Читайте также:
|
Теоретическое обоснование метода. Внешняя система гемокоагуляции резервная, мобилизуется организмом при чрезвычайных обстоятельствах, свертывание происходит очень быстро – за 15-20 минут. Из поврежденных тканей выделяется тканевой тромбопластин (гликозид, который является компонентом мембран).
Тканевой тромбопластин образует комплекс с циркулирующим в крови фактором VII, этот комплекс активирует фактор Х, который вместе с фактором Vа, фосфолипидами и в присутствии Са2+ превращает неактивный протромбин плазмы крови в активный фермент тромбин, образующих из растворимого плазменного белка фибриогена (при участии фактора XIII) фибриновый сгусток.
Внешний путь свертывания принято in vitro моделировать тестом ПТВ. Протромбиновый тест был предложен в 1935 году A.Quick с целью определения в системе in vitro активности протромбина – фактора II свертывания крови. Позднее было установлено, что этим тестом определяется активность нескольких факторов свертывания крови (факторов протромбинового комплекса): II, V, VII, X. При этом фактор VII является фактором только внешнего пути свертывания, остальные факторы участвуют и во внутреннем пути. Все факторы протромбинового комплекса являются витамин К-зависимыми протеиназами.
Для проведения теста тканевой тромбопластин получают из частично очищенных водных экстрактов легких или плаценты человека, тканей мозга человека, кролика, быка. В последнее время в связи с опасностью инфицирования вирусами ВИЧ и гепатита ВОЗ не рекомендует использовать кадаверный мозг для получения тромбопластина.
При подготовке проведения методики большое значение имеет активность и чувствительность тромбопластинов.
Активность тромбопластинов – это ПТВ в секундах в нормальной плазме (чем короче, тем активнее).
Чувствительность опрелеяет возможность регистрации снижения уровня факторов протромбинового комплекса (повышение ПТВ).
Тромбопластины могут различаться по исходной активности и чувствительности, поэтому необходимо их стандартизировать. В основе стандартизации, принятой ВОЗ в 1983 году, лежит установленное наличие линейной зависимости между логогифмами ПТВ, определенными с использованием разных тромбопластинов. Исходя из этой зависимости определяют МИЧ – международный индекс чувствительности.
При возведении ПО. Определенного с любым тромбопластином в степень МИЧ, будет получено то значение МНО (международного нормализованного отношения), которое было бы получено для данной плазмы с использованиеммеждународного эталонного препарата ВОЗ: МНО = ПО МИЧ.
Расчет МНО позволяет использовать в работе таблицы соответствия МНО и необходимого уровня антикоагулянтной терапии.
Чувствительными к снижению факторов протромбинового комплекса являются тромбопластины с низким МИЧ (до 1,5-2,0). Между чувствительностью тромбопластина и значением МИЧ имеется обратная зависимость: чем меньше МИЧ, тем выше чувствительность реагента.
Систему МНО необходимо применять при лечении пациентов, получающих антикоагуляционную терапию.
МНО нецелесообразно использовать при:
Принцип метода. Определяется время свертывания рекальцифицированной плазмы (или крови) при добавлении к ней тканевого тромбопластина определенной активности и чувствительности к дефициту факторов протромбинового комплекса (VII, X, V,II).
Материал для исследования. Цитратная бедная тромбоцитами плазма.
Ход определения. Предварительно, за 10 минут до начала исследования, тромбопластин-кальциевую смесь помещают на водяную баню при 37°С и оставляют там до окончания работы. Исследуемую плазму в объеме 0,1 мл прогревают на водяной бане при 37°С. Через 60 секунд добавляют 0,2 мл прогретой до 37°С тромбопластин-кальциевой смеси, включают секундомер и определяют время свертывания. Точно также определяют ПТВ в контрольной нормальной плазме (стандарт-плазме).
Чтение результатов. Результат учитывают в секундах и выражают по одному из следующих вариантов:
1. Указывают ПТВ в секундах с указанием контрольных значений, полученных при исследовании контрольной нормальной плазмы. Для мануального определения оптимальная активность реактива в норме соответствует 12-15 секунд.
2. В работе КДЛ в течение длительного времени использовался расчет протромбинового индекса (ПТИ) по следующей формуле: ПТИ,% = (ПТВ контр.плазмы /ПТВ больного)*100.
Норма ПТИ – 93-107%
3. Определяют протромбиновое отношение (ПО) в единицах по формуле:
ПО = (ПТВ больного /ПТВ контр.плазмы)
Для различных тромбопластинов ПО в норме составляет 0,7-1,1
4. Затем рассчитывают международное нормализованное отношение (МНО) с учетом МИЧ (международный индекс чувствительности) тромбопластина.
МО=ПОМИЧ
Например: ПТВ = 45 сек.
ПТВ контр.плазмы = 12,7 сек.
МИЧ тромбопластина – 1,08
МНО = ПОМИЧ = (45:12,7)1,08= 3,92.
Дата добавления: 2015-07-11; просмотров: 208 | Нарушение авторских прав