Читайте также:
|
Титр — это наименьшее количество продукта, выраженное в мл (г), в котором обнаружены БГКП.
Первый этап — постановка первой бродильной пробы, заключается в посеве исследуемого продукта на среду Кесслера.
Для определения коли_титра посев молока проводят дробно в объеме 3,3 мл в шесть пробирок. Для этого в три пробирки со средой Кесслера вносят по 1 мл молока, а в три оставшиеся — по 0,1 мл молока. Посевы помещают в термостат при температуре +43_С на 24 ч (при такой температуре растет кишечная палочка только теплокровных).
Пробирки с посевами просматривают, отмечают изменения: появление помутнения среды и газа в поплавках. По сумме признаков устанавливают бродильный титр, т. е. наименьший объем продукта, в котором обнаружены БГКП.
Второй этап. Из каждой забродившей пробирки для подтверждения принадлежности к БГКП проводят пересев на среду Эндо с таким расчетом, чтобы получить изолированные колонии, для чего петлей берут минимальное количество посевного материала и проводят посев частым штрихом.
Перед посевом дно чашки с агаром Эндо делят на четыре сектора. Посев из каждой забродившей пробирки со средой Кесс-лера проводят в отдельный сектор. Чашки с посевами помещают в термостат при температуре +37_С на 24 ч.
Третий этап. При отсутствии на среде Эндо колоний, типичных для БГКП (красных с металлическим блеском, розовых), продукт считают не загрязненным кишечной палочкой.
При наличии на среде Эндо колоний, типичных для БГКП, а также бесцветных их изучают следующим образом: готовят препарат из изолированных колоний, окрашивают по Граму и микроскопируют. Если в препарате обнаружены грамотрицательные палочки, то ставят вторую бродильную пробу.
Вторая бродильная проба. Для ее проведения проверенные и выбранные с каждого сектора агара Эндо колонии отсевают на цитратную среду Симмонса и глюкозопептонную среду (ГПС).
Бактерии культивируют 24 ч в среде Симмонса в термостат при температуре +37_С, а в ГПС — при температуре +43_С.
Примечание. Cреда Симмонса содержит цитрат натрия и индикатор бром-тимолблау, готовая среда имеет травянисто_зеленый цвет. Эшерихии, не утилизирующие цитраты, на этой среде не растут, поэтому цвет среды не изменяется. При росте на данной среде цитратположительных бактерий, которые неучитываются, она изменяет свой цвет с зеленого на синий.
Учет результатов посева колоний с агара Эндо на среду Симмонса следующий:
-отсутствие роста на цитратной среде Симмонса указывает на наличие в исследуемом продукте цитратотрицательных разновидностей БГКП, которые необходимо учитывать;
-изменение зеленого цвета среды на синий свидетельствует о том, что обнаруженные бактерии относятся к цитратположительным разновидностям БГКП, которые не учитываются.
Учет результатов посева колоний с агара Эндо на глюкозопептонную среду следующий:
-если в ГПС при температуре +43_С нет брожения, то считают, что в продукте БГКП отсутствуют;
-если в ГПС произошло брожение и одновременно отсутствует рост на среде Симмонса, то считают, что в продукте присутствуют БГКП.
а) если ни в одном из засеянных объемов продукта не обнаружено кишечной палочки, то считают коли-титр более 3,0 мл;
б) если в одном из засеянных объемов по 1 мл продукта обнаружена кишечная палочка, то считают, что коли-титр равен 3,0 мл;
в) если кишечная палочка обнаружена в пяти посевах или во всех объемах продукта, то считают коли-титр менее 0,3 мл;
г) во всех остальных случаях считают коли-титр равным 0,3 мл.
Результаты бактериологического исследования качества готовой продукции не могут быть использованы для задержки выпуска молочной продукции, так как на их проведение требуется много времени, но по ним судят о санитарно-гигиеническом благополучии предприятия.
Дата добавления: 2015-07-16; просмотров: 355 | Нарушение авторских прав
| <== предыдущая страница | | | следующая страница ==> |
| Способы снижения бактериальной обсеменённости молока. | | | Источники обсеменения молока посторонней микрофлорой. |