Исследование микроорганизмов в живом состоянии

Так как методы обнаружения жгутиков трудны, а определение подвижности микробов служит целям определения их вида, то в повседневной лабораторной практике для определения подвижности пользуются наблюдением бактерий в живом состоянии — в раздавленной или висячей капле.
Раздавленная капля. На середину предметного стекла наносят петлей или пипеткой каплю исследуемого материала. Эту каплю накрывают покровным стеклом, осторожно накладывая его пинцетом, чтобы в жидкости не образовалось пузырьков воздуха. Правильно сделанная капля заполняет все пространство между покровным и предметным стеклом, но при этом жидкость не выступает за края покровного стекла. Если требуется рассматривать препарат продолжительное время, то края покровного стекла предварительно смазывают вазелином.
Висячая капля. Каплю исследуемого материала наносят на середину покровного стекла. Затем покровное стекло быстро поворачивают каплей вниз и накладывают на предметное стекло с углублением («лункой») в середине. Капля должна свободно свисать в углубление, не соприкасаясь с его дном и краями (рис. 20). Края выемки на предметном стекле следует предварительно смазать вазелином. Таким образом, капля оказывается герметически закрытой во влажной камере и защищенной от высыхания.
Определение подвижности у микробов используется при лабораторной диагностике дизентерии, холеры, брюшного тифа и других заболеваний.
При исследовании живых микробов следует отличать активную подвижность бактерий, свидетельствующую о наличии у них невидимых жгутиков, от пассивного молекулярного (броуновского) движения, свойственного всем взвешенным в жидкости мелким частицам (форменные элементы, зернышки, пылинки, микробы как лишенные жгутиков, так и убитые).

Рис. 20. Висячая капля.

Исследование в темном поле зрения. Движение бактерий и спирохет можно наблюдать в микроскопе, который отличается от обычного применением яркого бокового освещения, в силу чего получается изображение светящегося объекта на темном фоне. Принцип темного поля основан на том, что падающие сбоку световые лучи отклоняются плотными частицами (в частности, бактериями) и последние благодаря этому представляются глазу наблюдателя ярко светящимися. Боковое освещение в микроскопе можно получить, заменив обычный осветитель специальным конденсором с затемнением в центре. Такой конденсор задерживает все центральные лучи света и пропускает лишь периферические. Техника исследования заключается в следующем. На предметное стекло наносят каплю исследуемого материала и осторожно накрывают покровным стеклом, чтобы не было пузырьков воздуха. Затем на поверхность конденсора помещают каплю воды или кедрового масла и предметное стекло с препаратом кладут на эту каплю.

Дата добавления: 2015-10-02