Вопрос28

Общая бактериальная обсемененность молока проводится методом посева пробы молока разведения 1:10 тыс. и 1:100 тыс. на мясопептонном агаре и ставят в термостат при температуре 37 °С на 48 ч. Чтобы результаты были точными, на каждое разведение берут по три чашки.

Чашки выдерживают в термостате. С помощью лупы 8-10 кратно­го увеличения просматривают выросшие колонии микроорганизмов. Учитывают те ряды посевов, в которых нет сливного (сплошного) роста, но не учитывают те чашки, в которых колонии микробов име­ют сплошной рост. Учет производят не менее чем по двум чашкам.

Количество колоний в чашках одного и того же разведения суммиру­ют, результат делят на число чашек и умножают на степень разведе­ния. Полученные данные по каждому разведению (1:10000 и 1:100000) складывают и делят на два. Результат покажет среднее число бактерий в 1 мл молока, по которому определяют классность молока (табл. 1).

Таблица №1. Определение класса бактериальной обсемененности молока по редуктазной пробе

Продолжительность обесцвечивания метиленовой сини	Количество бактерий в 1 л молока	Класс и оценка молока
Стационарный метод	Ускоренный метод
Более 5,5 часов	Более 3 час	До 500 тыс	I хорошее
От 2 час до 5,5 час	От 1 час до 3 час	До 4 млн	II удовлетворительное
От 20 мин до 2 час	От 8 мин до 1 час	До 20 млн	III плохое
Менее 20 мин	Менее 8 мин	Более 20 млн	IV очень плохое

Более широкое применение при проверке санитарного состояния молока находят методы бактериальной обсемененности по редуктаз­ной или резазуриновой пробам.

По редуктазной пробе: наливают в пробирку 1 мл стандартного раствора метиленовой сини и 20 мл молока. Смешивают смесь, закры­вают пробкой и ставят в водяную баню с температурой воды 38 40 °С. Замечают время, в течение которого произойдет полное обесцвечива­ние молока, и определяют его класс по таблице 1. Принцип дей­ствия основан на том, что микрофлора, попав в молоко, выделяет фер­мент редуктазу, которая восстанавливает (обеспечивает) некоторые органические красители, в т.ч. и метиленовую синь. Чем быстрее происходит обесцвечивание краски, тем больше в молоке редуктазы, т.е. больше бактерий.

По резазуриновой пробе: наливают в пробирку 1 мл 0,005 %-ного ра­створа резазурина и 10 мл молока. Смешивают, закрывают пробкой и ставят в водяную баню с температурой воды 38-40 °С на 1 час. Пользу­ясь таблицей 2 определяют класс бактериальной загрязненности молока. Преимущество этого способа состоит в том, что класс молока по бактериальной обсемененности можно определить в течение 1 часа.

Кетоновые тела. У здоровых коров в молоке кетоновые тела отсут­ствуют. Появляются они при несбалансированности рациона по про­теину и углеводам. Наблюдаются у животных при однородном концентратном типе кормления и дефиците углеводов в кормах, при ко­тором возникает заболевание кетоз (белковый перекорм). Кетоновые тела вредны для организма животных и человека, поэтому молоко, их содержащее, бракуется.

Для определения кетоновых тел в пробирку наливают 10 мл моло­ка, добавляют 5 г сернокислого аммония, 0,1 мл 5 %-ного нитропрусидного натрия и 2 мл концентрированного аммиака смешивают встря­хиванием. Результат учитывают через 5 мин. Появление бледно-розо­вого окрашивания свидетельствует на слабоположительную реакцию, ярко-розового - на положительную; пурпурного - на резкоположительную реакцию.

Таблица №2. Определение бактериальной обсемененности молока по резазуриновой пробе

Продолжитель­ность изменения цвета	Окраска молока	Количест­во бакте­рии в 1 мл молока	Оценка качества молока	Класс
Через 1 час	Сине-стальная	Менее 500 тыс	Хорошее	I
Через 1 час	Сиреневая или сине-фиолетовая	От 500 тыс до 4 млн	Удовлетворительное	II
Через 1 час	Розовая или белая	От 4 млн до 20 млн	Плохое	III
До 20 мин	Белая	Свыше 20 млн	Очень плохое	IV

Анормальное молоко - это когда в сборное молоко добавляется молозиво, стародойное (молоко коров в период запуска), а также при различных нарушениях рациона и молоко, полученное от коров с суб­клинической формой мастита.

Для определения анормального молока используют препарат «мастоприм». Это порошок желтовато-белого цвета, состоящий из смеси сульфата с едким натром. Применяется в виде раствора на дистилли­рованной воде, подогретым до 30-35 °С. Принцип действия препарата основан на взаимодействии с клетками (лейкоцитами) молока.

В луночку молочно-контрольных пластин вносят 1 мл тщательно перемешанного молока и к нему добавляют 1 мл 2,5 %-ного раствора препарата «мастоприм», из флакона с автоматом-клювиком 1 мл. Сме­шивают препарат с молоком в течение 10 секунд деревянной или стеклянной палочкой.

Учет реакции проводят по характеру взаимодействия смеси:

• отрицательная - жидкость однородная, желе не образуется; та­кое молоко нормальное или примеси незначительные (2-3 %);
• положительная - образуется желеобразный сгусток.

Степень положительной реакции отмечается в крестиках (+):

• + - слабое желе, смесь молока тянется за палочкой в виде нити (4-6 % анормального молока);
• ++ - более выраженный желеобразный сгусток, но он не извлека­ется из луночки (8-12 % анормального молока);
• +++ - хорошо сформированный желеобразный сгусток, легко выб­расываемый из луночки-пластинки (15 % и более анормального молока).

Для установления примесей в сборном молоке от коров больных маститом можно использовать индикатор «маститодиагност».

Биологическое качество молока определяют по концентрации лизоцима М, который при посевах задерживает рост колоний тесткультуры (золотистый стафилококк штамма ВМ - ветка молочная). Сте­пень активности лизоцима М учитывают по величине диаметра (мм) кольцеобразной зоны задержки роста (ЗЗР), по которой судят не толь­ко о концентрации, но и активности лизоцима М. Молоко хорошего биологического качества получают от абсолютно здоровых коров, с высокой концентрацией лизоцима М (высокой бактерицидной актив­ности).

Дата добавления: 2015-07-16