Исследование активности ферментов плазмы крови, характеризующих печеночный обмен.

При заболеваниях паренхимы в крови резко увеличен уровень органо-специфического фермента – фруктозо-1-фосфат альдолазы, а также возрастает активность АлАТ и в меньшей степени АсАТ. Увеличена активность ЛДГ5, резко снижена активность холинэстеразы.

При незначительных поражениях гепатоцитов: в плазме крови увеличивается активность цитоплазматических ферментов печени (АлАТ, АсАТ, сорбитолдегидрогеназы, g-глутамилтранспептидазы).

При сильном поражении гепатоцитов повышается активность митохондриальных ферментов: глутамилдегидрогеназы, митохондриальной АсАТ.

При механической желтухе в крови возрастает щелочная фосфатаза и лейцинаминопептидаза.

При длительном декомпенсированном поражении снижается активность холинэстеразы, ЛХАТ, содержание факторов свертывания крови и общее содержание белков крови.

56. Метаболизм этанола осуществляется тремя ферментативными системами: 1) алкогольдегидрогеназной (80%) 2) микросомальной этанолокисляющей системой (МЭОС – 15%) 3) каталазой (5%).

1) Алкогольдегидрогеназа наиболее активно метаболизирует этанол в печени, преимущественна локализована в цитозоле клеток (только 10% - в ЭПС и митохондриях). Катализирует реакцию образования ацетальдегида: этанол + НАД⁺ ® ацетальдегид + НАДН+Н⁺.

2) МЭОС катализирует реакцию: этанол + НАДФН+Н⁺ + О₂ ® ацетальдегид + 2 Н₂О.

3) каталаза катализирует реакцию: этанол + Н₂О₂ ® ацетальдегид + 2 Н₂О.

Образующийся ацетальдегид далее окисляется ацетальдегиддегидрогеназой в уксусную кислоту, которая превращается в ацетил-КоА и 1) вступает в ЦТК или 2) идет на синтез ВЖК и холестерола. В сутки в тканях человека образуется и окисляется 1-9 г этанола.

Механизм развития жировой инфильтрации и дегенерации печени: избыточное потребление этанола ® увеличение содержания в гепатоцитах ВЖК и холестерола ® в печени происходит интенсивные распад и синтез фосфолипидов из компонентов нейтрального жира, однако для данного процесса необходимы неорганические фосфаты и так называемые липотропные факторы (холин) ® липотропные факторы не поступают или поступают в малом количестве ® накопление нейтральных жиров в гепатоцитах ® жировая инфильтрация печени и ее дегенерация.

57. Компоненты системы микросомального окисления (монооксигеназного пути окисления):

1) неполярный окисляемый субстрат

2) кислород

3) дополнительный субстрат (косубстрат) – донор водорода НАДФН+Н⁺.

4) флавопротеин

5) цитохром P₄₅₀ – связывает субстрат окисления и активирует молекулярный кислород.

58. Бикарбонатная буферная система крови – наиболее важный буфер организма (10% буферной емкости крови). Поддерживаемая рН ~ 7,40. Компоненты: Н₂СО₃/NaHCO₃.

Механизм действия:

1) Н⁺ + HCО₃^- ® Н₂СО₃ (слабо диссоциирующая). Последующее снижение концентрации угольной кислоты достигается в результате гипервентиляции легких и ускоренном выведении СО₂.

2) OH^- + H₂CO₃ ® H₂O + HCО₃^-. При этом реализуется гиповентиляция легких для сохранения в плазме СО₂и ускоренном выведении СО2.необходимы неорганические фосфаты и хондриальной АсАТ

Гемоглобиновая и оксигемоглобиновая буферные системы крови – самые мощные в организме (более 75 всей буферной емкости крови), функционирует только в сочетании с гидрокарбонатной. Компоненты: KHb/HHb (гемоглобиновая буферная система), KHbO₂/HHbO₂ (оксигемоглобиновая буферная система).

Механизм действия:

HbO₂^- + Н⁺ «ННbO₂® ННb + O₂

HHbO₂ + OH^- «HbO₂^- + H₂O

HHb + OH^- «Hb^- + H₂O

Hb^- + H⁺ ® HHb

Бикарбонатная и гемоглобиновая система взаимосвязаны между собой: КНb + Н₂СО₃ ® KHCO₃ + HHb

59. Фосфатная буферная система крови – буферная емкость ~ 1% буферной емкости крови, однако является одной из самых основных в тканях. Компоненты в клетках: KH₂PO₄/K₂HPO₄. Поддерживаемая рН ~ 7,2. Механизм: H₂PO₄^- (донор протонов) «H⁺ + HPO₄^2-(акцептор протонов)

Белковые буферные системы – поддерживают рН в пределах 7,2-7,4. Амфолитные, т.е. имеют и кислотные (карбоксильные), и основные (амино-) группы в молекуле.

Механизм действия белковых буферных систем:

кислотная буферная система:	основная буферная система
^+H3N-R-COOH + OH^- «^+H3N-R-COO^- + H2O ^+H3N-R-COO^- + H^+ «^+H3N-R-COOH	H2N-R-COO^- + H^+ «^+H3N-R-COO^- ^+H3N-R-COO^- + OH^- «H2N-R-COO^-+ H2O

60. Структура гемоглобина: 4 молекулы небелкового компонента – гема (тетрапиррольное кольцо из четырех пиррольных колец, соединенных между собой метиновыми мостиками (-СН=) - система протопорфирина IX + не изменяющее валентность Fe²⁺) и белковый компонент – глобин (4 белковые субъединицы: 2α- и 2β-субъединицы). Каждая молекула гема обернута полипептидной цепью

Физиологические Hb: а) Нb A1 (2α- и 2β- цепи) – 90-95% б) Hb A2 (2α- и 2s-цепи) – 2,5% в) HbF (2α- и 2g-цепи) – 1,5% у взрослого, 80% у новорожденного.

Аномальные гемоглобины – до 150 типов, возникают в результате мутации генов, кодирующих синтез глобинов, чаще в результате замены АК в α- или β-цепи: HbC, HbDα, HbD_β, HbE, HbG, HbI, HbO, HbS (cерповидноклеточной анемии), HbH (все цепи нормальные, но состоит из четырех β- цепей). Наличие аномальных гемоглобинов обуславливает различные гемоглобинопатии.

Производные гемоглобина: физиологически нормальные а) оксигемоглобин (HbO₂ без изменения валентности Fe) б) карбоHb (HbCO₂) и патологические в) метHb (возникает при воздействии сильных окислителей на ион Fe²⁺, который становится трехвалентным Fe³⁺ и не может переносить кислород) г) карбоксиHb (HbCO – возникает при отравлении человека угарным газом).

61. Г ипоксия – кислородное голодание – состояние, возникающее при недостаточном снабжении тканей организма кислородом или нарушении его утилизации в процессе биологического окисления.

I. Гипоксия вследствие понижения PО₂ во вдыхаемом воздухе (экзогенная гипоксия) – возникает а) при подъеме на высоту б) при авариях в шахтах, неполадках на подводных лодках и т.п. Характеризуется развитием гипоксемии – уменьшением PО₂ в артериальной крови и снижением насыщения гемоглобина кислородом.

II.Гипоксия при патологических процессах, нарушающих снабжение тканей кислородом при нормальном его содержании в окружающей среде.

а) дыхательный (легочной) тип – из-за альвеолярной гиповентиляции вследствие а) обструкции дыхательных путей (воспаление, отек, спазм) б) уменьшения дыхательной поверхности легких (отек легкого, пневмония). Часто к гипоксии присоединяется гиперкапния.

б) сердечно-сосудистый (циркуляторный) тип – при нарушения кровообращения, приводящего к недостаточному кровоснабжению органов и тканей.

в) кровяной (гемический) тип – в результате уменьшения кислородной емкости крови 1) при анемиях из-за а) уменьшения эритроцитов б) снижения содержания Hb в эритроцитах 2) при отравлениях угарным газом 3) при действии на Hb сильных окислителей (образование метгемоглобина)

г) тканевой (гистотоксический) тип – из-за нарушения способности ткани поглощать кислород из крови из-за 1) угнетения биологического окисления ингибиторами типа цианида, блокирующего цитохромоксидазу 2) нарушения синтеза ферментов 3) повреждения мембранных структур клетки.

62. Механизмы транспорта углекислого газа кровью.

а) часть СО₂ переносится в физически растворенном виде (~ 6-7% всего СО₂)

б) в карбаминовой форме (СО₂, присоединенный к гемоглобину посредством карбаминовой связи) (~ 3-10% всего СО₂)

3) в форме бикарбоната (более 80% всего СО₂):

1. KHbO₂ ® O₂ + KHb (в периферических капиллярах большого круга кровообращения, кислород поступает при этом в ткани из эритроцитов).

2. В обмен на кислород из тканей в эритроцит поступает СО₂. В эритроците: СО₂ + H₂O ® H₂CO₃ (под действием карбоангидразы), КHb + H₂CO₃ ® K⁺ + HCO₃^- + HHb.

3. Гидрокарбонат ионы выходят из эритроцитов в плазму, взамен в эритроцит поступают анионы хлора, для которых проницаема мембрана эритроцита. Для катионов натрия мембрана эритроцита не проницаема, они остаются в плазме и повышают содержание в ней NaHCO₃ (восстанавливает щелочной резерв крови).

4. В легочных капиллярах: НHb + О₂ ® HHbО₂, HHbО₂ + K⁺ + HCO₃^-® KHbO₂ + H₂CO₃.

5. H₂CO₃ ® СО₂ + H₂O (под действием карбоангидразы). Углекислый газ диффундирует при этом в легкие.

6. Т.к. в эритроцитах снижается концентрация гидрокарбонат ионов, в них из плазмы поступают новые порции гидрокарбонат ионов, а в плазму выходят хлорид ионы.

63. Индикаторные ферменты крови и их диагностическое значение:

Фермент	Орган	Заболевание
АлАТ	печень, скелетные мышцы	паренхиматозные заболевания
АсАТ	печень, скелетные мышцы, сердце, почки, эритроциты	ИМ, паренхиматозные заболевания печени, мышц
Альдолаза	скелетные мышцы, сердце	болезни мышц
Кислая фосфатаза	предстательная железа, эритроциты	рак предстательной железы
Щелочная фосфатаза	печень, костная ткань, слизистые оболочки, плацента, почки	заболевания костной ткани, печени
Амилаза	слюнные железы, поджелудочная железа, яичники (активность повышена на высоте острого панкреатита)	заболевания поджелудочной железы
Холинэстераза	печень	отравление фосфорорганическими инсекцидами, болезни печени
Креатинкиназа	скелетные мышцы, ГМК, мозг, сердце	ИМ, заболевания мышц
ГлутаматДГ	печень (митохондрии) (свидетельствует о глубоком поражении клеток)	паренхиматозные заболевания печени
g-глутаматтраспептидаза	печень, почки (­ при холестазе)	заболевания печени, алкоголизм
лактатДГ	сердце, печень, скелетные мышцы, эритроциты, л.у.	ИМ, гемолиз, паренхиматозные заболевания печени

64. Гемостаз – все процессы, направленные на сохранение крови в кровеносном русле, препятствующие кровоточивости и обусловливающие восстановление кровотока в случае обтурации сосуда тромбом.

Механизмы гемостаза: а) сосудисто-тромбоцитарный (микроциркуляторный, первичный, клеточный) б) коагуляционный (макроциркуляторный, плазменно-тромбоцитарный, вторичный).

Основные структурно-функциональные компоненты гемостаза: 1) стенка кровеносного сосуда 2) клетки крови (преимущественно тромбоциты, также эритроциты, лейкоциты) 3) система свертывания крови.

65. Функциональные звенья системы свертывания крови и их биологическая роль:

а) свертывающая (гемокоагуляционная) система – препятствует кровоточивости и потере крови путем образования нерастворимого фибрина.

б) противосвертывающая (антитромботическая) система: антикоагулянтная и фибринолитическая – поддерживают жидкое состояние циркулирующей крови, обуславливают восстановление кровотока в случае закупорки сосуда тромбом.

66. Свертывающая система крови – процессы, направленные на образование в сосуде нерастворимого фибрина, препятствующего потере крови в случае его повреждения.

Компоненты ССК:

а) плазменные ферментные факторы гемокоагуляции (факторы I-XIII, высокомолекулярный кининоген, прекалликреин) – преимущественно сериновые протеазы, секретируются в кровь из гепатоцитов в виде прокоагулянтов, осуществляют активацию свертывания крови по механизму частичного протеолиза.

б) плазменные не ферментные факторы гемокоагуляции (ф. Va и VIIIа).

в) коагуляционные тромбоцитарные факторы (Р1-Р11) – образуются тромбоцитами, участвуют в гемокоагуляции.

г) ионы Са²⁺ - 1) активируют некоторые факторы свертывания крови 2) связывают на тромбопластинах витамин К-зависимые факторы свертывания крови (ф. II, VII, IX, X) 3) стабилизируют структуру тромбопластина.

д) надмолекулярные структуры – сосудистая стенка (стимулятор и регулятор свертывания)

67. Гемокоагуляция – цепной каскадный ферментативный процесс, в ходе которого происходит взаимодействие и последовательная активация ряда сериновых протеаз на фосфолипидных матрицах (тромбопластинах), заканчивающаяся превращением растворимого фибриногена в нерастворимый фибрин.

Биологический смысл каскадного механизма гемокоагуляции: многоэтапный биохимический каскад обуславливает значительное усиление сигнала, инициирующего свертывание крови.

Фазы гемокоагуляции:

1) 1-ая фаза – образование протромбиназы (активного тромбопластина крови): 4 мин 50 с – 6 мин 50 с.

2) 2-ая фаза – образование тромбина: 2-5 с.

3) 3-ая фаза - образование фибрина: 2-5 с.

4) 4-ая фаза, посткоагуляционная, - ретракция, т.е. образование гемостатически полноценного сгустка: 55-85 мин.

68. См. в. 67. Время свертывания крови по Ли-Уайту 5-7 мин.

69. Каскад реакций гемокоагуляции происходит на фосфолипидных микромембранах (фосфолипидных матрицах), источником которых служат:

а) фрагменты плазматических мембран активированных тромбоцитов (P3), эритроцитов (эритропластин) и др. клеток

б) фосфолипидный компонент тканевого тромбопластина (ф. III – содержит белок апо B III)

70. Отличия внешнего и внутреннего механизма гемокоагуляции:

1) внешний механизм – тромбопластин приходит извне из поврежденных тканей, внутренний механизм – все необходимые факторы, в том числе и тромбопластин, находятся в кровеносном русле

2) внутренний механизм – более медленный процесс, чем внешний

3) внутренний механизм включает большее число факторов свертывания, чем внешний.

Общие этапы: начиная со 2-ого (образование тромбина).

71,72. Внешний механизм свертывания крови запускается при 1) появлении в кровотоке обломков клеточных мембран в результате травмы 2) продукции тканевого тромбопластина эндотелиоцитами при стазе крови, гипоксии, ацидозе, действии на эндотелий протеиназ и токсинов.

73, 74, 75,76,77, 78, 79, 80, 81. Внутренний механизм свертывания крови запускается а) контактом крови с измененной или чужеродной поверхностью, по смачиваемости отличной от эндотелия (поврежденная стенка сосудов или измененная вследствие васкулитов, атеросклероза, интоксикации) б) иммунными комплексами, адреналином, жирными кислотами, холестеролом, бактериальными липопротеинами.

82. У людей с наследственной недостаточностью фактора Хагемана кровь не сворачивается в пробирке, т.к. при этом выключается внутренний механизм гемокоагуляции. В организме больного кровь сворачивается по внешнему пути.

83. Роль тромбоцитов в процессе гемокоагуляции:

1) участвуют, как и другие клетки крови, в образовании первичного клеточного тромба

2) участвуют в активации гемокоагуляции (создают поверхность для взаимодействия и активирования факторов свертывания крови)

3) защищают факторы свертывания от разрушения ингибиторами плазмы

4) выделяют факторы, активирующие процесс тромбообразования

84. Концентрация фибриногена в крови: 2,0-4,0 г/л. Схема превращения фибриногена в фибрин:

фибриноген (А₂α₂В₂β₂g₂) ®фибринопептиды А и В + фибрин-мономер (α₂β₂g₂) (под действием тромбина) ® растворимые фибрин-мономерные комплексы® фибрин S (нестабилизированный фибрин-полимер) ® фибрин I (стабилизированный фибрин-полимер) (под действием фибринстабилизирующего фактора ф. XIII).

Растворимый, или нестабилизированный полимер фибрина (фибрин S) – распадается в кислой среде и в растворе мочевины, легко расщепляется протеиназами. Нерастворимый, или стабилизированный, фибрин (фибрин I) – резистентный к протеазам, более эластичный и прочный.

85. См. в. 66. Содержание ионов кальция в крови: общее количество 2,0-2,5 ммоль/л, ионизированного кальция: 1,0-1,3 ммоль/л.

86. Витамин К – по структуре схож с витамином E, имеет хиноновое кольцо и изопреновый радикал. Разновидности витамина K: вит. К1 (филлохинон) и вит. К2 (менахинон-6). Источники: смешанная пища (особенно зеленые растения) и кишечная микрофлора.

Роль витамина К в гемокоагуляции (работает в составе g-глутамилкарбоксилазы):

а) антигеморрагический фактор – пострансляционное созревание факторов II, VII, IX, X

б) участвует в созревании витамин К-зависимых антикоагулянтов (протеинов C и S)

87. Антикоагулянтная система – ряд ингибиторов свертывания, осуществляющий контроль скорости активирования факторов и реакций между ними. Физиологические антикоагулянты:

а) первичные – постоянно синтезируются в организме и с постоянной скоростью выделяются в кровоток, взаимодействуют только с активными факторами коагуляции, нейтрализуя их (антитромбин III, гепарин, α₂-макроглобулин, протеины С и S, ЛАКИ и др).

б) вторичные – образуются из факторов свертывания и других белков в процессе свертывания крови, фибринолиза и активации других протеолитических систем (антитромбин I, метафактор Va, метафактор XIа, продукты фибринолиза, продукты деградации фибриногена)

88, 89. Наиболее значимые естественные антикоагулянты:

а) антитромбин III – необратимо ингибирует большинство сериновых протеаз свертывающей системы (ф. IIa, IXa, Xa, XIa, XIIa), основной плазменный кофактор гепарина, особенно ингибирует тромбин.

б) гепарин – в 1000 раз повышает активность антитромбина III.

в) протеины C и S – разрушают факторы ф.Va, VIIIa и ингибируют образование фактора Xa и тромбина.

г) α₂-макроглобулин – препятствует действию тромбина на фибриноген

д) ЛАКИ – ингибирует внешний механизм свертывания, связываясь с факторами VIIa и Xa.

90. Гепарин – активирует антитромбин III, повышая его активность в 1000 раз, а АТ III препятствует сворачиванию крови, ингибируя большинство факторов свертывания. Также гепарин самостоятельно способен ингибировать ряд протеиназ.

91. Дикумарол – антагонист витамина К, он ингибирует восстановление хиноновых производных витамина К в активные гидрохиноновые формы, препятствуя созреванию вит. К-зависимых факторов системы свертывания, что сопровождается выключением плазменных факторов VII, IX, X, II из процесса коагуляции крови. Свертывание крови в пробирке сохраняется при добавлении в нее дикумарола, т.к. дикумарол оказывает эффект не сразу, а спустя несколько часов или дней, действуя продолжительно.

92. Участники плазминовой системы:

а) плазмин и его профермент – плазминоген

б) активаторы плазминогена (тканевой активатор плазминогена, урокиназа)

в) проактиваторы плазминогена

г) ингибиторы плазмина (α₂-антиплазмин, α₂-макроглобулин, α₁-антитрипсин)

д) ингибиторы активаторов плазминогена (ПАИ-1, ПАИ-2, ПАИ-3, ПАИ-4).

93. Плазминовая система:

94. Активаторы плазминогена и их происхождение:

а) фактор Хагемана, прекалликреин, высокомолекулярный кининоген – белки крови

б) стрептокиназа – продуцируется β-гемолитическими стрептококками

в) урокиназа – продуцируется почечной тканью и эпителием мочевыводящих путей

г) тканевой активатор плазминогена – синтезируется эндотелием сосудов

д) кровяные активаторы плазминогена – содержатся в клетках крови (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты)

95. Физиологические ингибиторы плазмина: α2-антиплазмин, α₂-макроглобулин, α₁-антитрипсин, антитромбин III, С1-инактиватор, интер-α₂-антитрипсин.

96. Комплексные соединения гепарина, возникающие в крови при активации противосвертывающей системы, обратимы и диссоциируют, свободный гепарин образует комплекс с АТIII и усиливает его активность (до 1000 раз) ® ингибирование тромбина и других сериновых протеиназ ® препятствие свертыванию крови.

97. Нарушения в системе гемостаза могут привести к: 1) геморрагиям (кровотечениям) 2) тромбозам и тромбоэмболиям 3) тромбогеморрагическому синдрому (ДВС-синдрому)

Дата добавления: 2015-07-20