L'expérience 2. La détérmination du phosphore inorganique dans le sérum du sang selon la réducion de l’acide phosphomolybdique.

L'expérience 1. La détérmination qualitative des composants inorganiques de la salive.

La sécrétion de la salive dans la cavité buccale se produit par trois paires de glandes. La composition, le volume et рН de salive sont inconstants. La salive contient les ions du sodium, du potassium, du calcium, du chlore, les phosphates, les hydrocarbonates. D'habitude le salive a рН de 6,4 jusqu'à 7,0. Le composant principal de la nature organique c’est le mucine, il y a de petites quantités de glucose, de l'urée, de l'acide lactique, des phénols, des vitamines et du thiocyanate. La salive contient les enzymes – l’amylase, le lysozyme, la phosphatase et la carboanhydrase.

La détérmination de рН du salive.

On porte la goutte du salive sur le papier universel d'indicateur et on compare la coloration reçue avec l'échelle de рН. On marque рН du salive.

La détérmination des phosphates dans le salive.

On assiège 2 ml du salive par 2 ml de 10% de la solution de l’acide trichloracétique. On filtre. Au filtrat on ajoute 4 ml de la solution du molybdate de l'ammonium 5% dans une solution 5N de H₂SO₄ avec l’addition de l'acide ascorbique 0,5%, On melange et fait l’incubation dans le thermostat à 45 °С pendant 20 minutes.

L'expérience 2. La détérmination du phosphore inorganique dans le sérum du sang selon la réducion de l’acide phosphomolybdique.

Le phosphore dans l'organisme se trouve en forme des sels inorganiques et des composées inorganiques (les éthers phosphoriques des hydrates de carbone, les phosphoprotéines, les acides nucléiques, АМP, АDP, АТP, les phospholipides etc.). Principalement les phosphates monoremplacés et biremplacés contiennent les sels inorganiques dans le plasme et le sérum du sang.

Le contenu du phosphore inorganique dans le sérum du sang des adultes dans la norme 2.5-4 mg% (0,81-1,45 mmol/l), chez les enfants avant 14 ans 4-6 mg% (1,29-2,26 mmol/l).

L’hypophosphatémie est observée au rachitisme, à l'hyperfonction des paraglandes thyroïdes. L’hyperphosphatémie est observée au surdosage de la vitamine D, à la fonction insuffisante des glandes parathyroïdes, à l'insuffisance rénale.

Pour préparer l’essai d’expérience vers 1 ml du sérum du sang on ajoute 4 ml de l'eau distillée, 5 ml de 10% de la solution de l’acide trichloracétique. Tombe le dépôt des protéines. On fait la centrifugation du sérum aux 3000 révolutions par minute pendant 10 minutes. Vers 5 ml du centrifugat on ajoute 1 ml de 5% de la solution du molybdate de l'ammonium, 0,2 ml de la solution d’eïconogène et 1,8 ml de l'eau distillée.

On prépare le contrôle simultanément avec l'essai d’expérience. Vers 2,5 ml de l’acide trichloracétique on verse 2,5 ml de l'eau, 1 ml de la solution du molybdate d’ammonium, 0,2 ml de la solution d’eïconogène, 1,8 ml de l'eau..

On laisse les tubes pour 20 minutes à la température ambiante, puis on mesure la densité optique sur le photoélectrocolorimètre contre le contrôle à la longueur d'onde 630-690 nm (le filtre rouge).

On calcule la concentration du phosphore inorganique dans le sang d’après le graphique de calibration.

La construction du graphique de calibration: on prépare les dilutions de la solution standarde, comme cela est indiqué dans le tableau 6. Après le stationnement de 20 minutes de l'essai on mesure la densité optique de tous les essais contre le contrôle. En basant sur les données reçues on fait le graphique de calibration, en déposant sur les axes des ordonnées les valeurs trouvées de la densité optique, er sur les axes des abscisses - les quantités de phosphore correspondantes.

Le tableau. La composition des mélanges pour le graphique de calibration.

№ du tube	La solution de standard, ml	La solution de l’acide trichloracétique, ml	La solution du molybdate d’ammonium, ml	La solution d’eïconogène, ml	L’eau distillée , ml	Le teneur du phospho re dans l’essai
mg	mg%
	0,5	2,5	1,0	0,2	3,8	0,01
	1,0	2,5	1,0	0,2	3,3	0,02
	2,0	2,5	1,0	0,2	2,3	0,04
	3,0	2,5	1,0	0,2	1,3	0,06
	4,0	2,5	1,0	0,2	0,3	0,08

Дата добавления: 2015-10-29