Low proportions of sperm can bind to the zona pellucida of human oocytes

D.Y. Liu1, C. Garrett and H.W.G. Baker

University of Melbourne Department of Obstetrics and Gynaecology and Reproductive Services, Royal Women’s Hospital, 132 Grattan Street, Carlton, Australia 3053 and Melbourne IVF, 320 Victoria Parade, East Melbourne, Australia 3002

1 To whom correspondence should be addressed. e-mail: [e-mail]

Процесс связывания сперматозоидов с ZP является необходимым этапом оплодотворения. В теоретических расчетах, в которых не учитываются места связывания на ZP, прикрепление сперматозоидов к ZP – процесс, зависящий только от общей площади ZP. В реальности связывание сперматозоидов возможно только в местах рецепторов, и в условиях избытка сперматозоидов это процесс с быстрым насыщением, то есть через короткое время все места связывания оказываются занятыми. Подсчитывалось число сперматозоидов на зоне пеллюцида после инкубирования в каплях по 20 мкл 10 ооцитов с добавлением 2х10⁴ подвижных сперматозоидов на клетку. Время инкубации – 2 часа. Используя для теоретических расчетов кинетическую теорию газов путем экстраполирования высчитывали количество сперматозоидов, которое должно оказаться связанными через 4 часа и 6часов. Затем подсчитывали реальное количество сперматозоидов на оболочке. Для инсеминации использовали 20 образцов спермы с нормоспермией и 20 образцов с субфертильной спермой. Оказалось, что при нормоспермии с оболочкой связывается 14% подв. сперматоз., при субфертильной сперме – 4,3% в среднем (наим. процент – при плохой морфологии). Т.о., более 75% подвижных сперматозоидов при нормоспермии не имеют возможности связываться с ZP.

2. Time-dependent capability of human oocytes for activation and pronuclear formation during metaphase II arrest

Hanna Balakier1,3, Agata Sojecki1, Gelareh Motamedi1 and Cifford Librach1,2

1 CReATe Program Inc. and 2 Department of Obstetrics and Gynecology, Sunnybrook and Women’s College Health Sciences Center, University of Toronto, Toronto, Ontario, Canada

3 To whom correspondence should be addressed at CReATe Program Inc., 790 Bay Street, Suite 1020, Toronto, Ontario, M5G 1N8 Canada. e-mail: [e-mail]

Цель исследования – изучить показатель оплодотворения и потенциала развития ооцитов в зависимости от времени их нахождения в МII до оплодотворения. Сравнивалось оплодотворение и дробление ооцитов, дозревших от MI до MII in vitro и эти же показатели у ооцитов в MII, полученных у тех же пациентов. Показатель оплодотворения в общем был ниже у первой группы (42% против 77%). Было найдено, что наименьший процент оплодотворения и дробления наблюдается у ооцитов, которым ИКСИ делалось сразу после экструзии PBI, и эти показатели возрастали по мере увеличения задержки ооцитов в MII (оплодотв. -43% через 2ч., 61%-через 3-6 ч.). В опытной группе также достоверно больше был процент ареста после первых делений и доля мультинуклеации, что говорит о хромосомных аномалиях. Т.о. для нормального развития зигот необходима задержка ооцитов на стадии MII.

3. Shortened exposure of oocytes to spermatozoa improves in-vitro fertilization outcome: a prospective, randomized, controlled study

M. Dirnfeld1,3, D. Bider2, M. Koifman1, I. Calderon1 and H. Abramovici1

1 IVF Units, Carmel Hospital, Rambam Medical Center, TECHNION and The Rappaport Faculty of Medicine, Haifa and 2 Department of Obstetrics and Gynecology, The Chaim Sheba Medical Center, Tel Hashomer, and Sackler School of Medicine, Tel Aviv University, Israel

Проспективное рандомизированное контролируемое исследование было проведено на ооцитах 158 пациентов в программе ЭКО для оценки воздействия на дальнейшее развитие короткой экспозиции сперматозоидов с ооцитами. Оценивались показатель оплодотворения, дробления, качество эмбрионов, процент имплантации и беременности. Показатели оплодотворения и дробления были аналогичными в обоих группах (56% и 61%, 96% и 92% соотв.), однако качество эмбрионов было достоверно выше в группе с короткой экспозицией. % беременности на ПЭ был значительно выше в группе с короткой экспозицией (42,4% против 26% при % имплантации 16% против 10%).

4. Short coincubation of gametes in in vitro fertilization improves implantation and pregnancy rates: a prospective, randomized, controlled study.

Kattera S, Chen C.

Centre for Reproductive Medicine and Gleneagles IVF Centre, Gleneagles Hospital, Singapore. [e-mail]

Цель исследования – изучить преимущества короткой коинкубации гамет по сравнению со стандартной при ЭКО. Всего исследовались 130 ооцитов (опытная группа) и 129 ооцитов (контр. группа). Время коинкубации в опытной группе составило 2 часа, в контрольной- 20 часов. Оценивалось оплодотворение, дробление, % беременности и % имплантации. Кроме того, оценивалась концентрация эстрадиола и прогестерона в культуральных средах. Не было различий в частоте оплодотворения и дробления в обеих группах, тем не менее количество эмбрионов 1-го класса было значительно больше в опытной группе, чем в контрольной. Количество эстрадиола и прогестерона было значительно больше в чашках с 20-ти часовой инкубацией гамет, что могло отрицательно повлиять на дальнейшее развитие. Показатель беременности, имплантации и качество эмбрионов было значительно выше в группе с короткой экспозицией по сравнению с длинной.

5. A prospective randomized controlled study of the effect of short coincubation of gametes during insemination on zona pellucida thickness.

Dirnfeld M, Shiloh H, Bider D, Harari E, Koifman M, Lahav-Baratz S, Abramovici H.

IVF Unit, Carmel Medical Center, Technion, Rappaport Faculty of Medicine, Haifa, Israel.

Проспективное рандомизированное исследование, целью которого было оценить толщину ZP эмбрионов через 24 и 48 часов после инсеминации в зависимости от способа инсеминации. Средняя толщина ZP через 48 ч. после оплодотворения была значительно меньше в оплодотворенных ооцитах, чем в неоплодотворенных во всех группах (длинная экспозиция, короткая экспозиция, ИКСИ). При короткой экспозиции и ИКСИ толщина ZP была достоверно ниже, чем при ЭКО стандартной продолжительности.

6. Prolonged sperm-oocyte exposure and high sperm concentration affect human embryo viability and pregnancy rate

L Gianaroli, A Fiorentino, MC Magli, AP Ferraretti and N Montanaro

SISMER, Medicine Reproductive Unit, Bologna, Italy.

Была исследована короткая экспозиция ооцитов со сперматозоидами для оценки эффективности данного метода в плане улучшения развития зиготы и жизнеспособности эмбриона. Особое внимание уделялось короткой экспозиции в случае плохого качества спермы. В проспективном рандомизированном исследовании приняло участие 167 пациентов, которые случайно распределились в опытную группу (85 чел.) и контрольную группу (82 чел.). Ооциты из группы 1 инкубировали со спермой 1 ч., из группы 2 – 16ч. В дальнейшем в каждой группе анализировались показатели использовавшейся для оплодотворения спермы и выделялись подгруппы, где присутствовал мужской фактор бесплодия. Более высокие показатели оплодотворения, дробления, беременности и имплантации были достигнуты в опытных группах по сравнению с контрольными (соотв. 74 и 68%, 53 и 41%, 27 и 12 %, 11 и 6%). Более высокий показатель оплодотворения был достигнут в группе с мужским фактором и инкубацией 1 ч. по сравн. с группой с мужским фактором и инкубацией 16ч. (78 и 65%). Максимальный показатель дробления и имплантации был в группе с нормальной спермой и инкубацией 1 ч., и они были более высокими, чем в группе с нормальной спермой и инкубацией 16ч. Т.о. продолжительная инкубация ооцитов со спермой может способствовать ухудшению сперм-ооцитарного взаимодействия и не увеличивает процент имплантации, особенно при плохом качестве спермы.

7. Reducing the time of sperm-oocyte interaction in human in-vitro fertilization improves the implantation rate

L Gianaroli, M Cristina Magli, AP Ferraretti, A Fiorentino, E Tosti, S Panzella and B Dale

S.I.S.M.E.R., Medicine Reproductive Unit, V. Mazzini, 12, 40137 Bologna, Italy.

Развитие человеческих ооцитов было оценено после сокращенной экспозиции ооцитов со спермой. Исследование проводилось на ооцитах 119 пациентов. Пациенты были случайным образом распределены на 2 группы (58 и 61 чел.), ооциты в которых подвергались короткой экспозиции в 1ч. (гр.1) и длинной в 16ч. (гр.2). Показатель оплодотворения в группе 1 был выше, чем в группе 2 (73% и 66%), подтверждая факт, что взаимодействие ооцита и сперматозоида происходит в течение первого часа. Нами исследовались флуоресцентно помеченные сперматозоиды для изучения их взаимодействия с ооцит-кумулюсным комплексом. Сперматозоиды входят в ооцит-кумулюсный комплекс через 15 минут после инсеминации. и проходят его в течение 3 часов, обнаруживаясь на ZP через 4 часа после инсеминации. Частота полиспермии была более высокой в группе с длинной инкубацией (3% против 1%).Различий в показателе дробления и качестве эмбрионов не было зафиксировано, однако в группе 1 через 40 ч. после инсеминации процент 4 и 5 клеточных эмбрионов был достоверно выше (55% против 39%). % имплантации и показатель беременности для гр.1 составили 11 и 28%, для гр.2 – 8 и 15%. Т.о., уменьшенное время экспозиции повышает жизнеспособность эмбрионов, возможно, из-за снижения потенциального ущерба от продуктов распада спермы.

8. Effects of reducing insemination time in human in vitro fertilization and embryo development by using sibling oocytes.

Coskun S, Roca GL, Elnour AM, al Mayman H, Hollanders JM, Jaroudi KA.

Department of Pathology and Laboratory Medicine, King Faisal Specialist Hospital and Research Center, Riyadh, Saudi Arabia.

Последние исследования показали благотворное влияние уменьшения коинкубации гамет при ЭКО на показатели оплодотворения, дробления и имплантации. В настоящем исследовании анализировались данные показатели при короткой и длинной экспозиции на ооцитах одного и того же пациента. 464 ооцита 36 пациентов были распределены случайным образом для проведения ЭКО в течение 1 часа и 18 часов. Показатели оплодотворения в данных группах различались недостоверно (59 и 64%). Дробление и качество эмбрионов также были сходными в обеих группах. В общей сложности 36 пациентам было перенесено 135 эмбрионов (73 из опытной группы и 62 из контрольной). Имплантировались 34 эмбриона у 18 пациентов (пок-ль имплантации-25,2%, беременности – 50%). Оплодотворение, дробление и развитие эмбрионов после часовой инкубации сравнимы и не выше, чем после 18 часовой инкубации. Эти данные говорят о том, что сокращенное время оплодотворения может быть использовано при ЭКО.

Дата добавления: 2015-07-24