Введение. Цианобактерии, представляющие главный источник фотосинтетической продукции в

Цианобактерии, представляющие главный источник фотосинтетической продукции в биосфере, нуждаются в ионах железа в качестве кофакторов фотосинтетической и дыхательной электрон-транспортных цепей, а также многих других клеточных функций. В связи с этим изучение генетической регуляции систем транспорта и гомеостаза железа у фотосинтезирующих организмов имеет большое фундаментальное и практическое значение. Широко известным модельным объектом молекулярной генетики фотосинтезирующих организмов является одноклеточная цианобактерия Synechocystis sp. PCC 6803 (далее Synechocystis 6803). Благодаря современным подходам биоинформатики и активному применению ДНК-микроэррей анализа, у Synechocystis 6803 выявлены гены предполагаемых систем транспорта железа (Katoh et al., 2001), в том числе гены, индуцируемые недостатком железа в среде (Houot et al., 2007). Однако функции многих из них не идентифицированы и их регуляция остается мало изученной. Известным глобальным регулятором гомеостаза железа у бактерий является ген fur, гомолог которого присутствует и у цианобактерий. Однако у цианобактерий этот ген является жизненно важным, вследствие чего выяснить его функцию с помощью инактивации до сих пор не удавалось. В нашей лаборатории сконструированы условные мутанты с инактивированным геном fur, которыев настоящее время служат объектом активных исследований. Вместе с тем важным является вопрос о регуляции самого гена fur, в чем может участвовать недавно обнаруженная антисмысловая РНК asFur.

Цель работы заключалась в изучении роли гена fur и гена его антисмысловой РНК в регуляции генов транспорта железа у цианобактерии Synechocystis sp. PCC6803. В связи с этим были поставлены следующие задачи.

1. Сконструировать мутанты Synechocystis 6803 с дополнительной регулируемой копией гена asFur для анализа функции этого гена.

2. Охарактеризовать мутант Synechocystis 6803 с дополнительной регулируемой копией гена asFur.

3. Изучить характер экспрессии ряда генов предполагаемого fur -регулона у мутантов с регулируемым геном fur и у мутантов с дополнительной регулируемой копией гена asFur.

Дата добавления: 2015-07-12