Отримання імуномодулятора

Cимбіонтний штам Corynebacterium diphtheria може бути використаний, як біоматеріал для отримання препарату - імуномодулятора, призначеного для профілактики і лікування інфекційних захворювань сільськогосподарських тварин.

Бактеріальні препарати – пробіотики, що використовуються у ветеринарії для лікування та профілактики багатьох інфекційних захворювань. Широко відомо застосування біфідобактерій, лактобацил, кишкових паличок, ентерококів та інших представників нормальної мікрофлори людини і тварин для приготування пробіотиків, біологічно активних добавок до їжі для профілактики і лікування в основному кишкових інфекцій та дисбіозів шлунково-кишкового тракту.

Штам С. diphtheriae tox-108 зберігається в ліофілізованому стані в ампулах при +4 ° С (у холодильнику). В якості наповнювача при сушінні культури використовується звичайна сахарозо-желатинове середовище (СЖ). Розмножується штам на мартенівському агарі, що містить 10% сироватки великої рогатої худоби, протягом 18 год. при температурі 37 ° С.

Штам Сorynebacterium diphtheriae tox-108 вирощують протягом 16 год. на щільному живильному середовищі на основі рибного гідролізату з додаванням сироватки великої рогатої худоби при температурі 37 ° С. Потім культуру змивають рідким живильним середовищем на основі гідролізату казеїну і після 5 год. культивування вносять в робочі ємності з тією ж рідким живильним середовищем. Проводять вирощування біомаси при постійному перемішуванні при температурі 37 ° С протягом 16 год. Мікробні клітини осаджують центрифугуванням при 5000 g протягом 20 хв. і тричі промивають фізіологічним розчином при центрифугуванні в режимі 5000 g протягом 20 хв. Вологий осад зважують, суспендується в забуференному фізіологічному розчині з рН 7,2 до концентрації клітин 5%. Потім цілі клітини дезінтегруються на ультразвукової установці протягом 20 хв. при частоті 20 кГц, амплітуді 14 мкм і охолодженні (льодом або водою) до 30 ° С. Отриману після ультразвукової обробки гомогенну суспензію дезінтеграту центрифугують при 5000 g протягом 20 хв. з метою відокремлення незруйнованих клітин та їх фрагментів від клітинних стінок.

Осад видаляють, супернатант центрифугують при 14000 g протягом 20 хв. Осад, що представляє собою препарат клітинних стінок, ресуспендують у фізіологічному розчині і знову центрифугують при 14000 g протягом 20 хв. Відмивання клітинних стінок від домішок цитоплазми і живильного середовища повторюють 3 рази. Відмиті клітинні стінки ресуспендують в дистильованої воді, отриманий матковий розчин стерилізують при температурі 100 ° С, і піддають ліофільному висушування. Отриманий сухий препарат - порошок білуватого кольору, після розведення у фізіологічному розчині утворює суспензію [10].

Із штаму С. diphtheriae tox-108 отримують безпечний препарат імуномодулятор, при використанні якого у профілактиці та лікуванні інфекційних захворювань підвищується неспецифічна резистентність молодняку ​​(телят і поросят) і дорослих особин сільськогосподарських тварин і виключаються шкідливі побічні явища.

Технічний результат від реалізації полягає у створенні неспецифічної резистентності сільськогосподарських тварин проти інфекційних захворювань бактеріальної та вірусної природи, що дозволяє знизити захворюваність у сільськогосподарських тварин, скоротити застосування інших лікувальних препаратів, в тому числі реактогенних вакцин та антибіотиків, призводять до сенсибілізації організму, вторинним імунодефіцитів, порушень мікроекології кишечника (дисбіози) і до збільшення щільності циркуляції високо патогенних штамів мікроорганізмів. Крім цього введення імуномодулятора в організм тварин сприяє отриманню екологічно безпечного м'ясомолочного продукту і пропонує безпечну схему виробничого процесу.

Можливість використання штаму С.diphtheriae tox - 108 при приготуванні імуномодулятора, що створює неспецифічну резистентність тварин проти інфекційних захворювань бактеріальної та вірусної природи у сільськогосподарських тварин.

Таким чином, імунізація сільськогосподарських тварин нешкідливим препаратом - імуномодулятором, приготованим з штаму С. diphtheriae tox-108, сприятиме збільшенню виходу натурального екологічно чистого цільового продукту - м'яса і молока, безпечного для споживання людьми і без алергічного компоненту в його складі. Використання препарату - імуномодулятор у профілактичних цілях дозволяє знизити виникнення (особливо в період осінньо-зимових спалахів) інфекційних епізоотій, виключити побічні явища при імунізації тварин (інтоксикацію, алергічні реакції, імунну супресію і т.д.), які, як правило, виявляються при використанні специфічних вакцин, етіотропних препаратів та препаратів антибіотиків.

ВИСНОВКИ

1. В ході огляду літературних даних встановлено, що бактерії роду Corynebacterium були вперше описані у 1896 р. Lehmann і Neumann, до нього належать 75 видів морфологічно подібних споріднених мікроорганізмів, утому числі і збудник дифтерії.

2. Коринеформні бактерії – це переважно облігатні паразити на слизових оболонках чи шкірних покривах ссавців, але іноді виявляються і в інших джерелах; деякі види потогенні для ссавців

3. У 1951 році Фрімен відкрив, що патогенні (токсигенні) штами C. diphtheriae є лізогенними, в той час, не лізогенізовані штами є авірулентними.

4. C. diphtheriae вибагливі до поживних середовищ, ростуть на середовищах, що містять кров або сироватку крові.

5. Коринебактерії – аероби або факультативні анаероби, оптимальна температура росту – 35 – 37 °С, pH 7,6-7,8.

6. Антигенна структура коринебактерій досить різноманітна, у них виявлено декілька десятків соматичних антигенів, за якими їх поділяють на серотипи. Розрізняють 11 серотипів C. diphtheriae.

7. За структурою колоній і біохімічними властивостями C. Diphtheriae поділяється на 4 біокультивари: gravis, mitis, intermedius i belfanti.

8. Штам С. diphtheriae tox-108 може бути використаний, як біоматеріал для отримання препарату - імуномодулятора, призначеного для профілактики і лікування інфекційних захворювань сільськогосподарських тварин.

Дата добавления: 2015-11-14