Идентификация микроскопических грибов

Лабораторная работа №2

Тема: Изучение морфологических признаков плесневых грибов, дрожжей.

Цель: Развивать умение микроскопирования, научить определять морфологические признаки плесневых грибов и дрожжей.

Материалы и оборудование:

1. Микроскоп

2. Микробиологические иглы

3. Петли

4. Спиртовки

5. Чашки Петри с чистыми культурами плесневых грибов

6. Водные разводки с чистыми культурами дрожжей

Общие положения и методика выполнения работы:

Идентификация микроскопических грибов

Понятие «идентификация микроорганизмов» означа­ет определение положения данного вида в систематике, т. е. его названия.

Для идентификации микроскопических грибов важными признаками являются их морфологические и куль­туральные свойства.

К морфологическим свойствам микро­скопических грибов относятся строение вегетативного тела и органов размножения.

Грибы — крупные (длина гифов — несколько десятков мкм, толщина — 10—15 мкм) и достаточно контрастные микроорганизмы, поэтому в лабораторных усло­виях для изучения морфологических свойств их микроскопируют в прижизненных неокрашенных препаратах типа «раздавленная капля» при малых (объектив 8^х) и средних (объектив 40^х) увеличениях.

Культуральными свойствами микроскопических грибов называются внешний вид грибницы, способ ее роста по отношению к среде обитания (поверхностный или глубокий). Например, мицелий гриба может развиваться на поверхности среды (мукоровые грибы) или внутри (гриб Фитофтора в картофеле).

При культивировании на питательных средах в лабораторных условиях у грибов, как правило, отмечается радиальное разрастание грибницы, образуется округлая колония. Мицелий некоторых видов грибов окрашен за счет отложения пигмента в клеточных оболочках: розовый – у гриба Фузариум, зеленый – у гриба Пенициллиум, черный – у некоторых аспергилловых грибов.

Культуральные свойства грибов исследуют невооружённым глазом (визуально).

Изучение морфологических и культуральных свойств позволяет установить название рода микроскопических грибов. Определение названия вида гриба требует дальнейшего исследования процессов жизнедеятельности микроорганизмов.

Методические указания к самостоятельной работе

Работа 1. Изучение культуральных свойств грибов.

Культуральные свойства грибов изучают невооруженным глазом (визуально) по заранее заготовленным посевам в чашках Петри. Следует обратить внимание на характер воздушного мицелия (плотный, пушистый и другой, окраска, высота) и описать его в тетрадь.

Работа 2. Изучение морфологических свойств грибов.

С целью изучения морфологических свойств грибов учащиеся делятся на подгруппы для работы с различными культурами. Каждая подгруппа готовит, микроскопирует и зарисовывает один препарат.

Из культуры гриба, выращенного на плотной среде сусло-агар, приготовляют препарат «раздавленная капля». В центре предметного стекла наносят каплю смеси спирта с глицерином (1:1). С помощью бактериологической петли, разогнутой в виде крючка, отбирают небольшое количество мицелия (мицелий следует брать в зоне, пограничной с зоной плодоношения, - граница между окрашенной и бесцветной частями). Мицелий помещают на предметное стекло в каплю жидкости; с помощью двух препаровальных игл осторожно рассредоточивают материал тонким слоем в капле и накрывают покровным стеклом.

Внимание! Пузырьки воздуха под покровным стеклом мешают микроскопии. Во избежание их образования следует опускать покровное стекло медленно, предварительно поставив его ребром у края капли.

При микроскопии (объективы 8^х и 40^х) следует отметить строение мицелия (одноклеточные или многоклеточные гифы), органов размножения – спорангиев или конидий; зарисовать специфические особенности рассмотренных грибов.

- Для изучения рекомендуется следующие представители мицелиальных грибов:

А. Препараты грибов класса Зигомицеты:

Род Ризопус – возбудители болезни ягод, корнеплодов и растительных продуктов.

Изучая рост гриба на питательной среде в чашке Петри, следует обратить внимание на стелющийся по субстрату мицелий, местами окрашенный в темно-бурый цвет. Для препарата отбирают с питательной среды длинные стелющиеся гифы (столоны). При микроскопии отмечают одноклеточный мицелий и органы размножения – спорангий и спорангиеносцы, неветвящиеся, окрашенные в темный цвет, растущие пучками и имеющие у основания корневидные отростки (ризоиды). Споры находятся внутри шаровидного спорангия (рис. 1,а).

Б. Препараты грибов класса Аскомицеты:

род Аспергиллус – возбудители плесневения непродовольственных и продовольственных товаров; некоторые виды используются в технике.

На сусле-агаре отмечают густой, воздушный, местами окрашенный в черный цвет мицелий. Для микроскопии отбирают немного пушистого мицелия, обращают внимание на многоклеточный мицелий и органы размножения – одноклеточные конидиеносцы, заканчивающиеся веерообразным расширением (стеригмы со спорами – конидиями) (рис.1, б);

Рисунок 1 Мицелиальные грибы:

А – Ризопус: 1-спорангий, 2 – споры, 3 – спорангиеносец, 4 – ризоиды;

Б – Аспергиллус: 1- конидии, 2 – стеригмы, 3 – конидненосец, 4 – вегетативные гифы;

В – Пенициллиум: 1- конидии, 2 – стеригмы, 3 – конидненосец, 4 – вегетативные гифы;

Г – Оидиум: 1- оидии, 2 – гиф;

Д – Ботритис, е – Альтернария: 1 – конидиеносец, 2-3 – конидии.

Дата добавления: 2015-10-23