Техника окраски мазков по Нейссеру.

используют для выявления зерен волютина у возбудителей дифтерии и др. коринебактерий. Фиксированный мазок 2 - 3 мин красят уксуснокислым синим 10 - 30 с обрабатывают р-ром Люголя, слегка промывают водой и докрашивают в течение 30 с р-ром везувина, высушивают и микроскопируют. Бактерии окрашиваются в желтый цвет, волютин -в темно-синий.

13.Методы выделения «чистой культуры» микроорганизмов.

Чистой культурой м/организмов называют культуру одного вида, выращенного как потомство одной клетки. Методы выделения чистых культур м/организмов основаны на изоляции одной микробной клетки от массы м/организмов и последующем выращивании потомства этой клетки на питательных средах изолированно от других видов.

Наиболее распространенным способом выделения чистых культур является посев смеси микробов на плотные питательные смеси с целью получения отдельных колоний культур, которые считают результатом развития одной клетки. Для посева чаще используют агаризованные среды в чашках Петри. Основной задачей метода является разведении концентрации м/организмов в исследуемом материале с таким расчетом, чтобы при посеве его на питательную среду выросли изолированные колонии.

Существуют два основных метода разведения исследуемого материала:
1) на поверхности плотной питательной среды;
2) предварительное разведение материала в физиологическом растворе

Метод на поверхности плотной среды используется для выделения чистых культур аэробныхи факультативно анаэробных м/организмов. С этой целью для посева берут ряд чашек Петри с плотной средой. В первую чашку наносят исследуемый материал и распределяют его по поверхности шпателем. Затем производят посев последовательно на поверхность Среды в остальных чашках. Количество материала,внесенного в среду, при этом последовательно убывает. Метод предварительного разведения используется для выделения чистых культур м/организмов как аэробных, так и анаэробных. Готовят разведение материалов 10-100 раз и более и производят посев разведений, пользуясь поверхностным или глубинным методом.

14.На какие группы подразделяют микроорганизмов по типу питания?

Микроорганизмы, как и все живые существа, в зависимости от источника углерода относятся к автотрофам или гетеротрофам.

В зависимости от источника энергии микроорганизмы делятся на фототрофы (используют энергию Солнца, например, цианобактерии) и хемотрофы (используют энергию химических реакций, например, серобактерии, нитрифицирующие, железобактерии).

В зависимости от источника электронов в энергетическом процессе микроорганизмы делятся на литотрофов (источник электронов – неторганические вещества) и органотрофов (органические вещества).

Таким образом, можно выделить 8 сочетаний типов энергетического и конструктивного метаболизма прокариот. Большинство изученных прокариот относится к группе хемоорганогетеротрофов, среди фотосинтезирующих – к группе с фотолитоавтотрофным питанием. Однако обнаружены и микроорганизмы с хемолитоавтотрофией (например, водородные бактерии), хемолитогетеротрофией (метанобразующие архебактерии), фотоорганоавтотрофией (некоторые пурпурные бактерии) и др. необычными путями метаболизма. Некоторые микроорганизмы способны использовать разные источники электронов или энергии.

Микроорганизмы- гетеротрофы делятся также на группы:

Микроорганизмы- гетеротрофы делятся также на группы:

- сапрофиты (метатрофы), питающихся мертвой тканью животных и растений (например, Bacillus mesentericus – картофельная палочка);

- паразиты(паратрофы), которые живут за счет органики живых организмов (иногда являются возбудителями инфекционных заболеваний (например, Mycobacterium tuberculosis – туберкулезная палочка).

В зависимости от источника азота микроорганизмы также делятся на группы:

- аминоавтотрофы усваивают азот из неорганических веществ (азотфиксирующие почвенные клубеньковые бактерии; нитритно-нитратные – окисляют аммиак до солей азотистой и азотной кислот);

- аминогетеротрофы используют органические источники азота – дезаминирующие (усваивают только аминокислоты), пептонизирующие (только пептоны), протеолитические или гнилостные (расщепляют белки, способны выделять экзоферменты во внешнюю среду).

В зависимости от особенностей метаболизма выделяют также группу прототрофов – бактерий, способных синтезировать все соединения из глюкозы как единственного источника С и из солей аммония как единственного источника азота; все остальные – ауксотрофы.

Дата добавления: 2015-09-06