Т. Маниатис Э. Фрич Дж. Сэмбрук 5 страница

Харон 28

Общая длина: штамм

2221 —39,39 kb

штамм 2270 — 40,29 kb

(в левом плече содержит

вставку неизвестного

п р о 11 с х о ж ден и я дл и н о й

около 900 пар)

Генетические маркеры:

Ы007, КН54, NIN5

Литература: Rimm D. et

al., 1980, Gene, 12, 301

Примечание: До недавне'

го времени это был един­и 1 У

ственныи фаговый век­тор, который можно бы­ло применять для кло­нирования фрагментов с Баш] II-концами. Он ис­пользуется для создания библиотек фрагментов, полученных при частич­ном расщеплении эука­риотической ДНК рос- триктазой МЬо\ (Liu et aL, 1980). Отсутствие в этом векторе с/ц*-сайтов приводит к большим ва­риациям размера бляшек рекомбинантов (подроб­ности см. в тексте). Не­давно были получены

другие векторы для кло­нирования BamHI-фраг­ментов (например, L47.1 и BF101), поэтому Ха­рон 28 стал использо­ваться для клонирования таких фрагментов гораз­до реже

Фермент

bar- I

Н I Г::"1 LC

(штамм 222 11

(штамм 22/01

'оа'

ЕГ с о R Г ■' В а Т' Т (Ш тамм 222 1)

EcoRI ' Barr.Т (штамм 2270)

H i n d Ш 'Soil

EcoRI/Soir (штамм 2221]

EcoRI.' S о 11 (штамм 2270)

EcoRI/Xhpt

(штамм 2221)

EcoRT/Xhot (штамм 2270)

SolI/XhnT

Вс га в ка/за мощен и Замещение

Вс ганка

Замещение

Вс танка

Замещение

Замещение

Знм^щеии!-'

Замещение

Замещение-

Замещение

Замещение

Замещение

Замещение

зяиршр.ниа

СИСТЕМЫ ВЕКТОР — ХОЗЯИН

1----- 1---- 1---- 1---- 1---- 1---- 1---- 1---- 1---- 1---- 1---- 1---- 1---- Т--- 1---- 1---- Г---- 1------ Т-

J 11 1 ■ 1 L- - -J у 1 Д ^ Д. 1; ■■ ■) ■ ■ ■>

.., ■ - ч.. vU ui wO -- ’ ’ ■■■ ⁴-' '*

~l- 1- 1-! I

4.- 'i^:j t>c

£5 £6:.7.:ь. -.v- л

if.!

^red ^ - -

e*u 'jO^¹ ■: i_ r::^{1 r}- rp* Cj. l.

. i ¹ n i:,! i -i i г _r

til'^1	':; \ ^1! \
LI;' 1 1 и..к-i	ilt
Г) * s * X ’	-s Г „•
	г ^L, ■ * i
— -

Ia

о IT t.■

i i

\

I (i (\\» I;! M: i:

; j гтн. ■"' ~ • ^T ' с r > T¹ (. т-,. i,.';. j. _K

г л:.i. ¹ ‘^r- - a. <;i\:i.,.'.■ _r

^L ' ft - f '

f»

П1

ЫСС

5_?96 (минимум)

tco r:

¹ 0^; I

.4t-,

. *^r':

Положение сайтов рестрикции

L-конец г.

bq '2	4 \ ■
Hpo '	'^r-)
4 _ T Mv'O J.	■ibZ'
Ию Г
hpc:	i,7 70
Hp-'J I '	‘ 002Э
Hf'G I	826Э
Ь! Г	Н89Э
be! I	:чоо
i-pG I	N710
*■ ^:	!20еэ
не:	!4cca
* pr'	.79;;
*4- I	Ь
' FT (J *	. ^u t с _
c	. w.
^1 ^ t "t ■ ■	.'; b;
	/ J S •

''■s' Л ^нро: гз'т-:

■ j ■ 2 с-

' ' t. (Г _

¹Я ^г' ь

'°~[=

На”"-

EcoRI

Во- I

3,86

Sal I 5/5

Soil

13.2'

EcoRI Sol Z

4.96

Xhc I

EcoRI Hpo I нра I Bell Sal I Sui I Xho I Bom I Hpo I Bgl IT PvvJ I Bgl Л Ava I Bgll Bgl E Hpo I Hpo I Sma I SstI Bell Bel 3 Bell R-конец

282T0

28280 2 6 6 8 С 29200 2 924 С 2 9 74 С 30000

з;соо

31760 32 220 32280 325 О С 32620 33160 332 20 34020 34240 34300 34630 35310 380£0 39650 402.30

(3,61

EcoRI Xhol

--- Г I-- Г" 1 1--- 1--- 1-- Г'" r I---- г

Kd I 2 3 4 5 6 7 S 9 10 I'l

~1 i---- 1--- 1--- 1

12 13 14;5 16

-i--- 1--- 1--- 1--- 1--- 1--- 1-- i--- 1-- 1—

-B i9 20 2i 23 24 2b 26 27

cos L

N u; д w В

: I

н

М L К I

IS v.\SSSS

аса ■ ta"t=f 0

-т. S?r.°£ "6^
m S

x

e и £ a

> a о ^a

о — — “ CD £D

D ^ Cl >

‘r- a.

u

CD

О

a.

X

a

al.

a

un </> > O ^ Q. r? <1

X

u CL Ul

■[

Ы007

P

------- blC07

Фермент

Bam I

Hind Ж

Вставка/замещение

Замещение

Замещение

(максимум) I9j 10 =1

Bern I

ilj67

Hmd Ж

EcoRI

Замещение

17,46

=1

EcoRI

Soil

Xhol

EcoRI / Sol I

HindlH/Soil

HindHI /Xhol

EcoRI /Sail

EcoRI /Xho I

Замещение

Замещение

Замещение

Замещение

Замещение

Замещение

Замещение

и

12,18

Soli

Я, 6 7

Xho I

20,24

EcoRI

Ц

17,05

Hmd ДС!7_%31

Hind Ж

18,93

А

EcoRI

19.24

EcoRI

Sail / Xho I

Харон 30

Общая длина: 46,76 kb

Замещение

12,43

Soil

—I--------- 1------- 1 r

28 29 30 31

-r---- 1----------------------------- (---- 1------------------------------ 1---- 1------------------------------ 1---- 1--------------------------- r~

32 33 34 35 36 37 38 39 40

—I------ 1--------------------- 1 1--------- 1--------------------- 1 1--------- 1--------------------- 1 Г

41 42 43 44 45 46 4f 48 49 50 Kb

-C

ZD

-C

>

NIN 5

-c

6 10 (минимум)

BamX

HmdM

4,46

EcoRI

Soli

F

Xhol

7,24

Soli

4₍05

Soli

4₍3f

Xhol

5.98

Soli

6,24

F

Xhol

F

Положение сайтов рестрикции

L.-конец о	Bam I
Bgl I		Hpa I
Hpo I		Bgl К
Avo I		Pvul
Hpo I		Bgl I
Hpo I		Aval
Hpo I		Bgl I
Hpo I		Bgl IT
Bell		Hpo I
Bell		Hpo I
Hpo I		Smo I
Pvul		SstI
Bell		Bell
Kpn I		Bell
Kpn I		Bell
Smo I		R-конец 46760
Sst H
Sstll
Aval
EcoRI
Sst П
Hpo I
Bam I	2 2670
Bgl IE
HindJI
Smo I
EcoRI
Hpa I
Hpa I
Bel I
Soli
Sail
Xhol
Bom 1
Bgl It
Hindu
Smo 1
EcoRI
Hpa I
Hpo I
Bell
Soil
Soli
XhoX

Xhol ^{r v}

Генетические маркеры: Ы007, KH54, NIN5, dupl(sbh2-3) Литература: Rimm D. et al., 1980, Gene, 12, 301

56 ГЛАВА 1

■т

—\— 1

' т

-т Т Г"

■ I г г

т

~i I I

' f т

T

■ —r.... T

^1 i^_

~T" —5 "

И Г, I

\ j

ч

О ^f J / н

н ^-j,)

, 1

• " J ■ ’ | •.., ^11

It).1.

■ >

. r-

1-

■■ ■■.:

. /, 4

.s L

‘ ',. "2 ! J ^

1 п

» А

'■** м 1 V L ' ' 1

г

^:, '' ' ^ ^1! ' ^1

11;;

| 1

Н М I.! I

1 ‘!^J1

l

i

: j

^1 i ^1

| i |

i ' |

j

t;

! i '|

^:

1! • •- ■ ► ^г-'

•; I

* <

i i

: 1 I J; > «^1 ■ \; t \

^ Г У г

:г ^1 т

/ ^L^1^J

li.

. i.

: ' ■

• • ^T i

фг-рмонт Вставка 'чамг ш,(-н и о

■М ГМ-?)

■ i а м < ■ щ * ■ м и f ■

■j -

.v- ■ ■ Вст анка

:'Л.',\^гс I Замещение

,1709

Общая длина: 43,25 kb

СИСТЕМЫ ВЕКТОР — ХОЗЯИН 57

(^акгиму*/' 19,62

Ч

'<^г

6X2 (минимум)

' I ■­hir'd Щ.

Г i ол ожени с саитоь рес грикцииг

ХГ:С L

L - к о н e ц с
bgi Z
Bam I	556C
Kpn I	1 74 3C
Kpn:
F. co^pX	2*! 71С
Hmd X
H.nd Ш	2 8 80 С
So- I	30:60
Sc I	3067C
Xhol
Sa^ I	3J930
9g E	33.30
Hmdu]	34 360
H no H	3 4940
Bg I	362 3..
8g.E
F с о ^ I
Ec: RI
R-конец	4 5250

Генетические маркеры: gam am210, trypE, NIN5 (srIM-2)V Литература: Murray N. et al., 1977, Molee. Gen. Genet., 150, 53

58 ГЛАВА I

г¹'Г i

Н--- 1- г

2 3 4

-!-- Г

D 6

П---------- г^-

7 Ь

"I-- 1-- 1-- 1-- 1-- 1-- 1-- 1-- 1--!-- Г

.0 II:2 13 14 15 16 17 18 19 2 С

Л' Б

И

■ ^ г ^ri -¹ Г £ т

:/ L К I I! I I ■

I I

— I'l т-р. _L_

т: -

о

Ck

Cl -

г а-

I;

! I

:Tj

J. *

¹ M ¹!! n⁴!

cj: — * - с з ■ • " -.-J F4

Tr o ■;:■ v

^.j:¹

(sr: xi - 2)

UJ

rj

OeiiMeur Вс тавкн /^ам^щониг! -. „,

___ _.________ _ (максимум) 2ч_}[

¹ ■' ■' ^’ Замещение |

EcoRI

Н:ПС11П

замещение

Вс гп I

Замощение

В с т а ь к а

Sa!

j. 1

Замещение

Go. i.'Xhol

Замещение

&L47.1

Общая длина: 40,6 kb

Генетические маркеры: (srUl-2)v, imm434 cl-, NIN5, chiA 131

т

СИСТЕМЫ ВЕКТОР — хозяин 59

-г—

-г^-'

“I—

—1—

—г~

—I—

го

Г

34 35 36 У7 38 39 40

"Т--------- 1--------- Г--------------------------------------------------------------------------------- Т-------------- 1--------- 1 1 "Ш-------------- \--------- т

41 42 4 3 44 45 46 4/ 46 44' 50 г

1=

ЕГ

О

о

UJ

-|cJ

2: вг

=i

Н:МЙШ

:9.60

Вогт. I

А 7 С

Bom I

13,29 0

¥

Xhol Xhol 13,8' *

Sol I Sal 1 14,31 *

Sol I Xhol

imm434

jun n

p

с

D-

NIN5

m

TD ^ С с

^ u;

8,61 (минимум) [Hill "

FcoRI

н ndl

Положение сайтов рестрикции

L-конец	С
Bgi С	4 70
Kpn I
Kpn I
EcoRI
Hind IH	2*080
Barr:	2.5 5 pr
Sc' I	284 r.
Sal I	?оэ v:
Xho I	29 9'.
Вогр I
Hmd Щ	324 v
EcoRI	?30?-'
BgiZ	3 3750
Bg^: П
R-конец 40620

Литература: Loenen W. A., Brammar W. J., 1980, Gene, 10, 249

Примечание: Весьма универсальный вектор, который можно использовать для

клонирования больших EcoRI-, HindIII- и BamHI-фрагментов

60 ГЛАВА I

--------------- я--------------- i------------ T 1 1 Kti 1 - 3 A ' Ь	-----------------	~Г" ~Т	'"1 Т F i 8 9 О!	т 1?	т :3	■ т |4	т т 15 16	—Т------------------ Г-------------- г т 17 18 S го	----------- т-------- ■’“Т----------------- \-------- 2' 22 гъ	^1-1» 2 А
к. | щ л и а е с ^1: 1.	Mui С	Е	Fi z... j ■: т 1 1 J! 1 i	Ч		М L	к- т	J
: 1			1 1 ^1	| \				г ’ '	: 1
О • J * г ^L L <1 “	; о h а (Г, ^J		; 1 о, f т. п;	о ^J о. 7 CL		о СЕ	о а Т	^1. О ^11 Г.* * * i	^1. ■ >,	■ 5

а с j

Lи

Ф'' f I М i ‘ Н 1

Eco RI

д_а | j.'iaMi чцг 'н ■

DC I HRK.i. 'KiMf 'Ц(■ н и (■

^<:М• I;.-. НИ>

(1 К i И М * Vi • \$

f

tг-, t,'

ss

Xh₀ I

B<" 1 IM И I

.coRl /$а: I

,;c RI/ Xho I

Sst I / So: I

Sst I / Xhol

..iiiMVlV 'НИ¹

Замещении

Замещение;

Eo- -:

^CO ^ д

q ^4

ss^

Sst 7

2C^

Sst J

Xsep6-1ae5

Общая длина: 44,3 kb

Генетические маркеры: lac5, iinm21 ts, NIK5

Литература: E, Meyerowitz, A. Rambach, неопубликованные данные

Дата добавления: 2015-08-29