Определение неорганического фосфата в сыворотке крови

Принцип метода. В безбелковом фильтрате сыворотки крови неорганический фосфат при взаимодействии с молибденовым реактивом:

H₃PO₄ + 12(NH₄)₂MoO₄ +21HNO₃®(NH₄)₃PO₄×12 MoO₃ + 21 NH₄NO₃+ 12H₂O.

Под действием сильных восстановителей из аскорбиновой кислоты образуется молибденовая синь Mo₂O₅×H₂O, интенсивность окраски которой пропорциональна концентрации неорганического фосфата. Интенсивность окраски измеряется на фотоэлектрокалориметре.

Ход работы. В 3 пробирки отмеряют по 1 мл сыворотки крови, 1 мл Н₂О и 1 мл эталона. Туда прибавляют 1,2 мл молибденового реактива и 1 мл 0,15% раствора аскорбиновой кислоты и доводят водой до 10 мл, тщательно перемешивают и оставляют стоять на 10 мин для развития окраски. Измеряют светопоглощение при 600 нм (красный фильтр № 8) в кювете с толщиной слоя 1,0 см против контроля (с Н₂О).

Расчет. Е_{эталона} - 1 ммоль/л

Е₀ - Х

Х =

Норма: содержание неорганического фосфата в сыворотке крови здорового человека составляет обычно 1,0 -1,6 ммоль/л

Диагностическое значение. Гиперфосфатемия встречается при почечной недостаточности, гипопаратиреодизме, при приеме больших доз витамина D и ряде других состояний. Гипофосфатемия наблюдается при рахите, при остеомаляции, пеллагре, но может быть и алиментарного происхождения – из-за нарушения всасывания фосфатов в кишечнике.

Для диагностики различных патологических состояний важное значение имеет определение количественного соотношения между содержанием кальция и неорганического фосфата в крови: в норме коэффициент Са/Р 1,9–2.

Контрольные вопросы

1. Роль минеральных веществ в организме.

2. Обмен кальция и фосфора. Формы существования их в организме и основные биологические функции.

3. Роль витамина D в регуляции обмена кальция и фосфата.

4. Перечислить гормоны, участвующие в регуляции обмена кальция и фосфора. Механизмы их действия.

Задачи

Задача 1. У ребенка, получающего полноценное питание и витамин D₃, наблюдаются признаки рахита. Концентрация кальция в крови на нижней границе нормы. Каковы возможные причины рахита?

Задача 2. Больной, проживающий на Севере, долго потреблял в избыточном количестве продукты, которые включают жир печени рыб, содержащий витамин D₃. При обращении больного в медицинский центр с жалобой на повышенное артериальное давление проведено рентгенологическое исследование, которое подтвердило отложение кальция в мягких тканях больного и образование камней в мочевых путях. Почему рацион с избытком рыбьего жира может обусловить указанные симптомы?

Задача 3. Гиперпаратиреоидизм – заболевание, в основе которого лежит гиперпродукция паратгормона. У больных отмечаются мышечная слабость, остеопороз и деформация костей, образование почечных камней. Какова причина перечисленных симптомов у больных?

Рекомендуемая литература

1. Биохимия. Под ред. Е.С. Северина, М., «ГЭОТАР –Медиа», 2008. Стр. 592-597.

2. Р. Марри, Д. Гриннер, П. Мейес, В. Родуэлл. Биохимия человека. В 2-х томах. М. Мир, 2004. Том 2. Стр. 193 -204, 283.

3. Николаев А.Я.. Биологическая химия. М., Медицинское информационное агентство, 2004. Стр. 422-426.

4. Биохимия. Краткий курс с упражнениями и задачами. Под ред. Е.С. Северина, А.Я. Николаева. М., «ГЭОТАР –Медиа», 2002. Стр. 295-297.

5. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф.. Биологическая химия. М., Медицина, 1998. Стр. 263-264, 582-585, 676-677.

6. Бышевский А. Ш., Терсенев О.А.. Биохимия для врача. Екатеринбург, «Уральский рабочий», 1994. Стр.299-301, 353-354, 153-154, 139-141.

Дата добавления: 2015-07-20