Лабораторная диагностика.

Материалы для исследования: СМЖ (2-5 мл), кровь, носоглоточная слизь. Перед забором слизи тампон сгибают о край пробирки под углом 135⁰ на расстоянии 3-4 см от конца (нарисовать тампон и пробирку). При заборе тампон вводится загнутым концом вверх под мягкое нёбо в носоглотку. При извлечении тампона он не должен касаться зубов, слизистой щек и языка.

Методы исследования: 1. Экспресс-методы:

а)Микроскопический;

б) Реакция латекс-агглютинации

2. Бактериологический.

1а. МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД. Микроскопия окрашенного по Граму или метиленовым синим мазка из осадка СМЖ после центрифугирования. Обнаружение гр- диплококков характерной формы позволяет дать предварительный положительный ответ: «обнаружен менингококк». Световая микроскопия не всегда дает результат. Более надежный и чувствительный метод - РИФ.

1б. РЕАКЦИЯ ЛАТЕКС-АГГЛЮТИНАЦИИ. – см. стрептококки.

2. БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД. Забранный материал сеется у постели больного: кровь – в среду накопления в соотношении 1:10 (среда «199», специальные полужидкие среды), слизь – на плотную среду с добавлением АБ р и с т о м и ц и н а или л и н к о м и ц и н а, подавляющих рост гр+ кокков. При посеве тампоном делается площадка для сброса и затем зигзагообразные движения по всей поверхности (нарисовать). СМЖ в лаборатории центрифугируют, 2-3 капли осадка сеют шпателем на плотную среду, еще из одной капли делают мазок; остаток в пробирке заливают 5 мл среды накопления и инкубируют. Среды должны быть свежеприготовленными и предварительно подогретыми.

При необходимости транспортировки, особенно в холодное время, среды и посевы должны перевозиться в изотермических контейнерах (портативных термостатах) с температурой 37⁰С. При отсутствии оборудования среды и посевы транспортируются обложенными газетами и грелками.

Посевы инкубируют сутки при 37⁰С в газпаках (?) с концентрацией СО₂ 8-10% или в э к с и к а т о р а х с зажжённой свечой и притёртой крышкой. Из посевов в среды накопления через сутки делают высев на плотные среды с последующей аналогичной инкубацией.

Выросшие подозрительные колонии подлежат обязательному микроскопическому изучению. Поскольку менингококки могут плохо окрашиваться по Граму (обесцвечиваться или принимать трудноразличимый розово-фиолетовый цвет), то для окрашивания мазков часто применяют метод окраски по Граму в модификации К а л и н ы. При окраске этим методом гр+ МО – чёрно-зеленые, гр- МО – красные. В мазках из культур менингококки, кроме пар, могут располагаться также одиночно или по четыре. Колонию таких гр- кокков пересевают на скошенный СА или другую специальную среду.

Полученную чистую культуру идентифицируют по следующим тестам:

1. Оксидазная активность: нейссерии при нанесении части колонии на специальную бумажку в течение нескольких секунд изменяют её цвет по ходу штриха петли.

2. Биохимические свойства: культура раскапывается в лунки тест-системы «Нейссериа-тест» фирмы «Лахема» (Чехия) или пересевается на жидкие среды Гисса с добавлением сыворотки в количестве 25%. Менингококки расщепляют только глюкозу и мальтозу.

3. Для отличия от других нейссерий культуру пересевают на скошенный простой агар и на среду, с которой была выделена исследуемая культура. Простой агар затем инкубируют сутки при 37⁰С, специальную среду оставляют при комнатной температуре. Менингококки в обоих случаях не дают роста.

При необходимости определения серогруппы ставят ОРА с групповыми менингококковыми сыворотками.

3. Гонококки открыл немецкий микробиолог A l b e r t N e i s s e r в 1879г.

Гонококки по морфологии сходны с менингококками. Такие же аэробы и капнофилы. Ещё более требовательны к питательным средам: они должны быть свежеприготовленными, подогретыми, а плотные среды – ещё и влажными. Используют специальные среды: ГНК-агар (ОБТЦ), гонококковый агар (Испания) и др. Для стимуляции роста к средам часто добавляют асцитическую жидкость, сыворотку, кровь, дрожжевой гидролизат, казеин и другие добавки. Гонококки образуют мелкие, нежные, прозрачные колонии в виде капелек росы, реже – мутные бесцветные колонии.

Биохимические свойства: помимо оксидазной активности, расщепляют только глюкозу (до К). Содержат эндотоксин. Во внешней среде ещё менее устойчивы, чем менингококки.

Гонококковая инфекция – гонорея – является одним из самых распространённых заболеваний, передающихся половым путём (ЗППП). Гонококки паразитируют в эпителии уретры, влагалища, шейки матки, маточных труб, вызывая воспалительные процессы, сопровождающиеся болями при мочеиспускании, выделениями гноя из уретры и влагалища. Основным резервуаром инфекции являются женщины. У женщин гонорея часто протекает бессимптомно, однако может приводить к воспалению тазовых органов и бесплодию. При заносе инфекции в глотку или прямую кишку гонококки могут поражать слизистую этих органов. Возможен также гонококковый конъюнктивит (б л е н н о р е я - воспаление конъюнктивы глаз), напр., у новорождённых, заражающихся при родах от инфицированных матерей. Генерализация процесса может привести к менингитам, артритам, эндокардитам.

Дата добавления: 2015-07-08