Техника посева на питательные среды

Общие правила: Бактериологические посевы - это манипуляции, включающие нанесение (внесение) петлей, пипеткой или другим инструментом содержащего бактерии материала на (в) питательные среды с целью выделения чистой культуры, ее накопления, хранения, определения многообразных свойств. Посевы должны проводиться таким образом, чтобы достигнуть поставленной цели (например, получение изолированных колоний) и в то же время предупредить возможность контаминации посевного материала и питательных сред микробами окружающей среды, а также заражения людей и контаминации окружающих объектов микробами, находящимися в посевном материале.

Посевы бактериологические производят в спецодежде, в специальных боксах и лабораториях, содержащих минимальное число микроорганизмов, около пламени горелки, стерильными инструментами в стерильные среды и при строгом соблюдении других условий асептики.

Перед проведением посевов необходимо оборудовать рабочее место, добавив к стационарному оборудованию исследуемый материал, инструменты, питательные среды, которые предварительно подписывают (номер исследуемого материала и дату посева).

Техника посева с помощью бактериальной петли из пробирки в пробирку:

1. Пробирку с посевным материалом и пробирку со средой держат слегка наклонно в левой руке между большим и указательным пальцами так, чтобы края пробирок были на одном уровне, а их основания находились поверх кисти. Обычно пробирку с посевным материалом держат ближе к себе.

2. В правой руке держат бактериальную петлю, как писчее перо, и стерилизуют ее в пламени спиртовки (горелки) трехкратно.

3. Четвертым и пятым пальцами и краем ладони правой руки вынимают из пробирок обе пробки одновременно. Извлекают пробки не рывком, а плавно: легкими винтовыми движениями.

4. Вынув пробки, края, пробирок обжигают в пламени спиртовки.

5. Прокаленную петлю вводят через пламя спиртовки в пробирку с посевным материалом (культурой), охлаждают петлю о внутреннюю стенку пробирки, (или погружая ее в конденсационную жидкость) и, набрав немного материала (одну петлю), осторожно переносят в пробирку со средой, не касаясь стенок и краев пробирок.

6. При посеве в жидкую среду петлю с посевным материалом слегка погружают в жидкость (бульон), материал растирают на стенке пробирки и смывают средой.

7. После посева петлю извлекают из пробирки, края пробирок обжигают и, проведя пробки через пламя спиртовки, закрывают пробирки; после этого прокаливают петлю.

Техника посева из пробирки в чашку Петри:

Предварительно разделите чашку Петри со стороны дна восковым карандашом крест- накрест на 4 равных сектора.

1. Пробирку с посевным материалом (культурой) держат в левой руке, петлю - в правой. Петлю прожигают, вынимают пробку, прогревают края пробирки и закрывают ее пробкой и ставят пробирку в штатив.

2. Левой рукой берут чашку Петри со средой и слегка приоткрывают крышку, держа ее большим и указательным пальцами.

3. Петлю с посевным материалом вводят под крышку чашки Петри и снимают избыток посевного материала одним из способов:

а) материал втирают петлей в поверхность среды у края чашки, несколько раз проводя петлей из стороны в сторону (делают небольшую площадку);

б) прокалывают агар петлей у края чашки.

4.Затем засевают материал на этот же сектор, делая параллельные штрихи с интервалом в 4-5 мм от края сектора (чашки) к центру чашки по поверхности среды, поочередно на всех секторах.

Дата добавления: 2015-07-25