От конкретного пробиотического штамма

Многие из известных в настоящий момент пробиотических штаммов микроорганизмов являются частью нормальной микрофлоры организма или присутствуют в пищевых продуктах, потребляемых уже несколькими поколениями людей по всему миру. Поэтому ВОЗ, Управление по контролю над пищевыми продуктами и лекарственными препаратами США (FDА) и Организация по продуктам питания и сельскому хозяйству ООН (FАО) заключают, что пробиотики в целом считаются безопасными и имеют GRAS статус (Generally Regarded As Safe). Это означает, что они могут использоваться без ограничения в пищевой и фармацевтической промышленности.

С 1995 по 2000 г. в Финляндии проводилась национальная программа мониторинга безопасности пробиотиков с целью оценить возможное влияние увеличения применения пробиотиков (в частности, лактобацилл на частоту возникновения бактериемии, вызванной пробиотиками. Результаты исследования свидетельствуют о том, что увеличение применения пробиотиков не привело к росту частоты возникновения бактериемии, вызванной Lactobacillus.

Всемирная организация здравоохранения совместно с Продовольственной и сельскохозяйственной организацией Объединенных наций разработала четкие рекомендации по оценке продуктов пробиотического направления. Так, бактерии, входящие в состав такого рода продуктов, рекомендовано депонировать в международно признанном депозитарии микроорганизмов, идентифицировать валидированными методами, а их пробиотические свойства и безопасность должны быть доказаны экспериментами и подтверждены клиническими испытаниями [1, 2]

Однако в настоящее время часто наблюдается тенденция «обобщения» полезных эффектов пробиотиков, в основе которой лежит ошибочное мнение о том, что результаты исследований специфического пробиотического штамма лактобацилл или бифидобактерий могут быть перенесены на любой продукт, заявляемый как пробиотик на фармацевтическом рынке или на рынке пищевой продукции. Это в корне неправильно, ведь каждый приписываемый пробиотику эффект связан именно с конкретным штаммом, входящим в его состав. Эффекты, свойственные определенному штамму, не следует переносить на другие штаммы этого же вида, т.е. полезные эффекты пробиотиков являются, в первую очередь, штаммоспецифическими [1], и лишь во вторую очередь, могут быть усилены правильным подбором консорциума.

Как показали результаты многочисленных экспериментальных и клинических наблюдений, вызвать продолжительные качественные и количественные изменения микрофлоры кишечника у взрослого иммунокомпетентного человека тяжело. Даже использование пробиотиков обычно не приводит к устойчивому изменению того или другого микробиологического показателя. В экспериментах введение бактерий приводило к изменению состава микрофлоры на короткое время, но первичный состав вскоре восстанавливался. Легче подвергается изменению микрофлора у детей на этапе неонатальной колонизации, когда состав микрофлоры более простой, чем у взрослых.

Недостаточная эффективность многих пробиотиков обусловлена инактивацией действующей субстанции препарата под влиянием кислотного (в желудке), желчного (в двенадцатиперстной кишке) и ферментативного барьера (все отделы тонкой кишки). Но и после достижения пробиотическим микроорганизмом толстой кишки колонизация происходит не всегда. В толстой кишке пробиотическую культуру могут «недружелюбно» встретить, во-первых, оппортунистическая микробиота условно-патогенных бактерий, во-вторых, резидентная нормобиота пациента, в-третьих, его местная иммунная система. Антагонизм между микроорганизмами, как известно, формируется вследствие выделения антимикробных веществ, конкуренции за источники питания и места адгезии в толстой кишке. На этих механизмах основан эффект бионесовместимости резидентной и пробиотической микрофлоры.

В ходе изучения взаимоотношений пробиотических и индигенных лактобацилл хозяина в условиях совместного культивирования in vitro выявлено [3, 4] 3 типа взаимодействия: отсутствие антагонизма — биосовместимость (15,2%), подавление роста индигенных микроорганизмов МТКК - биосовместимость по типу «пробиотик против хозяина» (62,3%) и ингибирование роста пробиотических бактерий — биосовместимость по типу «хозяин против пробиотика» (22,5%). В исследованиях с использованием двух клинических изолятов индигенных лактобацилл, изолированных из фекалий больных (L. аcidophilus № 1, L. brevis № 2), было показано, что оба изолята проявляли антагонистические взаимоотношения (по типу «хозяин против пробиотика») с бифидо- и лактобактериями, выделенными из биотических препаратов бифидумбактерин и лактобактерин. Полученные результаты еще раз свидетельствуют о необходимости предварительного исследования взаимоотношения пробиотических культур с индигенными культурами.

Как преодолеть указанные препятствия снижения эффективности применения пробиотиков?

При чрезмерном росте условнопатогенной микрофлоры для достижения клинического эффекта пробиотического препарата необходимы:

- предварительная или одновременная селективная деконтаминация кишечника. С этой целью традиционно используют биологические или синтетические энтеросептики;

- использование штаммов пробиотиков, клинический эффект которых многократно доказан или;

- повышение КР конкретного штамма, обеспечение защиты кишечника от колонизации чужеродными микроорганизмами. В частности, антибиотики различных групп обладают способностью снижать адгезивность микроорганизмов, однако, при исследовании их воздействия на патогены (Salmonella и уропатогенные E.coli) и представителей нормофлоры (кишечная палочка, лактобактерии) показано, что последние значительно более сильно подвержены антиадгезивному действию антибиотиков. Отсюда очевидна необходимость поиска агентов (в частности веществ с пребиотическим эффектом), способных ингибировать адгезивность патогенов, воздействуя при этом на нормофлору незначительно.

В приведенной ниже таблице указаны основные эффекты штаммов пробиотических микроорганизмов, применявшихся в монокультуре, полезность которых доказана по результатам клинических исследований у людей.

Таким образом, достаточная клиника пробиотического эффекта имеется лишь у 8 штаммов лактобацилл (L. rhamnosus GG, L. reuteri SD2112, L. casei DN-114001, L. acidophilus NCFM, L. plantarum 299V, L. casei Shirota YIT9029, L. johnsonii La1 (Lj1), L. salivarius UCC118) и 5 штамов бифидобактерий. Причем, только у лактобацилл клинически доказана профилактика и лечение инфекционной диареи, профилактика антибиотик-ассоциированной диареи, профилактика рецидивов рака. Усиление иммунного ответа официально зарегистрировано лишь у трёх штаммов лактобацилл и одного бифидобактерий. Эти штаммы прошли широкую диагностику и имеют доказательства эффективности по результатам контролируемых исследований у человека и включаются в состав ПФП следующих марок [1]:

Lactobacillus rhamnosus (рис. 1.7.) — кисломолочный напиток Имунеле, кисломолочные и соевые напитки Lifeway Kefir (США)

Lactobacillus rhamnosus, штамм LGG (ATCC 53103) — йогурты, фруктовые творожки и кисломолочные кефирные продукты Био Баланс (Россия), йогурты и кисломолочные продукты Gefilus (Финляндия), спреды (мягкое масло, маргарин) Lätta (Германия, Швеция), йогурты Aktifit (Швейцария), молоко Avonmore Milk Plus и кисломолочный напиток Everybody (Ирландия)

Lactobacillus rhamnosus, штаммы LGG и Lc705 — кисломолочные продукты Gefilus Max (Финляндия)

Lactobacillus rhamnosus — кисломолочный напиток Имунеле, кисломолочные и соевые напитки Lifeway Kefir (США)

Lactobacillus casei (рис. 1.8.) — кисломолочные напитки Имунеле (Россия), йогурт Horizon Organic, кисломолочные и соевые напитки Lifeway Kefir, йогурты Mountain High и Stronyfield Farm (США)

Lactobacillus casei, штамм DN114-001 — кисломолочные напитки Actimel (Россия)

Lactobacillus casei, штамм Shirota — кисломолочный напиток Yakult (Япония)

Lactobacillus reuteri SD2112 (рис.1.9.) – кисломолочные напитки (Швеция)

Lactobacillus johnsonii, штамм NCC533 (LC1) — йогурты LC1 Nestlé (Швейцария)

Lactobacillus acidophilus NEU2011 (рис.1.11)и др. — кисломолочные продукты Biomax (Россия), соевый йогурт Sojasun (Франция), йогурт и кисломолочный напиток Muller Vitality (Великобритания), йогурт Mountain High (США), йогурт LG 21 (Япония), кисломолочные и соевые напитки Lifeway Kefir (США)

Lactobacillus plantarum — кисломолочные и соевые напитки Lifeway Kefir (США), фруктовый напиток ProViva (Швеция), GoodBelly и ProVita (фирма NextFoods Probi, США).

Таблица 1.5 – Штаммы пробиотиков, прошедшие длительные клинические исследования по влиянию на организм людей [5]

Штамм пробиотика	Положительное влияние на макроорганизм
L. rhamnosus GG	Усиление иммунного ответа, профилактика и лечение инфекций дыхательных путей у детей, профилактика и лечение инфекционной диареи у детей, профилактика антибиотик-ассоциированной диареи, профилактика атопического дерматита у детей, улучшение эрадикации H. Pylori
L. reuteri SD2112	Усиление иммунного ответа, профилактика инфекций дыхательных путей у взрослых, лечение ротавирусной диареи
L. casei DN-114001	Усиление иммунного ответа, лечение диареи
L. acidophilus NCFM	Снижение непереносимости лактозы, уменьшение выраженности синдрома избыточного бактериального роста, лечение и профилактика урогенитальных инфекций у женщин, лечение инфекций дыхательных путей у детей, лечение диареи у детей, улучшение эрадикации H. Pylori
L. plantarum 299V	Синдром раздраженного кишечника, применяется в восстановительном периоде после хирургических вмешательств
L. casei Shirota YIT9029	Профилактика рецидивов поверхностного рака мочевого пузыря, усиление иммунного ответа
L. johnsonii La1 (Lj1)	Улучшение эрадикации H. pylori, усиление иммунного ответа
L. salivarius UCC118	Воспалительные заболевания кишечника
B. lactis BB-12	Профилактика инфекций дыхательных путей у детей, профилактика и лечение инфекционной диареи и желудочно-кишечных расстройств у детей, профилактика антибиотик-ассоциированной диареи
B. infantis 35624	Синдром раздраженного кишечника
B. longum BB536	Лечение атопической экземы, улучшение эрадикации H. pylori, лечение неспецифического язвенного колита
B. lactis HN019 (DR10)	Усиление иммунного ответа, особенно у пожилых
B. animalis DN173-010	Нормализация времени прохождения пищи по кишечнику
S. thermophilus (большинство штаммов)	Уменьшение лактазной недостаточности

Р и с. 1.7.. Культура Lactobacillus rhamnosus [Joseph Milton]	Р и с. 1.8. Культура Lactobacillus casei [Joseph Milton]	Рис. 1.9. Культура Lactobacillus reuterii [Microbe Wiki]

Кефирные грибки, широкое практическое использование которых во всем мире, а также исследования доказывающие, что они могут подавлять бактерии сальмонеллы и кишечные палочки общеизвестны: включают в свое число лактококки, лактобациллы (табл. 1.6), различные виды дрожжевых культур, уксуснокислые бактерии.

Таблица 1.6. - Lactobacilli, входящие с состав кефирных грибков

	Lactobacillus acidophilus		Lb. delbrueckii subsp. Lactis
	Lb. Brevis (рис.1)		Lb. Fructivorans
	Lb. casei subsp. casei (рис.0.1)		Lb. helveticus subsp. Lactis
	Lb. casei subsp. rhamnosus (рис. 0)		Lb. Hilgardii
	Lb. paracasei subsp. Paracasei		Lb. helveticus (рис. 4)
	Lb. fermentum		Lb. Kefiri
	Lb. Cellobiosus		Lb. kefiranofaciens subsp. Kefirgranum
	Lb. delbrueckii subsp. Bulgaricus (рис.3)		Lb. kefiranofaciens subsp. Kefiranofaciens
	Lb. Parakefiri

Рис. 1.10 Культура Lactobacillus brevis [ Microbe Wiki ]	Рис. 1.11. Культура Lactobacillus acidophilus NEU2011 [ Microbe Wiki ]	Рис. 1.12. Культура Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgariсus [ Стрептококки ]	Рис. 1.13. Культура Lactobacillus helveticus [ Food microbiology ]

Как известно, с возрастом наблюдается снижение иммунитета, что приводит к предрасположенности к заболеваниям, провоцирует болезненное состояние и слабость. Одним из возможных способов поддержания оптимального состояния иммунной системы является использование пробиотических продуктов. В исследовании Makino S. и соавт. оценивали эффективность употребления йогуртов, ферментированных с Lactobacillus Delbrueckii ssp. bulgaricus (L. bulgaricus) OLL1073 R-1, на устойчивость к простудным заболеваниям. Авторы провели два независимых исследования, в которых приняли участие 57 (средний возраст 74,5 лет) и 85 здоровых пожилых человека (средний возраст 67,7 года). В каждом исследовании испытуемые были разделены на две группы в зависимости от возраста и пола и употребляли 90 г йогурта или 100 мл молока один раз в день ежедневно в течение 8 или 12 недель. Метаанализ результатов этих исследований показал, что риск заразиться простудой был примерно в 2,6 раза ниже (ОР 0,39, P = 0,019) в группе йогурта, чем в группе молока, и увеличение активности естественных клеток-киллеров была значительно выше в группе йогурта, чем в группе молока (P = 0,028). Кроме того, качество жизни после приема было значительно выше в группе йогурта, чем в группе молока. То есть потребление йогуртов, ферментированных L. bulgaricus OLL1073 R-1, дополняет естественную активность клеток-киллеров и достоверно снижает риск заражения простудными заболеваниями у пожилых людей [ 6 ].

Что касается сравнительной эффективности пробиотических препаратов и продуктов функционального питания с пробиотичекой микрофлорой, то в настоящее время нет полных достоверных сравнительных данных в идентичных условиях (включающих те же микроорганизмы, пребиотики и широкую популяцию подопытных). Однако современные исследования показывают, что пробиотические микроорганизмы сертифицированных БП, часто гибнут (табл. 1.7.), не преодолевая естественные барьеры желудочно-кишечного тракта [7, 8, 9]. До толстой кишки доходит лишь десятитысячная доля процента от их исходной численности. Те же остаточные количества пробиотических микроорганизмов, которые достигли толстой кишки в жизнеспособном состоянии, часто являются чужеродными для естественной микрофлоры, не приживаются в биопленке кишечника и отторгаются, оказывая негативное воздействие на иммунную систему и макроорганизм в целом.

Отмечается [1], что пробиотики теоретически могут вызывать 4 типа нежелательных лекарственных реакций:

1. Системные инфекции.

2. Негативное влияние на метаболизм.

3. Чрезмерную стимуляцию иммунной системы у чувствительных лиц.

4. Перенос генов резистентности.

Таким образом, проблема использования пробиотиков зависит не только от их доказанной клинической эффективности, так и от безопасности для конкретного потребителя.

Таблица 1.7 – Выживаемость пробиотических микроорганизмов в модельных средах и условиях, имитирующих процесс пищеварения у человека * [7]

№	Название препарата	Предприятие, страна изготовления	Форма выпуска	Видовой состав микроорганизмов и их содержание в единице формы (дозе)	Содержание бактерий в пробе на конец опыта, КОЕ /мл
	Ацилакт	ЗАО «Фирма Витафарма», Россия	Таблетки	B.bifidum №1 100 аш, L. acidophilus NK,, L. acidophilus K5Ш24, 1 ∙10^7 бактерий	(1,8±0,5)·10^3
	Аципол	ЗАО «Фармацевтическая фирма «ЛЕККО»», Россия	Капсулы	Lactobacillus sp., 1 ∙10^7 бактерий	(1,2±0,3)·10^3
	Бактисуптил	ЗАО «Фарми Фирма «Сотекс»», Россия	Капсулы	B.cereus IP 5832, 35 мг субстанции, без указания содержания микроорганизмов	(1,6±0,4)·10^8
Окончание таблицы 1.7.
	Биоспорин	Филиал ФГУ ЦНИИ МЩ РФ ЦВТП БЗ, Россия	Таблетки	B.cereus 3, B.lichenitornus 31, 1 ∙10^9 бактерий	(1,4±0,3)·10^7
	Бифидумбактерин	ФГУП НПО «Микроген», Россия	Таблетки	B.bifidum №1 или № 791, 1 ∙10^7 бактерий	(2,6±0,3)·10^2
	Бифидумбактерин форте	ЗАО «Партнер», Россия	Порошок	B.bifidum №1, в пакете 1 ∙10^7 бактерий	(1,5±0,4)·10^3
	Бифилиз	ООО «Фирма «Фермент»», Россия	Таблетка	B.bifidum №1, 1 ∙10^7 бактерий	(1,6±0,5)·10^5
	Бификол	ФГУП НПО «Микроген», Россия	Порошок	B.bifidum №1, E.coli, в дозе 1 ∙10^7 бактерий	(1,6±0,2)·10^3
	Бифистам лакто	ОАО «Биомед» им. И.И. Мечникова, Россия	Порошок	L. acidophilus, B.bifidum, B.longum, в 2 г порошка 1 ∙10^7 бактерий	(1,8±0,3)·10^3
	Бифиформ	«Ферросан А/С», Дания	Капсулы	B.longum, E.faccium, 4 ∙10^7 бактерий	(1,5±0,2)·10^3
	Бифиформ (комплекс)	«Ферросан А/С», Дания	Таблетки	Bifidobacterium BB^IM, 1 ∙10^9 КОЕ, L.rhamnosus GG, 1 ∙10^9 КОЕ, L. acidophilus, 2 ∙10^8 бактерий	(6,5±0,5)·10^4
	Бифолак	«Бифодан А/С», Дания	Капсулы	L.rhamnosus, L.longum без указания количественного содержания	(4,6±0,7)·10^4
	Колибактерин	ОАО «Биомед» им. И.И. Мечникова, Россия	Порошок	E.coli М17, в дозе 1 ∙10^9 бактерий	(1,0±0,3)·10^2
	Лактобактерин	ФГУП НПО «Микроген», Россия	Порошок	L.plantarum 8P-A3 (возможны L.plantarum 38, L.fermentum 90T-C4, L.fermentum 39), в дозе 2 ∙10^9 бактерий	(2,1±0,5)·10^3
	Линекс	Лек g.g., Словения	Порошок, капсулы	L. acidophilus, B.infantis, E. faecium, в капсуле 280 мг,в 1 г порошка по 300 мг каждого из микроорганизмов	(4,0±0,3)·10^3
	Нарине	ООО «НАРЕКС», респеблика Армения	Капсулы	L. acidophilus n.v.Ep 317/402, 100 мг лиофилизированной культуры	(3,8±0,5)·10^3
	Нормобакт (пробиотик + пребиотик)	Chr.Hansen А/С, Дания, Медана Фарма А.О., Польша	Капсулы	L. acidophilus La-5, Bifidobacterium BB-12, 1 ∙10^7 бактерий + фруктозоолигосахариды	(3,1±0,7)·10^4
	Биокомплекс «Нормофлорин-Б1»	ООО «Бифилюкс+», Россия	Супензия	B.bifidum, B.longum, 1 ∙10^10 бактерий	(1,7±0,5)·10^3
	Биокомплекс «Нормофлорин-Д»	ООО «Бифилюкс+», Россия	Суспензия	L.cacei, B.longum, B.bifidum, 1 ∙10^8 бактерий	(1,5±0,3)·10^4
	Биокомплекс «Нормофлорин-Л»	ООО «Бифилюкс+», Россия	Порошок	L. acidophilus, 1 ∙10^9 бактерий	(1,4±0,5)·10^4
	Примадофилус	Нейчере Вэй Продакте. Инк., США	Капсулы	B.breve, B.longum, L. acidophilus, L.rhamnosus, 3,9 ∙10^9 бактерий	(2,0±0,4)·10^3
	Пробифор	ЗАО «Партнер», Россия	Порошок	B.bifidum № 1, в пакете 5 ∙10^8 бактерий	(1,8±0,4)·10^3
	Споробактерин	ООО «Бакорен», Росcия	Суспензия	B.subtilis 534, в 1 мл 1 ∙10^9КОЕ	(1,8±0,3)·10^8

* Выращивание пробиотических микроорганизмов проводили на плотных питательных средах рекомендованного состава [Иванов А.П.,Лихачева А.Ю.,1992] in vitro, с имитацией процесса пищеварения у человека.

Таким образом, предрасполагающими факторами возникновения нежелательных реакций при применении пробиотиков являются:

- недостаточная клиническая доказанность пробиотического эффекта конкретного штамма;

- выраженная иммуносупрессия, предшествующая длительная госпитализация, хирургическое вмешательство, тяжелые основные заболевания.

Согласно современным представлениям, к кисломолочным пробиотическим продуктам могут быть отнесены только те продукты, в которых содержание пробиотических штаммов микроорганизмов находится в достаточном количестве (не менее 10⁸ колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл на протяжении всего срока годности); которые способны оставаться активными при прохождении через желудочно-кишечный тракт (ЖКТ) человека, сохранять свои положительные свойства в течение всего срока хранения продукта; положительное влияние пробиотических бактерий на организм должно быть клинически доказано не только для пробиотического штамма, но и для готового продукта.

Литература

1. Андреева И.В. Зависимость эффекта от конкретного штамма пробиотического микроорганизма. 2012: Режим доступа: http://www.antibiotic.ru/modules.php?op=modload&name, свободный

2. Cangemi R, Santos V et al. Protective effect of intranasally inoculated Lactobacillus fermentum against Streptococcus pneumoniae challenge on the mouse respiratory tract// FEMS Immunol Med Microbiol, 31(3): 187-95, Oct 2001

3. Бондаренко В.М., Воробьев А.А. Дисбиозы и препараты с пробиотической функцией. Журн. микробиол. 2004. № 1.С. 84-92.

4. Глушанова Н.А., Блинов А.И. Биосовместимость пробиотических и резидентных лактобацилл // Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. — 2005. — № 1–2. — С. 31

5.Андреева И.В. Зависимость эффекта от конкретного штамма пробиотического микроорганизма. 2012: Режим доступа: http://www.antibiotic.ru/modules.php?op=modload&name, свободный

6. Makino S., Ikegami S., Kume A., Horiuchi H., Sasaki H., Orii N. Reducing the risk of infection in the elderly by dietary intake of yoghurt fermented with Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus OLL1073 R-1 // Br J Nutr. 2010; 104 (7): 998-10-06.

7. Дармов И.В., Чичерин И.Ю., Погорельский И.П., Лундовских И.А. Выживаемость микроорганизмов пробиотиков в условиях in vitro, имитирующих процесс пищеварения у человека / Кишечная микрофлора: взгляд изнутри. - 2012, с.3-7

8. Дармов И.В., Чичерин И.Ю., Погорельский И.П., Лундовских И.А., Дурнев Е.А. Выживаемость микроорганизмов пробиотиков в желудочно-кишечном тракте экспериментальных животных/ Кишечная микрофлора: взгляд изнутри. - 2012, с.30-34

9. Копча В.С. Пробиотики: размышления с позиции их качества, эффективности, антибиотикорезистентности и безовасности// Новости медицины и фармации, 2010, № 20 (346) – Режим доступа: http://novosti.mif-ua.com/archive/issue-14804/article-14831/свободный

Дата добавления: 2015-08-27