II. Цели, задачи, новизна

2.1. Цель проекта: Выявление и объяснение корреляций и взаимозависимостей в функционировании сознания и мозга (организма) человека во время медитации, выполняемой на основе традиционных буддийских психотехник (два вида медитации: аналитическая медитация и шаматха – однонаправленная концентрация); обнаружение и объяснение эффекта позитивного воздействия медитации на организм человека во время медитации и в период после медитации.

2.2. Задачи:

1. Адаптация существующих философских и конкретно-научных теорий сознания к целям проекта;

2. Формирование группы испытуемых (имеющих опыт медитации по развитию бодхичитты) и контрольной группы (не имеющих опыта буддийской медитации) для варианта А «Аналитическая медитация на развитие бодхичитты (любви, сострадания и сверхпомысла по специальной методике)»;

3. Формирование группы испытуемых (имеющих подготовку в буддийской философии и теории шаматхи, имеющих опыт медитации и специально отобранных д-ром буддийской философии Геше Джампа Тинлеем) и контрольной группы (не имеющих буддийской подготовки) для варианта Б «Развитие шаматхи – однонаправленной концентрации»;

4. Фиксация основных показателей функционирования мозга и состояния здоровья испытуемых до проведения медитации в затворничестве путем снятия энцефалограммы, взятия проб крови, слюны, слезы и т.д.;

5. Фиксация (путем снятия энцефалограмм и иных физиологических показателей) и дифференцированный анализ наступающих в зависимости от вида медитации изменений в функционировании головного мозга испытуемых во время медитации в затворничестве и в период после окончания затворничества;

6. Психофизиологический анализ будет включать в себя одновременную регистрацию биоэлектрической активности головного мозга, ряда ключевых показателей сердечно-сосудистой активности, электромиографической активности и дыхания собственно в процессе медитации и в процессе различных эмоциональных нагрузок. Данный подход позволит не только определить нейрофизиологические и соматические корреляты медитативного процесса, но и оценить последствия медитации в отношении функциональных взаимодействий в системе мозг-тело-сознание в стрессовых условиях, что позволит приблизиться к пониманию физиологических механизмов благоприятного воздействия медитации на психологическое и соматическое здоровье.

7. Изучение изменений статуса иммунной и эндокринной систем во время медитации двух видов в затворничестве и в период после затворничества с помощью биохимического анализа собранных проб крови, слюны, слез.

8. Изучение изменений экспрессии генов в пуле клеток лимфоцитарной фракции крови во время медитации двух видов в затворничестве и в период после затворничества. Предполагается быстрое получение лимфоцитарной фракции и плазмы крови с последующим замораживанием. Далее из лимфоцитарной фракции крови будет выделена суммарная РНК, набором Ribo-minus Eucariote kit проведено удаление рибосомальной РНК. С использованием набора SOLiD Total RNA-Seq Kit РНК фрагментируется, пришиваются специфические двуцепочечные адаптеры, проводится синтез кДНК и, в конечном счёте, получение специфических баркодированных библиотек для анализа транскриптома на системе массового параллельного секвенирования SOLiD. Секвенирование на системе SOLiD будет проведено из расчёта получения 40 млн. конечных чтений для каждого из образцов, что достаточно для анализа изменений транскриптома, включая относительно редко представленные транскрипты.

9. После биоинформатического анализа полученных данных будет установлен предварительный список генов, в максимальной степени изменивших свою экспрессию, а также выбраны биохимические и регуляторные процессы, в максимальной степени изменившиеся в результате медитации. Часть генов из этого списка будет отобрана для верификации результатов анализа RNA-Seq с помощью методов ПЦР в реальном времени и цифровой ПЦР, для чего будут выбраны и заказаны соответствующие TaqMan-зонды.

10. Важную роль в различных регуляторных событиях в организме в целом могут играть такие специфические регуляторные молекулы, как микроРНК, находящиеся в плазме крови. Изменения в пуле этих микроРНК могут существенно изменять экспрессию их генов-мишеней. Исследование этих изменений будет проведено на высокопроизводительном секвенаторе IonTorrent PGM. Микро-РНК из плазмы крови будут выделены и обогащены с помощью набора MirVana Kit, после чего с использованием набора Ion Xpress RNA-Seq будут созданы специфические библиотеки для секвенирования, собственно секвенирование на IonTorrent будет проводиться с использованием чипов 318 без баркодирования из расчёта 1 образец на чип.

11. Выработка комплексной междисциплинарной теоретической основы интерпретации полученных результатов;

12. Интерпретация полученных результатов.

Дата добавления: 2015-08-17