Занятие 1. 1. Для изучения влияния температуры окружающей среды на развитие микроорганизмов

1. Для изучения влияния температуры окружающей среды на развитие микроорганизмов необходимо провести посев уколом культуры микроскопического гриба A. ni-ger в чашки Петри с сусло-агаром и поместить их в термостаты с температурой 5, 15, 25, 35, 45°С на трое суток.

Посев в чашки Петри на плотную среду следует производить следующим образом: бактериологическую петлю, подвергают фламбированию, отбирают небольшое количество материала из пробирки с культурой гриба и переносят его, прикасаясь петлей к поверхности в центре пластинки среды. На боковой поверхности крышки указывают температуру, дату засева. Описанные операции проводят около пламени горелки, по возможности быстро, чтобы не загрязнить культуру посторонними микроорганизмами. Пробирку с исходной культурой следует держать в левой руке в ложбинке между указательным и большим пальцами. Вынимать ватную пробку надо правой рукой, прижимая ее к ладони мизинцем и безымянным пальдами, и обжигать края пробирки. Необходимо следить за тем, чтобы пробка не касалась посторонних предметов. Для охлаждения петли после прокаливания следует прикоснуться к поверхности агара, где нет культуры, после чего производить отбор биомассы. Перед тем, как закрыть пробирку, необходимо обжечь ее края и внутреннюю поверхность пробки.

2. Влияние активной кислотности (рН) на рост и размножение микроорганизмов изучают на примере дрожжей Saccharomyces.Для этого в пробирки, содержащие по 9,5мл стерильного сусла с величиной рН 2, 5, 7, 9, вносят стерильной пипеткой по 0,5мл суспензии дрожжей. На пробирках должны быть указаны цифры, соответствующие рН сусла. При посеве обе пробирки (со стерильным суслом и суспензией дрожжей держат в левой руке между большим и указательным пальцами в слегка наклонном положении, чтобы не замочить ватные пробки. Пипетку после засева погружают концом в дезинфицирующий раствор (0,5-3%-ный раствор хлорамина). Пробирки помещают для выращивания в термостат при 29 – З0°С на сутки.

3. Действие антисептиков на микроорганизмы изучают по влиянию сорбиновой кислоты, широко рекомендуемой для консервирования пищевых продуктов. В колбы со стерильным солодовым суслом содержащие сорбиновую кислоту с концентрацией 0,01; 0,05, 0,1; 0,5% бактериологической петлей вносят споры плесневого гриба, соблюдая условия асептики. Пробирки помещают в термостат с температурой 25°С на трое суток.

4. Антимикробное действие различных по химической природе антибиотиков исследуют на бактериях. Для этого берут чашку Петри с мясо-пептонным агаром, поле дна делят на три сектора, пометив их цифрами. Соблюдая правила стерильности, приоткрывают крышку чаши Петри и стерильной пипеткой в центр пластины среды вносят каплю суспензии бактерий и тщательно растирают ее по всей поверхности средь при помощи стерильного шпателя. Пинцетом наносят в центры секторов диски из фильтровальной бумаги, пропитанные раствором антибиотиков. В протоколе отмечают номера секторов и соответствующие им названия антибиотиков. Чашки помещают в термостат при температуре 37° на сутки.

5. Изучение влияния осмотического давления, определяемого концентрацией растворенных веществ, производят на культуре дрожжей Saccharomyces. Пекарские дрожжи разводят в дистиллированной воде до незначительной мутности суспензии. На предметное стекло наносят две капли ее на расстоянии приблизительно 3 см друг от друга. В одну из капель вносят несколько кристалликов поваренной соли и через несколько минут проводят микроскопирование капель объективом х40. Капли следует накрыть покровными стеклами, как в случае при приготовлении препарата «раздавленная капля». В плазмолизированных клетках протоплазма отделяется от оболочки сморщивается. Зарисовывают микроскопические картины плазмолизированных и неплазмолизированных клеток, указать название изучаемой дрожжевой культуры, увеличение, при котором велось наблюдение.

6. Влияние ультрафиолетового излучения на рост микроорганизмов. Засеять 5 чашек Петри с мясо-пептонннм агаром культурой Bacillus subtilus, при помощи шпателяОткрытые чашки Петри помещают под источник ультрафиолетого излучения и выдержать чашку 5, 10, 15, 20 и 25 мин. Облученные чашки помещают в термостат с температурой 37°С. После культивирования учитывают бактерицидный эффект ультрафиолетовых лучей. Для этого подсчитать колонии в контрольной зоне и в зоне облучения и определить количество погибших клеток в процентах.

Дата добавления: 2015-08-03