Рост микроорганизмов в жидких средах

Рост микроорганизмов в жидких средах более однообразен и сопровождается помутнением среды, образованием пленки или осадка. Характеризуя рост в жидкой среде, отмечаютстепень помутнения – слабая, умеренная или сильная; особенности пленки – тонкая, плотная или рыхлая, гладкая или складчатая, а при образовании осадка указывают – скудный он или обильный, плотный, рыхлый, слизистый или хлопьевидный.

Нередко рост микроорганизмов сопровождается появлением запаха, пигментацией среды, выделением газа. Последнее обнаруживают по образованию пены, пузырьков, а также с помощью «поплавков» - маленьких запаянных с одного конца трубочек. Поплавок помещают в пробирку запаянным концом вверх перед стерилизацией среды и следят, чтобы он полностью был заполнен средой. В случае выделения газа он скапливается в поплавке в виде пузырька.

Для описания характера роста в жидких средах микроорганизмы выращивают на мясопептонном бульоне или на другой среде, обеспечивающей хороший рост этого микроорганизма. Чаще всего используют 4–7-суточные культуры.

3.2. Экспериментальная часть

Порядок выполнения работы:

1) Рассмотреть колонии бактерий и грибов, отмечая размер, форму, строение наружного края, характер поверхности, цвет колонии, мицелия грибов и органы размножения.

2) После визуального осмотра приступают к микроскопическому изучению грибов и бактерий. Для изучения бактерий используют препарат «фиксированных клеток», грибов – препарат «раздавленная капля». Следует помнить, что вегетативный мицелий большинства видов грибов не окрашен. Пигментирован только плодоносящий мицелий. Поэтому молодые колонии – белые или сероватые. По мере развития органов плодоношения колонии приобретают окраску. Для приготовления препарата «раздавленная капля» отбирают небольшой кусочек мицелия вместе с плодоносящими гифами у края колонии, на границе пигментированной и неокрашенной части колонии.

3) Микроскопировать препарат грибов сначала с объективом 8х, затем 40х, препарат бактерий – с иммерсионным объективом 90х.

4) При микроскопировании необходимо определить: у грибов - строение мицелия и плодоносящих гиф, форму и строение спор (конидий); у бактерий – форму, наличие спор.

5) Зарисовать изображения грибов и бактерий.

Препарат «раздавленная капля».

На предметное стекло наносят каплю водопроводной воды и помещают в нее небольшое количество культуры изучаемых микроорганизмов, размешивают и покрывают покровным стеклом. Культуру, выращенную на плотной питательной среде, переносят в каплю воды бактериологической петлей; культуру, выращенную в жидкой среде – стерильной пипеткой. В последнем случае каплю воды на предметное стекло можно не наносить. Капля исследуемого материала должна быть настолько мала, чтобы после прижимания ее покровным стеклом не было избытка, выступающего из-под него. В противном случае избыток жидкости необходимоудалить фильтровальной бумагой.

Препарат «раздавленная капля» используют для установления формы клеток микроорганизмов, их размеров ивзаимного расположения, способа спорообразования, наличия или отсутствия подвижности.

Препарат «висячая капля».

Каплю суспензии микроорганизмов петлей или обычным пером наносят на покровное стекло, которое переворачивают каплей вниз и помещают на специальное предметное стекло с углублением (лункой) в центре. Капля должна свободно висеть, не касаясь краев и дна лунки. Края лунки предварительно смазывают вазелином. Капля оказывается герметизированной во влажной камере, что делает возможным многодневное наблюдение за объектом.

Препарат «висячая капля» используют для наблюдения за размножением микроорганизмов, образованием и прорастанием спор, для выявления подвижности и отношения клеток к химическим раздражителям и т.д.

Препараты «раздавленная капля» и «висячая капля» особенно удобны для рассмотрения сравнительно крупных объектов – дрожжей, плесневых грибов.

Дата добавления: 2015-10-30