Методы определения аллоантител.

Определение антител основано на реакции агглютинации антител исследуемой сыворотки с антигенами стандартных (типированных) эритроцитов.

При аллоиммуннизации могут вырабатываться антитела и в полной, и в неполной форме, поэтому их обнаружение проводится обязательно двумя методами:

1) методом солевой агглютинации для выявления полных антител;

2) любым методом для выявления неполных антител в коллоидной среде:

- пробой с 10% желатином с микроскопией отрицательного результата (метод конглютинации с желатином);

- гелевым тестом;

- непрямой пробой Кумбса.

Метод выявления аллоантител в коллоидной среде с 33% полиглюкином имеет очень низкую чувствительность и специфичность и не рекомендуется к применению.

Одним из наиболее чувствительных и специфичных методов выявления аллоантител является непрямая проба Кумбса.

Проба Кумбса

Для проведения пробы Кумбса используется антиглобулиновая сыворотка. Она представляет собой сыворотку кролика, иммунизированного сывороточными белками крови человека, и содержит антитела к человеческим глобулинам, в том числе и к резус-антителам - «антитела к антителам». Проба Кумбса может проводиться в двух вариантах: прямой и непрямой реакции.

Прямая проба Кумбса служит для обнаружения антител, фиксированных на эритроцитах. К исследуемым эритроцитам, содержащим адсорбированные резус-антитела, добавляют антиглобулиновую сыворотку, которая связывается с антителами-анти-резус, вызывая агглютинацию эритроцитов. Прямая проба Кумбса применяется для диагностики гемолитической болезни новорожденных и аутоиммунных состояний.

Непрямая проба Кумбса основана на реакции неполных антител, находящихся в сыворотке крови в свободном, не фиксированном состоянии, с антиглобулиновой сывороткой. Проба может применяться для выявления как антигенов эритроцитов, так и антител сыворотки. Непрямая проба Кумбса проводится в два этапа. Первый этап заключается в инкубации in vitro (в пробирке) эритроцитов со свободными антителами, что приводит к фиксации антител на эритроцитах (сенсибилизации эритроцитов). На втором этапе под действием антител антиглобулиновой сыворотки происходит агглютинация сенсибилизированных эритроцитов.

Проба Кумбса является самым чувствительным, хотя и довольно трудоёмким методом выявления неполных антител сыворотки и антигенов эритроцитов. Она может проводиться как традиционным способом (в пробирке), так и в гелевом тесте.

Дата добавления: 2015-11-16