Реакция коагглютинации 9 страница

Экология и распространение. Живут в организмах животных и человека. Многие виды являются сапрофитами и обитают в полости рта, ЖКТ. Единичные виды вызывают заболевания у человека – М.pneumoniae; М.hominis (условно-пат возбудители негонорейных уретритов, простатитов, сальпингитов, пиелонефритов и др. заболеваний урогенитальной сферы); М.fermentans и М.arthritidis. Из уреаплазм патогенны U.urealiticum (воспалительные процессы урогенитальной сферы).

Очень чувствительны к изменению осмотического давления, рН, увеличению температуры, УФ, дезинфектантам под действием которых быстро гибнут. Устойчивы к пенициллину (т.к. нет клеточной стенки), но чувствительны к антибиотикам.

Источник заражения – больные люди. Путь распространения – воздушно-капельный (М. pneumoniae) при близком и длительном контакте (малоустойчивы в окружающей среде). Широко распространены во всех странах мира.

Патогенез. В основе лежат уникальные свойства мембранных паразитов. Механизм включает тесный контакт мембран микроорганизмов с клетками эпителия или других тканей с помощью особых концевых структур (ЛП), взаимодействующих с рецепторами клеток микроорганизмов. При этом липидные компоненты мембран микоплазм диффундируют в мембрану клетки, а холестерин клеток микроорганизмов поступает в мембрану микоплазм. Заканчивается этот процесс откреплением или поглощением микоплазмы клеткой вследствие фагоцитоза. В последнем случае микоплазмы размножаются внутриклеточно (есть спец ферменты).

В фагоцитах из первичного очага поражения могут попадать в другие органы и длительно персистировать в организм. Токсинов не выделяют, повреждающее действие реализуется через продукты обмена (NН₄ и Н₂О₂), оказывающих неблагоприятное действие на мембраны пораженных клеток. Часто приобретает хроническое или латентное течение. Этому же способствует антигенная мимикрия.

В патогенезе определенную роль играет способность стимулировать пролиферацию окружающих их клеток, что способствует непрямому повреждению тканей, вызывая усиление клеточных иммунных реакций (ГЗТ) и увеличивает чувствительность клеток к вирусам (т.к. они интенсивно размножаются именно в делящихся клетках). Могут быть бессимптомные формы микоплазмоза; часто сочетается с ОРЗ. Условно-патогенные микоплазмы могут вызывать заболевания у лиц с иммунодефицитами в ассоциации с другими микроорганизмами.

Особенно тяжёлые заболевания в детском возрасте. У детей микоплазмоз сопровождается поражением органов дыхания и НС. Часто происходит генерализация с развитием патологических очагов в других внутренних органах. Наиболее тяжелое течение болезни у новорожденных и недоношенных.

Иммунитет. Наиболее ранняя ответная иммунная реакция носит клеточный характер, гуморальный иммунитет развивается позднее. Продолжительность приобретенного иммунитета зависит от интенсивности и формы инфекционного процесса. Например, микоплазменные пневмонии вызывают выраженный клеточный и гуморальный иммунитет на 5-10 лет.

Диагностика. Серологическое исследование с использованием РСК, ИФА, РНГА и др. В последнее время – регистрация клеточной иммунной реакции при микоплазмозе. Для ранней диагностики – ИФА мазков из бронхиальных и носоглоточных смывов и из другого материала.

Профилактика и лечение. Вакцинная профилактика к настоящему времени не разработана. Для лечения – АБ тетрациклинового ряда, эритромицин.

34. Возбудитель холеры. Лабораторная диагностика холеры. НАГ-вибрионы.

Vibrio cholerae – холерный вибрион.

Морфология.

Прямые или изогнутые подвижные палочки размерами 1,4-2,6х0,5-0,8 мкм; подвижность обусловлена одним или несколькими жгутиками. В их основании расположена базальная гранула (тело), погруженная в цитоплазму. Снаружи они покрыты оболочкой, образованной выростом наружного слоя клеточной стенки.

Хемоорганотрофы; метаболизм окислительный и бродильный. Температурный оптимум вариабелен; некоторые виды растут при температуре 20°С, большинство - при 30°С. Оксидаза-положительны. Восстанавливают нитраты. D-глюкозу и некоторые углеводы ферментируют с образованием кислоты, но не газа.Большинство видов сбраживает мальтозу, маннозу и трегалозу. Вибрионы распространены не только в пресных, но и солёных водоёмах, особенно в эстуариях рек. Покрывают дно, растительность и колонизируют организмы водных животных. Некоторые виды патогенны для водных беспозвоночных и позвоночных животных; часть вибрионов также патогенна для человека. Наибольшее медицинское значение имеют V. cholerae, V. parahaemolyticus и V. vulnificus (табл. 13-2). Типовой вид рода - V. cholerae.

Vibrio cholerae. Возбудитель холеры - тяжёлой инфекции с высокой летальностью.Европейская медицина столкнулась с холерой лишь в первой половине XIX века; до этоговремени холера вызывала эпидемии в ограниченном регионе полуострова Индостан. Закономерной особенностью эпидемиологии холеры были вспышки в период военных действий. Широкое распространение заболевания связано, в первую очередь, с колониальной экспансией Великобритании в Индии и на Среднем Востоке. В Западную Европу и Россию холера проникла вовремя польского восстания 1830-1831 гг. Основными воротами для прорыва возбудителя в Европу были некоторые регионы Ближнего Востока (Левант, Анатолия), Египет и порты Среди-земноморья. Для изучения холеры в Египет были направлены 2 экспедиции - французская (Ру, Нокар, Штраусс и Тюйе) и немецкая (Кох, Гаффки, Фишер и Тресков). Работа исследователей проходила в сложной и нервной обстановке, подогреваемой кампанией франко-прусскогошовинизма. Во время исследований Луи Тюйе заразился и погиб. К чести Коха, он сам нёс телоколлеги на кладбище и возложил на его могилу венок со словами: «Это скромный венок излавров, но им венчают героев». Работа немецкой экспедиции привела к открытию холерноговибриона («запятая Коха») в 1883 г., чему немало способствовал метод культивированиябактерий на твёрдых средах (желатина на стеклах), разработанный Кохом. После открытияхолерного вибриона было выделено большое количество гемолитических вибрионов и было предложено считать гемолитические виды непатогенными. Данный критерий считали вполне обоснованным до выделения супругами Готшлих гемолитических вибрионов из трупов мусульман-паломников на карантинной станции Эль-Тор в Египте (1906). Поскольку в то время эпидемии не было, то и роль вибриона Эль-Тор осталась недоказанной. Но в 1939 г. возбудительвызвал эпидемическую вспышку на острове Сулавеси (Индонезия), а позднее был признан этиологическим агентом седьмой пандемии холеры. В начале 1993 г. появились сообщения о вспышках холеры в юго-восточной Азии, вызванных вибрионами ранее неизвестной серогруппы, обозначенных как серовар 0139 (Бенгал).

МОРФОЛОГИЯ. Клетки холерного вибриона размерами 1,5-4,0х0,2-0,4 мкм имеют одинполярный жгутик, снабженный чехликом и продольным выростом, напоминающим ундул.

Типичные формы обычно наблюдают в образцах клинического материала; в мазках из колоний, выросших на плотных средах, доминируют палочковидные формы. Наибольшую вариабельность дают при выращивании на средах с крахмалом. Подвижность бактерий весьма выражена, и её определение (методом висячей или раздавленной капли) - важный диагностический признак. Деление клеток происходит очень быстро, на щелочной пептонной воде возбудитель даёт видимый невооружённым глазом рост уже через 6 ч. В старых культурах S-образно изогнутые, кокковидные или булавовидные инволюционные формы. Способны образовывать фильтрующиеся, а под действием пенициллина и L-формы. Тинкториальные свойства аналогичны таковым у энтеробактерий, вибрионы хорошо окрашиваются многими анилиновыми красителями. Наибольшее распространение получила окраска водным фуксином Пфайффера или.карболовым фуксином Циля. Для окраски органоидов, в частности жгутиков, предпочтительнапротрава с последующим импрегнированием солями тяжёлых металлов.

На твёрдых средах возбудитель образует небольшие круглые дисковидные прозрачные S-колонии с ровными краями, голубоватые в проходящем свете (что сразу их отличает отболее грубых и мутно-белых колоний энтеробактерий). Колонии маслянистые, легко снимаются со среды и эмульгируются, давая феномен «тяжа». Старые культуры несколько грубеют и приобретают желтовато-коричневый оттенок. На скошенном агаре через 24 чхолерный вибрион образует блестящий желтоватый налёт. На агаре с тиосульфатомцитратом, солями жёлчных кислот и сахарозой (TCBS-arap) Vibrio cholerae ферментирует последнюю и образует жёлтые колонии. На пластинках желатины через 48 ч вырастают беловатые зернистые колонии, окруженные зоной разжижения. При посеве уколом через 48-72 ч вызывает воронкообразное разжижение, его верхняя часть при просматривании сбоку представляется пузырьком воздуха; позднее разжижение увеличивается, и полость заполняется белёсой массой вибрионов. Также образуются неровные, мутные R-колониибактерии из них утрачивают чувствительность к бактериофагам, антибиотикам и не агглютинируются О-антисыворотками.

На жидких средах вызывает помутнение и образование нежной голубоватой плёнки на поверхности, её края приподняты вдоль стенок пробирки; при встряхивании она легко разрушается и оседает на дно. На 1% пептонной воде (рН 8,8-9,0) растут, опережая бактерии кишечной группы, и образуют нежную голубоватую плёнку и муть.

КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА. Факультативный анаэроб с более выраженными аэробнымисвойствами; быстро погибает в анаэробных условиях. Не образует спор и хорошо растет напростых питательных средах. Температурные пределы для роста 16-40°С; оптимум - 37°С.Может расти при высоком рН среды (7,6-8,0); подобные галофильные свойства используют в подборе элективных средств, а также применяя дезинфектанты с кислым рН.

БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА. Холерные вибрионы сбраживают с образованием кислоты (безгаза) глюкозу, сахарозу, мальтозу, маннозу, маннит, лактозу (сравнительно медленно), ле-вулёзу, гликоген и крахмал. Инертны к арабинозе, дульциту, инулину, инозиту и рамнозе.Ферментация маннозы, сахарозы и арабинозы (триада Хёйберга) имеет диагностическое значение; холерные вибрионы разлагают только маннозу и сахарозу и принадлежат к 1 группе Хейберга (по отношению к этим трём углеводам все вибрионы разделяют на 6 групп). Проявляют протеолитическую активность - разжижают желатину с образованием «воронки» с пузырьком воздуха вверху, также гидролизуют казеин. Обладают плазмокоагулирующим (свёртывают плазму кролика) и фибринолитическим (разжижают свёрнутую сыворотку по Лёффлеру) действиями. Свёртывают молоко и разлагают другие белки и их дериваты до аммиака и индола. H₂S не образуют. Восстанавливают нитраты и образуют индол; эту способность учитывают в нитрозоиндоловой реакции, также известной как Пеля-Буйдвида, или холеpa-рот реакция. На основании биохимических и биологических различий холерные вибрионы разделяют на 2 биовара (биотипа): классический (V. cholerae asiaticae) *Эль-Тор (V. cholerae eltor). В настоящее время значительная часть изолятов Эль-Тор утеряла свои гемолитические свойства и дифференцируется только по способности агглютинировать эритроциты, резистентности к полимиксину и фагу IV. Бактерии группы 0139 устойчивы к полимиксину и не проявляют гемолитическую активность

Гемолитическая активность (реакция Грейга) может варьировать; классические вибрионы способны приобретать гемолитические свойства при хранении, а вибрионы Эль-Тор могут их терять при пассировании.

АНТИГЕННАЯ СТРУКТУРА. У холерных вибрионов выделяют термостабильные О- и термолабильные Н-Аг.

Н-Аг - общие для большой группы бактерий, разделённой на А и В группы; в группу А входят холерные вибрионы; в группу В - вибрионы, биохимически отличные от холерных.

По структуре О-Аг выделяют 139 серогрупп; возбудители классической холеры и холеры Эль-Тор объединяют в 01 (изолированную от холероподобных и парахолерных вибрионов) и, несмотря на существующие биохимические различия, при исследовании на холеру обязательно проводят типирование 01-антисывороткой. Кабешима и Такано (1913) установили, что О-Аг 01 группы холерных вибрионов неоднороден и включает А-,В - и С- компоненты, разные сочетания которых присущи сероварам Огава (АВ), Инаба (АС)и Хикоджйма (АВС, промежуточный серовар). Эти свойства используют в качестве эпидемиологического маркёра для дифференцирования очагов по возбудителям, хотя иногда от одного больного можно выделить бактерии разных сероваров. У шероховатых R-форм отмечают утрату О-Аг и они, а также слизистые М-формы (с измененной структурой 0-Аг), не агглютинируются О-антисыворотками (для идентификации OR- и R-диссоциатов используют OR-антисыворотки). Бактерии серовара 0139 не агглютинируются видоспецифической 01 и типоспецифическими Огава-, Инаба- и RO-антисыворотки.

Поскольку холероподобные вибрионы также не агглютинируются 01-антисывороткой, их обозначают как неагглютинирующиеся, или НАГ, вибрионы. Гарднер и Венкатрамен установили, что вибрионы группы В имеют неоднородную структуру О-Аг и разделяются на 6серологических подгрупп, состав которых совпадает с биохимической схемой Хайберга.

БАКТЕРИОФАГИ. Холерные бактериофаги были впервые выделены д'Эреллем (1920); они специфичны (лишь изредка могут давать перекрёстные реакции с родственными видами).Все Vibrio cholerae лизируются бактериофагом группы IV (по Мукерджи, 1963), а вибрионы биовара Эль-Тор - фагами группы V; тем не менее, создать схему типирования вибрионов Эль-Тор не удалось. Многочисленные исследования показали, что холерные бактериофаги практически не имеют терапевтического эффекта.

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ. Холера - типичная кишечная инфекция, и многое в её эпидемиологиианалогично поражениям, вызываемым энтеропатогенными бактериями

Выделяют 2 типа эпидемий холеры - эпидемии-вспышки с едиными источником инфекции и путями распространения, характеризующиеся одномоментным появлением большого количества больных, и вялотекущие эпидемии с перманентной заболеваемостью небольшого контингента и трудно выявляемыми путями передачи возбудителя

Единственный природный резервуар - больные и бактерионосители; основной механизм передачи - фекально-оральный, реже - контактный. Факторы передачи - пищевые продукты, вода, объекты окружающей среды. Определённую роль играют мухи, способные переносить возбудитель с испражнений на пищевые продукты. Несмотря на то, что выделение возбудителя в окружающую среду происходит в течение короткого времени, большое количество скрытых форм поддерживает циркуляцию возбудителя.

Индивидуальная восприимчивость к холере чрезвычайно вариабельна. Достаточно вспомнить неудачные опыты с самозаражениями И.И. Мечникова, З.В. Ермольевой и Петтенкофера. Наиболее предрасположены к холере лица, проживающие в неблагоприятных условиях и не соблюдающие правил личной гигиены. При эпидемических вспышках большую часть больных составляют взрослые, чаще мужчины; при вялотекущих эпидемиях в эндемичных районах основную группу заболевших составляют дети.

В большинстве случаев подъём заболеваемости наблюдают в тёплый сезон, но в эндемичном регионе сезонные колебания имеют серьёзные различия. В Дакке (Бангладеш) холера появляется после муссонных дождей и исчезает в сухой период; в Калькутте (Индия), по другую сторону дельты Ганга и Брамапутры, болезнь распространяется в сухой периоди исчезает во время дождей.

Холерный вибрион плохо переносит неблагоприятные воздействия внешней среды - солнечное облучение, высушивание и конкуренцию со стороны другой микрофлоры. Циркуляция возбудителя в воде прямо связана с наличием больных и бактерионосителей; после их изоляции он спонтанно исчезает через несколько суток (в стоячих водоёмах может сохраняться до 2-3 нед.). В выгребных ямах может существовать до 3-4 мес. Он может длительно сохраняться в продуктах с щелочным рН и высокой влажностью, а также одежде и постельном белье, испачканных испражнениями больных. Вибрионы биотипа Эль-Тор более устойчивы во внешней среде, что позволяет легко выделять их изводы и испражнений; все описанные в литературе бактерионосители холеры были инфицированы этим биотипом. Все вибрионы высоко чувствительны к действию дезинфектантов, особенно с кислым рН.

ПАТОГЕНЕЗ ПОРАЖЕНИЙ. Попав в организм человека, большая часть вибрионов погибает под действием кислой среды желудка. Лишь их небольшая часть достигает тонкой кишки. Факторы патогенности, обеспечивающие колонизацию, - жгутики (обеспечивают подвижность), муциназа (разжижает слизь и облегчает достижение поверхности эпителия) и нейраминидаза (обеспечивает взаимодействие с микроворсинками). В ответ на проникновение бактерий эпителиальные клетки выделяют щелочной секрет, насыщенный жёлчью, идеальная среда для размножения возбудителя. Клинические проявления холеры обусловливает способность к токсинообразованию; холерные вибрионы образуют эндо- и экзотоксины. Эндотоксин - термостабильный ЛПС, сходный по структуре и активности с эндотоксинами прочих грамотрицательных бактерий. Проявляет иммуногенные свойства, индуцируя синтез вибриоцидных AT. Не играет существенной роли в развитии характерных проявлений. ). Экзотоксин (холероген) - термолабильный белок; разрушается фенолом и формалином, но резистентен к действию протеолитических ферментов. Молекула токсина включает 2 компонента: компонент Б (образован пятью кольцевидно соединёнными субъединицами) взаимодействует с моносиаловым ганглиозидным рецептором что обусловливает проникновение в клетку компонента А. Компонент А составляют А1 субъединица (активный центр) и субъединица А2 связывающая оба компонента. Субъединица А1 катализирует рибозилирование гуанилзависимого компонента аденилатциклазы, приводит к повышению внутриклеточного содержания цАМФ и выходу жидкости и электролитов из клеток либеркюновых желёз в просвет кишечника. Токсин не способен реализовать своё действие на любых других клетках. Бактерии серовара 0139 также продуцируют экзотоксин с аналогичными свойствами, но в меньших количествах; токсинообразование кодируют как хромосомные, так и плазмидные гены. Возможно, что определённую роль в поражениях, вызываемых биотипом Эль-Тор, играют гемолизины.

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ. У большинства инфицированных лиц заболевание протекает бессимптомно либо возможна лёгкая диарея. По имеющимся данным, соотношение тяжёлых поражений к количеству стёртых проявлений для классической холеры составляет 1:5-10, для холеры Эль-Тор - 1:25-100.

Для клинически выраженных случаев инкубационный период варьирует от нескольких часов до 5 сут. (в среднем 2-3 дня); заболевание характеризуется общим недомоганием, болями в животе, рвотой и развитием выраженного диарейного синдрома. Для последнего характерно выделение значительного количества (до 10 л/сут) водянистых бесцветных испражнений («рисовый отвар»). Другая характерная черта - сладковатый «рыбный» (но не фекальный) запах у испражнений. В зависимости от степени интоксикации,симптоматика может иметь характер гастроэнтерита или энтерита.

В тяжёлых случаях у больных резко снижается объём мочи с развитием почечной недостаточности. Характерна охриплость голоса или афония. Ведущие патогенетические факторы - гиповолемия и выраженные нарушения электролитного баланса, вследствие чего развиваются артериальная гипотензия, сердечная недостаточность, нарушение сознания и гипотермия. Подобное состояние определяют как холерный алгид. Отмечают характерное проявление fades hippocrafica (запавшие глаза, заострённые черты лицас резко выступающими скулами). Продолжительность проявлений зависит от своевременного, адекватно проводимого лечения и варьирует от нескольких часов до нескольких дней. При отсутствии лечения летальность больных в алгидной стадии достигает 60%.в. Выздоровление сопровождается выработкой непродолжительной невосприимчивости, нередко отмечают случаи повторного заражения.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. Основу составляют выделение и идентификация возбудителя. Цели исследований: выявление больных и бактерионосителей; установление окончательного диагноза при исследовании погибших; контроль за эффективностью лечения больных и санации носителей; контроль над объектами внешней среды и эффективностью дезинфекционных мероприятий. Материалы для исследований - испражнения, рвотные массы, жёлчь, секционный материал (фрагменты тонкой кишки и жёлчного пузыря), постельное и нательное бельё, вода, ил, сточные воды, гидробионты, смывы с объектов окружающей среды, пищевые продукты, мухи и др.

Наилучшие результаты даёт исследование проб, взятых до начала антибактериальной терапии. Испражнения лучше всего отбирать резиновыми катетерами. Можно использовать стеклянные трубочки с оплавленными краями (также вводят в анальное отверстие) или ректальные тампоны. При исследовании жёлчи отбирают порции В и С (доставляют нативный материал). Секционный материал помещают в стерильную тару раздельно. Все образцы помещают в герметически закрываемую транспортную тару. Материал следует доставлять в лабораторию не позже 2 ч после забора. При невозможности образцы помещают в транспортные среды.

Основным в лабораторной диагностике холеры является:

1) обнаружение в мазках из испражнений изогнутых тонких грамотрицательных палочек, располагающихся в виде «стайки рыб»;

2) активная подвижность вибрионов в раздавленной капле;

3) мгновенная их иммобилизация при добавлении 0–холерной сыворотки;

4) образование голубоватой пленки–паутинки на пептонной воде через 5–6 ч и характерных колоний–росинок на щелочном МПА (12 ч);

5) агглютинабельность вибрионов в противохолерных сыворотках и их лизабельность типовыми холерными фагами С и Эль–Тор.

Схема бактериологического исследования. Так как окончательные результаты должны быть выданы через 30–36 ч, то исследование проводится круглосуточно.

I этап. Из испражнений и рвотных масс готовят мазки, высушивают на воздухе, фиксируют смесью Никифорова и окрашивают водным фуксином или по Граму. Параллельно с этим изучается подвижность вибриона в раздавленной капле. Одновременно испражнения высевают на 1% щелочную пептонную воду, щелочной мясопептонный агар и TCBS. Все посевы помещают в термостат при температуре 37°С. Дают первое заключение о наличии в материале вибрионов.

II этап. Через 5–6 ч инкубации в термостате на пептонной воде вырастает едва видимая пленка, из которой делают мазки, препараты раздавленной капли. Пленку агглютинируют в капле О–холерной сыворотки и выдают второе заключение о природе выделенного вибриона. Пленки пересевают на вторую пептонную воду и щелочной МПА.

III этап. Спустя 12–16 ч от момента посева на среды испражнений больного представляется возможность повторно изучить морфологию, подвижность и агглютинабельность вибрионов пленки, выросшей на второй пептонной воде, а также провести те же исследования, отобрав с плотных сред подозрительные колонии.

Определив, что колонии состоят из вибрионов, агглютинирующихся в О–холерной сыворотке, разведенной 1:100, и в одной из типовых сывороток Инаба и Огава, разведенных 1:50, дают третье заключение о результатах исследования. Подозрительные колонии пересевают на скошенный агар для накопления культуры и определения ферментативных свойств.

IV этап. Установив, какие ферменты продуцирует культура вибриона на ряде Гисса, определяют ее чувствительность к холерным фагам и дают окончательное заключение.

35. Риккетсии. Возбудитель сыпного тифа. Лабораторная диагностика.

Риккетсии – это многочисленная группа бактерий–паразитов, названная именем их первооткрывателя, американского ученого Г. Риккетса, который, установив риккетсиозную природу пятнистой лихорадки Скалистых гор Северной Америки, в 1910 г. погиб в результате внутрилабораторного заражения. Большая часть риккетсий является безвредными бактериями–симбионтами членистоногих. Некоторые виды вызывают заболевания у человека. Рикеттсии являются естественными симбионтами членистоногих насекомых: клещей, вшей, блох. Обитая в организме насекомых, рикеттсии могут передаваться человеку и животным при укусе. Рикеттсии являются возбудителями сыпного тифа.

МОРФОЛОГИЯ. Риккетсии – плеоморфные и разнообразные по размерам микроорганизмы. Чаще всего имеют форму коккобактерий длиной 0,8–2 мкм и шириной 0,3–0,6 мкм, но в мазке вместе с этим встречаются бактериальные, бациллярные и нитевидной формы риккетсий длиной от 3 до 20–30 мкм. В организме больного обнаруживаются в цитоплазме и в ядре клеток.

По Граму риккетсий окрашиваются отрицательно. Для их дифференциации чаще применяется предложенная П.Ф. Здродовским облегченная модификация способа Циля–Нильсена: окраска водным фуксином (5 мин) с последующей обработкой мазка 0,01 % раствором соляной кислоты (1–3 с) и докрашиванием 0,5 % метиленовым синим (10 с). Обладая относительной кислотоустойчивостью, риккетсий при этом окрашиваются в рубиново–красный цвет и легко обнаруживаются на фоне голубой цитоплазмы или синего ядра клеток.

По Романовскому–Гимзе риккетсии окрашиваются в сиреневый цвет; при внеклеточном расположении часто имеют вид биполярных палочек или гантелек. Спор, капсул и жгутиков не образуют.

Облигатные внутриклеточные паразиты, могут размножаться только в живой клетке. Во внешней среде сохраняются некоторое время. У рикеттсий выделяют 2 морфоформы, которые образуются в клетке хозяина:

1) Вегетативная форма, которая размножается внутри клетки.

2) Покоящаяся форма, сохраняется в клетке, но не размножается. Имеет меньшие размеры. Вызывают хронический сыпной тиф.

Рикеттсии обладают минимальным собственным обменом веществ из-за особого строения ЦПМ. Они практически не способны выделять продукты метаболизма, это метаболически зависимые от клетки- хозяина микроорганизмы.

АГ. Риккетсии Провачека содержат два АГ:

1) растворимый АГ: термостабильный, липидополисахаридобелковый комплекс, видонеспецифический (такие же – у R. typhi и у протея ОХ₁₉)

2) нерастворимый АГ: термолабильный, видоспецифический, белково-полисахаридный комплекс.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. Культивируются на куриных эмбрионах, культурах клеток, в живом организме (организме членистоногих). Затем из них делается препарат-мазок, окрашивается по Цилю-Нильсену (Здродовскому) и микроскопируется.

36. Лептоспиры. Лабораторная диагностика лептоспирозов.

Семейство Spirochaetaceae – патогенны 3 рода:

Treponema (возбудитель сифилиса – Т. pallidum, фрамбезии – Т. pallidum subsp. tenue, пинты – Т.carateum);

Borrelia (возбудитель эпидемического возвратного тифа – В. recurrentis, клещевого возвратного тифа – В. persica, В. hispanisa и др.)

Leptospira семейства Leptospiraceae (возбудитель лептоспироза – L. interrogans).

Спирохеты имеют штопорообразную извитую форму. Они отличаются друг от друга характером и числом завитков, длиной клеток, а также другими морфологическими и физиологическими признаками.

Все спирохеты Гр–. Большая их часть – свободно живущие микроорганизмы, в организме человека обитают как сапрофиты, патогенны немногие.

Лептоспиры имеют сигмообразную или С–образную форму, нередко с крючками на концах, около двух десятков мелких завитков. Длина их 6–20 мкм, а поперечник часто меньше разрешающей силы оптического микроскопа (0,2 мкм), поэтому лептоспиры предпочтительнее изучать в темнопольном микроскопе. По Романовскому – Гимзе окрашиваются в розовый цвет.

АГ. Лептоспиры делятся на серогруппы и серовары. Каждая серогруппа имеет свое название (!). Серогрупп 18, сероваров более 160. Аг-структуру лептосип изучают в реакции агглютинации с адсорбированными сывворотками, реакция агглютинации сопровождается лизисом.

РЕЗИСТЕНТНОСТЬ. В нестерильной воде и в гниющем орг. материале остаются жизнеспособными в течение нескольких дней. При высыхании, кипячении и воздействии обычных концентраций дез. средств очень быстро гибнут.

ПАТОГЕНЕЗ. В организм проникают через слизистые оболочки и поврежденную кожу, первичного аффекта при этом не образуется. Через лимф. пути возбудитель проникает в кровь, а затем в паренхиматозные органы. Пораджение печени – характерно для лептоспироза (от легких, выявляемых только биологическими пробами, до тяжелых, с развитием гепатита). Могут поражаться почки, в моче длительное время обнаруживаются лептоспиры. Болезнь протекает волнообразно.

ИММУНИТЕТ. После перенесенного заболевания возникает стойкий иммунитет, связанный с образованием антител.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. Используют микроскопический, бактериологический, серологический и биологический методы.

Микроскопию клин. материала проводят в темном поле. Обнаружить лептоспиры с помощью микроскопии не всегда возможно. Бактериологический метод: засев крови больного в несколько пробирок с питательной средой. Рост отмечается на 5-7 день и позже. С 7-8 дня возможно выделение культуры из мочи больного. Одновременно с посевом на питательные среды заражают чувствительное животное.

На 2 неделе заболевания кровь больного исследуют на наличие в ней антител, для чего применяют реакцию агглютинации-лизиса. Диагностический титр антител 1:100-1:200. В сомнительных случаях повторное определение титра АТ с целью выявления его нарастания. У больных титры агглютининов достигают больших величин и могут сохраняться несколько лет.

Дата добавления: 2015-10-02