Определение витаминов в биологически-активных веществах и фармацевтических препаратах методом тонкослойной хроматографии

Для анализа использовали драже «Ревит». Этот комплексный препарат содержит 4 витамина (витамины А, В₁, В₂ и С) и вспомогательные вещества. Две таблетки препарата истирали в ступке до порошкообразного состояния. Добавляли 2 мл смеси тетрахлорметан – эфир (4:1), затем 2 мл воды. Экстракцию проводили при энергичном встряхивании раствора. При этом жирорастворимый витамин (витамин А) экстрагировался в органическую фазу.

Элюирующие системы: готовили путем смешивания растворов в указанном соотношении непосредственно перед использованием. Задействовали 2 системы: н-бутанол – ледяная уксусная кислота – вода (4:1:1) и (60:15:25), а также систему вода – этанол (20:120). Время насыщения хроматографической камеры парами элюента- 20 мин.

Для определения витамина В₁ хроматографическую пластинку опрыскивали следующим раствором: 1,5 мл 1% водного раствора гексацианоферрата (III) калия, 20 мл дистиллированной воды, 10 мл 15% раствора NaOH. Высушенные пластинки помещали в хроматографический облучатель УФС-254-365 и просматривали в длинноволновом УФ свете (365 нм). Наблюдали ярко-голубую флюоресценцию. Детектирование витамина В₂ и витамина А проводили по собственной флуоресценции в УФ-свете (ярко-желтое пятно при 365нм). Обнаружение витамина С проводили, инкубируя пластинку в камере с I₂. В качестве стандартов для определения витаминов использовали: аскорбиновую кислоту, раствор препарата «Аевит» и тиамин-хлорид для инъекций[2].

Рисунок 19: Хроматограмма драже «Ревит» в системе бутанол – ледяная уксусная кислота – вода (4:1:1), детекция в УФ-свете (λ=365 нм): 1 – раствор витамина С (стандарт);2 – водная фаза, 5мкл; 3 – водная фаза,10 мкл; 4 – органическая фаза; 5 – «Ревит» (стандарт)

Дата добавления: 2015-08-17