Метод розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами барана является наиболее простым и самым распространенным

методом количественного учета Т-лимфоцитов периферической крови людей. При смешивании лимфоцитов человека и эритроцитов барана последние присоединяются избирательно только к Т-лимфоцитам, образуя так называемые розетки. Розеткообразующей клеткой считают лимфоцит, присоединивший три эритроцита барана и более. У здоровых людей Т-лимфоциты составляют 50-70% от общего числа лимфоцитов.

Метод ЕАС-розеток. Один из простых методов количественного учета В-лимфоцитов крови человека. В этом случае тест розеткообразования ставят, как и в случае Е-розеток, но с эритроцитами барана, предварительно инкубированными последовательно с антиэритроцитарными антителами, а затем с комплементом. Такие эритроциты присоединяются избирательно к клеткам, несущим рецепторы для комплемента, в том числе к В-лимфоцитам. У здоровых людей В-лимфоциты (ЕАС-розетки) составляют 15—25% от общего числа лимфоцитов.

РБТЛ. При культивировании лимфоцитов крови человека в присутствии митогенов — фитогемагглютинина (ФГА) или специфического антигена — малые лимфоциты увеличиваются в размерах и превращаются в бластные клетки, активно синтезирующие ДНК. Этот феномен называется бластной трансформацией лимфоцитов. Сравнение результатов производят по отношению к лимфоцитам, культивированным в тех же условиях без стимуляторов. При морфологическом учете РБТЛ по окончании срока культивирования делают мазки клеток, окрашивают по Романовскому—Гимзе и подсчитывают количество бластных форм на 100 лимфоцитов в препарате. У здоровых людей РБТЛ с ФГА дает 60-80% бластных форм, что характеризует нормальный уровень функциональной активности Т-лимфоцитов.

При активации лимфоцитов под влиянием митогенов или антигенов они выделяют в среду клеточные медиаторы — лимфокины, по выходу которых также можно оценивать функциональную активность Т-лимфоцитов. Из них наиболее изучен фактор, угнетающий миграцию макрофагов. Выявляют этот фактор в тесте угнетения миграции макрофагов. Можно, например, поместить макрофаги (моноциты) в лунки, вырезанные в слое агарозы. За 24 ч инкубации они образуют вокруг лунки равномерную зону миграции. В присутствии лимфокина миграция клеток резко заторможена и зона миграции уменьшена.

Определение концентрации сывороточных иммуноглобулинов по Манчини. Образцы исследуемых сывороток помещают в лунки агарового геля, который содержит антитела против IgM, IgG или IgA в известной концентрации. Диффундирующие'

в агар иммуноглобулины образуют кольца преципитации с антиглобулиновыми антителами, размер которых зависит от содержания в сыворотке иммуноглобулинов соответствующего класса. Уровень сывороточных иммуноглобулинов отражает функциональное состояние В-системы иммунитета.

остановка и оценка кожно-аллергической пробы. Для выявления специфической сенсибилизации (при туберкулезе, бруцеллезе и других инфекционных заболеваниях) ставят кожные аллергические пробы. Например, при постановке пробы Манту туберкулиновым шприцем внутрикожно вводят раствор туберкулина определенной концентрации. Реакцию учитывают через 24 и 48 ч, определяя степень ее выраженности. Гиперемию и инфильтрат вокруг места введения оценивают следующим образом: + размером до 5 мм, 4+до 1 см, 4++больше 1 см, а также наличие везикулы и лимфангита (рис. 50).

Дата добавления: 2015-08-20