Наблюдение буферных свойств плазмы крови (опыт Фриденталя).

Цель опыта: наглядная демонстрация буферных свойств плазмы крови.

Ход работы: Берут 2 чистых стаканчика и наливают в один 5 мл плазмы, а в другой 5 мл воды, прибавляют в оба стаканчика по капле метилового оранжевого и, считая капли, титруют 0,1 н раствором соляной кислоты до появления неисчезающего при взбалтывании красного окрашивания. Отмечают количество капель, пошедших на титрование воды и плазмы.

В чем суть опыта Фриденталя – в сравнении буферной емкости сыворотки крови и дистиллированной воды путем их титрования кислотой или щелочью в присутствии индикаторов.

Во сколько раз сыворотка крови более устойчива к закислению и защелачиванию, чем дистиллированная вода? - К закислению – в 300 – 400 раз, к защелачиванию – в 40 – 70 раз.

Значение минерального состава крови (Na, K, Ca) на примере работы сердца

Сердечная деятельность зависит от электролитного состава крови.

Важная роль в нормальной жизнедеятельности сердца принадлежит электролитам.

Изменения концентрации в крови солей калия и кальция оказывают весьма значительное влияние на автоматию и процессы возбуждения и сокращения сердца.

Избыток ионов калия угнетает все стороны сердечной деятельности, действуя отрицательно хронотропно (урежает ритм сердца), инотропно (уменьшает амплитуду сердечных сокращений), дромотропно (ухудшает проведение возбуждения в сердце), батмотропно (уменьшает возбудимость сердечной мышцы). При избытке ионов К⁺ сердце останавливается в диастоле. Резкие нарушения сердечной деятельности наступают и при уменьшении содержания ионов К⁺ в крови (при гипокалиемии).

Избыток ионов кальция действует в обратном направлении: положительно хронотропно, инотропно, дромотропно и батмотропно. При избытке ионов Са²⁺ сердце останавливается в систоле. При уменьшении содержания ионов Са²⁺ в крови сердечные сокращения ослабляются.

Таблица. Нейрогуморальная регуляция деятельности сердечно-сосудистой системы

Фактор	Сердце	Сосуды	Уровень кровяного давления
Ионы кальция	учащают ритм и ослабляют сокращения	суживают	понижают
Ионы калия	замедляют ритм и ослабляют сокращения	расширяют	понижают

Натрий - основной внеклеточный катион. Играет главную роль в поддержании осмотического давления - 90%. Участвует в возникновении и поддержании ПП и ПД, калий и натрий являются антагонистами на клеточном уровне, т.е. повышение содержания натрия приводит к уменьшению калия в клетке.

11. Гемолиз и его виды учебник

Гемолизом называется разрушение оболочки эритроцитов, сопровождающееся выходом гемоглобина в плазму крови, которая окрашивается при этом в красный цвет и становится прозрачной («лаковая кровь»).

Разрушение эритроцитов может быть вызвано уменьшением осмотического давления, что вначале приводит к набуханию, а затем к разрушению эритроцитов - это так называемый осмотический гемолиз (возникает в том случае, когда осмотическое давление окружающего эритроциты раствора уменьшается вдвое по сравнению с нормальным). Концентрация NaCl в окружающем клетку растворе, при которой начинается гемолиз, является мерой так называемой осмотической стойкости (резистентности) эритроцитов. У человека гемолиз начинается в 0,4% растворе NaCl, а в 0,34% растворе разрушаются все эритроциты. При различных патологических состояниях осмотическая стойкость эритроцитов может быть уменьшена и полный гемолиз может наступить и при больших концентрациях NaCl в растворе.

Химический гемолиз происходит под влиянием веществ, разрушающих белково-липидную мембрану эритроцитов— эфир, хлороформ, бензол, алкоголь, желчные кислоты, сапонин и некоторые другие вещества.

Механический гемолиз возникаетпод влиянием сильных механических воздействий, например в результате сотрясения ампулы с кровью.

Гемолиз также вызывают повторные замораживание и оттаивание крови – термический гемолиз.

Биологический гемолиз может возникать в организме под влиянием яда некоторых змей, микробов и паразитов крови (гемолитический стрептококк, палочка газовой гангрены, плазмодий малярии и др.), при переливании несовместимой крови и т.д.

12. Группы крови системы Rh Работа 3.13 – стр. 95

13. Определение резус-принадлежности крови человека. Значение Rh Работа 3.13 – стр. 95

14. Определения количества гемоглобина в крови по способу Сали, Работа 3.3 – стр.77

Определение количества гемоглобина. Принцип определения – колориметрический (сравнение цвета исследуемой крови со стандартными растворами). (а) Гемометрия: гемометр Сали – небольшой штатив с тремя пробирками, где в среднюю пробирку помещают исследуемую кровь, а две другие пробирки содержат стандартный раствор для сравнения. Исследуемую кровь смешивают с соляной кислотой (для гемолиза и образования солянокислого гематина коричневого цвета). Затем добавляют дистиллированную воду до тех пор, пока раствор исследуемой крови на будет такого же цвета, как стандартные растворы. Средняя пробирка имеет шкалу в единицах измерения количества гемоглобина. Нормальное содержание гемоглобина 130-160 г/л. (б) Фотоэлектроколориметрия (с использованием ФЭК).

Для измерения содержания гемоглобина существует много методов, в том числе:

1) определение количества связанного O₂ (1 г НЬ может присоединить до 1,36 мл O₂);

2) анализ уровня железа в крови (содержание железа в гемоглобине составляет 0,34%);

3) колориметрия (сравнение цвета крови с цветом стандартного раствора);

4) измерение экстинкции (спектрофотометрия). При проведении рутинных определений уровня гемоглобина отдают предпочтение последнему методу, так как при

Рис. 22.5. Частотное распределение концентраций гемоглобина у взрослых мужчин (♂), взрослых женщин (♀) и новорожденных. По оси ординат–относительная частота встречаемости, по оси абсцисс–содержание гемоглобина; μ–среднее значение (медиана), ст–стандартное отклонение (величина, характеризующая разброс значений; соответствует расстоянию от медианы кривой нормального распределения до значения, соответствующего наиболее крутому участку этой кривой)

использовании первых двух способов необходима сложная аппаратура, а метод колориметрии неточен.

Спектрофотометрический анализ. Принцип метода состоит в определении содержания НЬ в крови по экстинкции монохроматического света. Поскольку растворенный гемоглобин нестабилен, а экстинкция зависит от степени оксигенации, его необходимо предварительно перевести в стабильную форму.

Спектрофотометрические измерения содержания гемоглобина производят следующим образом. Кровь набирают в капиллярную пипетку и затем смешивают с раствором, содержащим калий железосинеродистый (K₃[Fe(CN)₆]), цианистый калий (KCN) и бикарбонат натрия (NаНСО₃). Под действием этих веществ эритроциты разрушаются, и гемоглобин превращается в циан–метгемоглобин HbCN (содержащий трехвалентное железо), способный сохраняться в течение нескольких недель. При спектрофотометрии раствор цианметгемоглобина освещают монохроматическим светом с длиной волны 546 нм и определяют экстинкцию Е. Зная коэффициент экстинкции e и толщину слоя раствора d, можно, исходя из закона Ламберта–Бэра [уравнение (2)], определить концентрацию раствора С непосредственно по величине экстинкции Е. Чаще предпочитают, однако, предварительно откалибровать шкалу экстинкции при помощи стандартного раствора. В настоящее время цианметгемоглобиновый метод считается наиболее точным из общепринятых способов измерения содержания гемоглобина [32].

Дата добавления: 2015-08-03