Работа 1. Подсчет лейкоцитов в камере

Лабораторное занятие 5.

Подсчет лейкоцитов. Выведение лейкоформулы.

Изучение мазков крови животных, больных лейкозом.

Работа 1. Подсчет лейкоцитов в камере

Принцип. Количество лейкоцитов подсчитывают в определенном объеме камеры с известным разведением крови.

Реактивы. Жидкость Тюрка (3%-ный раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовой синью или генциан фиолетовым).

Специальное оборудование. Микроскоп; камера Горяева; лейкоцитарный меланжер.

Методика. Выстригают, обезжиривают, де­зинфицируют край уха кролика. Прокалывают иглой кожу и стенку ушной боковой вены. Первые капли крови удаляют, из последую­щих капель насасывают кровь в смеситель (меланжер) для лейкоци­тов до метки «0,5», вытирают кончик смесителя ваткой, опускают в стаканчик с жидкостью Тюрка и насасывают до отметки «2». Покачива­ют смеситель в течение 2-3 мин. За это время уксусная кислота лизирует эритроциты и окрашиваются ядра лейкоцитов.

Первые 2-3 капли из смесителя удаляют, четвертой заполняют подготов­ленную счетную камеру Горяева. Под малым увеличением подсчи­тывают все клетки, расположенные в 100 больших квадратах.

При подсчете числа лейкоцитов исходят из того, что разведе­ние крови в смесителе 1:20, объем счетной камеры над малень­ким квадратом 1/4000 мкл, а в одном большом квадрате сетки Го­ряева 16 маленьких, следовательно, объем над одним большим квадратом будет 16/4000 мкл, а над 100—1600/4000 мкл.

Для простоты расчетов число лейкоцитов, найденное в 100 больших квадратах, надо умножить на 50, чтобы получить их ко­личество в 1 мкл крови.

Для определения числа лейкоцитов в 1 л крови (А) используют формулу

Х=А х 5 х 10⁷,

где А — число лейкоцитов, найденных в 100 больших квадратах. Получают величину Г/л, где Г – гига, равна 10⁹.

Клиническое значение определения в крови лейкоцитов. Увеличение количества лейкоцитов (лейкоцитоз) может быть патологическим и физиологическим. Патологический лейкоцитоз отмечают при гнойно-воспалительных процессах, сопровождающих пневмонию, бронхопневмонию, плеврит, перикардит, ретикулоперитонит, перитонит, абсцессы печени, эндометрит и многие другие болезни. Выраженный лейкоцитоз наблюдают при ряде инфекционных болезней, хирургической инфекции, лейкозах, лимфогранулематозе. Возникает он при отравлениях мышьяком, ртутью, укусах ядовитых насекомых и змей, а также при введении больших доз камфоры, калия иодида, белковых препаратов, вакцин, сывороток.

Физиологический умеренный лейкоцитоз бывает при беременности, после физических нагрузок, приема богатой белком пищи (у плотоядных), при стрессах.

Снижение числа лейкоцитов (лейкоцитопения) является результатом угнетения кроветворных органов, истощения их, пониженной реактивности организма, Смена лейкоцитоза лейкоцитопенией при воспалительных и гнойно-септических заболеваниях служит показателем понижения резистентности организма, угнетения кроветворения, ухудшения состояния больного животного. Лейкоцитопения может быть следствием длительного введения в организм больших доз сульфаниламидов, амидопирина, левомицетина, синтомицина, препаратов ртути, мышьяка, висмута. Отмечают ее при алейкемической форме лейкоза, отравлениях некоторыми ядами.

Работа 2. Дифференциальный подсчет лейкоцитов (лейкограмма)

Принцип. Визуальная микроскопическая оценка сухих, фиксированных, окрашенных мазков крови с дифференциальным подсчетом лейкоцитов и описанием морфологии эритроцитов.

Дата добавления: 2015-08-20