Условия забора материала (крови).

1. Кровь берут при первом подозрении на малярию независимо от температуры тела, но лучше во время лихорадки или сразу после озноба.

2. Исследуют периферическую кровь из мякоти ногтевой фаланги 4-го пальца руки.

3. От одного больного готовить не менее 10 препаратов, особенно для диагностики малярии с низкой степенью паразитемии (микроскопия серийных толстых капель).

4. Предметные стекла должны быть тщательно вымыты и обезжирены.

5. Шлифовальное стекло, которым делается мазок, должно быть уже предметного, на котором делается мазок.

Приготовление мазков крови:

1. Обработать место укола 96% этиловым спиртом и проколоть мякоть пальца стерильным скарификатором одноразового пользования,

2. Выступившую первую каплю крови снять ватой.

3. Повернуть палец проколом вниз, прикоснуться предметным стеклом к выступившей крови так, чтобы она оказалась на стекле на расстоянии 1,5 см. от края.

4. Положить стекло на стол и, придерживая за его края пальцами левой руки, правой рукой поместить шлифовальное стекло впереди капли под углом 30 - 45 градусов, а затем подвести его к капле крови.

5. Когда кровь растечется по краю шлифовального стекла, его быстро продвигают по предметному стеклу.

6. Просушить мазок при комнатной температуре, после чего в левом верхнем углу его сделать надписи простым карандашом (Ф.И.О. пациента).

7. Приготовленный мазок зафиксировать в метиловом спирте 3-5 минут или в смеси Никифорова 10 минут, для чего мазки уложить на стеклянный мостик из трубочек, положенный на края ванночки и фиксатор из пипетки наливать прямо на мазки.

8. Оставить мазки до полного испарения фиксатора.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ТОЛСТЫХ КАПЕЛЬ КРОВИ:

1.На предметное стекло готовят мазок несколько толще обычного, но не дают ему окончательно высохнуть.2. На еще влажный мазок наносят каплю крови. Кровь на мазке растекается правильным диском и высота капли остается примерно одинаковой независимо от объема взятой крови, отчего паразиты и клетки крови распределяются по площади всей капли равномерно.3. Свободную от капли крови часть мазка подписать простым карандашом.4. Высушить приготовленный препарат толстой капли крови на воздухе при комнатной температуре в течение 2-3 часов, не прибегая к подогреванию.Только что приготовленные толстые капли при последующей окраске и промывании окрашенных препаратов отстают от стекла. Фиксация толстых капель не производится. Окраска толстых капель и мазков: Окраску приготовленных мазков и толстых капель производят по Романовскому-Гимза и нейтральной или слабо-щелочной среде (рН 7,0 -7,2).1. Свежеприготовленный раствор краски Романовского наливают на фиксированные мазки и высушенные нефиксированные толстые капли.2. Мазки окрашивают в течение 35 - 50 минут, толстые капли - 20 - 25 минут3. Окрашенные препараты промывают тем же забуферным солевым раствором, на котором разводилась краска.В правильно окрашенных препаратах хорошо видны эритроциты с находящимися в них малярийными плазмодиями. Ядра паразитов темно-розовые, рубиново-красные; протоплазма голубая или светло-синяя.

Дата добавления: 2015-07-11