, либо –-цепь фагмиды pEMBL.
Структурные особенности вектора, необходимые для успешной экспрессии вводимого гена:
Дата добавления: 2015-08-27; просмотров: 143 | Нарушение авторских прав
| <== предыдущая страница | | | следующая страница ==> |
| VI. Фазмиды | | | МРНК, считываемая с гена, правильно транслируется белок-синтезирующим аппаратом E. coli. |