Качественные реакции на патологические составные части мочи

Патологическими составными частями мочи называют такие её химические компоненты, которые в моче здоровых людей совершенно отсутствуют или содержатся в очень незначительных количествах и неопределимы обычными качественными реакциями. Чаще всего мочу исследуют на наличие таких патологических составных частей, появление которых в моче свидетельствует о нарушении функций организма и имеет диагностическое значение. К их числу обычно относят глюкозу («Сахар»), белок, гемоглобин, желчные пигменты и желчные кислоты, кетоновые тела.

1. Сахар. О наличии «сахара» (обычно глюкозы) в моче судят по реакции Фелинга. В пробирку к 10 каплям исследуемой мочи добавляют 2 капли реактива Фелинга 1 и 2 капли реактива Фелинга 2 и нагревают на кипящей водяной бане в течение 2-3 минут. Появление желтого или красноватого окрашивания или осадка свидетельствует о наличии в моче глюкозы («сахара»).

2. Белок. а) Проба с азотной кислотой - проба Геллера. В пробирку наливают около 1 мл концентрированной HNО₃, и на неё осторожно приливая по стенке пробирки, наслаивают около 1 мл исследуемой мочи. Появление мутного, белого кольца на границе двух жидкостей свидетельствует о наличии в моче белка.

б) Проба с сульфосалициловой кислотой. К нескольким миллилитрам мочи добавляют 20% раствор сульфосалициловой кислоты из расчета две капли на 1 мл мочи. При положительной реакции появляется мутность, которая тем более выражена, чем выше содержание белка в моче. Результат обозначают следующим образом: слабоположительная (+), положительная (++), резкоположительная (+++).

в) Нефелометрический метод основан на свойстве белка, который дает с сульфосалициловой кислотой помутнение, интенсивность которого пропорциональна концентрации белка.

В градуированную пробирку наливают 1,25 мл профильтрованной мочи и добавляют до объема 5 мл 3% раствор сульфосалициловой кислоты, тщательно размешивают. Через 5 минут измеряют экстинцию ФЭК при длине волны 590 – 650 нм (оранжевый или красный светофильтр) против контроля в кювете толщиной слоя 0,5 см. Для контроля используют 1,25 мл профильтрованной мочи (той же), к которой до объема 5 мл доливают изотонический раствор хлорид натрия.

Строим калибровочную кривую зависимости экстинкции от концентрации белка. Для приготовления различных концентраций белка используют стандартный раствор альбумина (человеческий или бычий). Заполняют рабочую таблицу.

При необходимости для определения белка можно использовать биуретовый метод (см. “Биохимия крови”).

3. Гемоглобин. Для проведения пробы в пробирке смешивают 1-2 мл исследуемой мочи с 10 каплями раствора бензидина (0,2% раствор в ледяной уксусной кислоте) и 3-4 каплями перекиси водорода. В присутствии гемоглобина через несколько минут появляется синее окрашивание, при стоянии окраска переходит в красную. Гемоглобин разлагает перекись водорода и освободившийся «активный» кислород окисляет бензидин в парахиноиндинмид синего цвета.

4. Определение индикана в моче (проба Яффе).

Принцип. Превращение индикана в индоксил и последующее окисление индоксила (перманганатом калия) в синёе или красное индиго.

Ход работы. 5-6 мл мочи смешать с равным объемом соляной кислоты, прилить 1-2 капли перманганата калия, прилить 2-3 мл толуола. Пробирку закрыть и многократно опрокидывать без взбалтывания. В присутствии индикана толуол окрасится в розовый цвет.

Дата добавления: 2015-07-20