Классификация ферментов

Билет 1

1)определение ферментам.Ферменты – высокоспец. Белки которые ускоряют хим. реакции в организме.

Альфа Амилаза учасивует при гидролизе крахмала и гликогена

Сахараза при гидролизе сахарозы

Каталаза – катализирует расщепление перекиси водорода и препятствует их накоплении в организме.

2)график от скорости.

С повышением t до определенного уровня (оптимум) скорость хим. Реакции увеличивается. Дальнейшие увеличение t приводит к денатурации фермента и тем самым скорость хим реакции уменьшиться.

3)

Кофермент Q жирораастворимый хинон.

Ф-ия перенос электронов между комплексами 1è3 3è4

Класс флавинзависимая дегидрогеназа.

4)Альфа амилазы слюны относит к гидрогеназам.

Спец.субстратам для амилазы является полисахариды (крахмал,гликоген).При гидролизе крахмала с амилазой слюны образ. несколько промежуточных продуктов,а конечные продукты как мальтоза и глюкоза дают пробу Троммера.

А сахароза в гидрорлизе с амилазой,конечные продукты не дают пробу Троммера.Поэтому с помощью пробы Троммера можно выявить произошел ли гидролиз сахарозы.В нашем случае нет.И тем самым можно сказать,что сахароза не является спец.субстратов для амилазы.

5) НАДН + Н + Q ===è HAД + QH2

Н +2е

3+ комплекс 3 + 2+

QH2 + 2e (Fe) =====è Q +2 H +2 e (Fe)

2+ комплекс 4 3+ 4-

4 e (Fe) +Q ==è 4e (Fe) + О2

_ цитохром

_ оксидаза

О2 + 4 е +4 Н ====è 2 H2O

Комплекс 1 НАДН дегидрогеназа Ф-ует QH2 редуктаза

Комплекс 3 Цитохромы в и с1 Ф-ует QH2 дегидрогеназа

Комплекс 4 Цитохромы а и а3 Ф-ует цитохромоксидаза

Комплекс 2 Сукцинатдегидрогеназа.

Пункты сопряжения.

Комплекс1 комплекс 3 комплекс 4

ФМН FeS цит б FeS цит с3 цит а цит а3

АДФ + Рè АТФ АДФ + Рè АТФ АДФ + Рè АТФ

Местосопряжения 1 Местосопряжения2 Местосопряжения3

Билет 2

1)Отличие: Ферменты обладают высокой специфичностью.

-ферментативная реакция происходит при t 37 постоянном атмосферным давлением и физиологическом значении.

-Скорость фермент. ре-ции выше чем у неорганических катализаторов.

Особенности при t инактивируется.

- при гидролизе распад на АК как и белки.

- Синтез из АК по ген.коду искусственных белков,обладающих каталитическими свойствами,присущими натуральным ферментам.

Скорость реакции зависит от t pH среды.

Скорость реакции ферментов опред изменением кол-ва субстрата или продукта за ед.времени.

Скорость ферментативной реакции зависит от каталитической активности фермента.

2) Зависимость V от кол. фермента.

3)НАДН (измен в бенз. Кольцо) в книге есть.(308)

Функционирует как КоQ редуктаза

Способность промежуточного переносчика ионов водорода (Н) за счет амидоникотиновый кислоты,(происходит обратимое гидрирование.)

4)Заболевание диагностируется по изменению активности ферментов.

Синдром Катахара- недостаток или отсутствие каталазы.

Хронический панкреатит-снижение ур-ня панкреатической липазы.

Рахит-повышение щелочной фосфатазы.

Заболевание моче выдел.системы (уреаза)

5)Биологическое Окис.- распад органических веществ в живых тканях сопровождающая потреблением кислорода и выделением СО2 и Н2О и образ биологических видов энергии.

-В живой природе протекает при низкой t и с участием воды.

-Окисляется глюкоза в живых клетках (внутренний мембране митохондрии) и основная функция энергетическое обеспечение метоболизма.

-окислительное фосфолирование -один из важнейших компонентов клеточного дыхания, приводящего к получению энергии в виде АТФ из АДФ с Н3РО4.

+ комплекс 1 +

НАДН + Н + Q ===è HAД + QH2

Н +2е

3+ комплекс 3 + 2+

QH2 + 2e (Fe) =====è Q +2 H +2 e (Fe)

_ 2+ комплекс 4 _ 3+ 4-

4 e (Fe) +Q ==è 4e (Fe) + О2

_ цитохром

_ оксидаза

О2 + 4 е +4 Н ====è 2 H2O

Комплекс 1 НАДН дегидрогеназа Ф-ует QH2 редуктаза

Комплекс 3 Цитохромы в и с1 Ф-ует QH2 дегидрогеназа

Комплекс 4 Цитохромы а и а3 Ф-ует цитохромоксидаза

Комплекс 2 Сукцинатдегидрогеназа.

Билет№3

Классификация ферментов

1. Оксидоредуктазы, катализирующие окислительно-восстанови-

тельные реакции: аэробные и анаэробные дегидрогеназы, цитохромы, каталаза и пероксидаза;

2. Трансферазы, катализирующие реакции межмолекулярного переноса

различных химических групп и остатков: метил- и формилтрансферазы, ацетилтрансферазы, амино-, фосфотрансферазы.

3. Гидролазы, катализирующие реакции гидролиза внутри-

молекулярных связей:эстеразы, гликозидазы, фосфатазы и пептидогидролазы.

4. Лиазы (синтазы), катализирующие расщепление или образование

связи без участия окисления или гидролиза: фумарат-гидратаза, карбокси-лиазы, амидин-лиазы.

5. Изомеразы, катализирующие реакции изомеризации:рацемазы,эпимеразывнутримол-ные оксидоредуктазы и трансеразы.

6. Лигазы (синтетазы), катализирующие реакции присоединения,

сопряженные с разрывом макроэргической связи в АТФ или ГТФ, ЦТФ, УТФ,

ТТФ:L-глутамат, аммиак лигаза.

Амилаза и сахараза – класс гидролаз,

2)ФАДН2:

FAD — флавинадениндинуклеотид — кофермент, принимающий участие во многих окислительно-восстановительных биохимических процессах. FAD существует в двух формах — окисленной и восстановленной, его биохимическая функция, как правило, заключается в переходе между этими формами. FAD может быть восстановлен до FADH2, при этом он принимает два атома водорода. Молекула FADH2 является переносчиком энергии и восстановленный кофермент может быть использован как субстрат в реакции окислительного фосфорилирования в митохондрии.

3) График зависимости скорости от рН:

При постоянной температуре любой фермент, как правило, работает наиболее эффективно в узких пределах рН. Оптимальным считается то значение рН, при котором реакция протекает с максимальной скоростью.

При более высоких и более низких рН активность фермента снижается. С понижением рН возрастает кислотность и увеличивается концентрация Н⁺-ионов.

Увеличивается, следовательно, количество положительных зарядов в среде. Сдвиг рН меняет заряд ионизированных кислотных и основных групп, что ведет к разрушению ионных связей, участвующих в поддержании специфичной формы молекул фермента. В результате изменяется форма молекул фермента и в первую очередь форма его активного центра. При слишком резких сдвигах рН фермент денатурирует.

4)Метод определения активности альфа-амилазы по Вольгемуту:

Вольгемута метод — определение активности амилазы (диастазы) в биологических жидкостях (слюне, моче, крови и др.). Активность фермента измеряется амилазными единицами, т. е. числом миллилитров 0,1% раствора крахмала, расщепленного в течение 30 мин. при t° 45 9 1 мл исследуемого раствора. Например, в норме активность амилазы в моче равна 16—64. Повышенные значения наблюдаются при панкреатите, заболеваниях желчных путей и др., пониженные значения вплоть до нуля — при почечной недостаточности.

5)Аденозинтрифосфа́т — нуклеотид, играет исключительно важную роль в обмене энергии и веществ в организмах; в первую очередь соединение известно как универсальный источник энергии для всех биохимических процессов, протекающих в живых системах. АТФ был открыт в 1929 году Карлом Ломанном[1], а в 1941 году Фриц Липман показал, что АТФ является основным переносчиком энергии в клетке.

Аэробный путь ресинтеза АТФ - это основной, базовый способ образования АТФ, протекающий в митохондриях мышечных клеток. В ходе тканевого дыхания от окисляемого вещества отнимаются два атома водорода и по дыхательной цепи передаются на молекулярный кислород - 02, доставляемый кровью в мышцы из воздуха, в результате чего возникает вода. За счет энергии, выделяющейся при образовании воды, происходит синтез АТФ из АДФ и фосфорной кислоты. Обычно на каждую образовавшуюся молекулу воды приходится синтез трех молекул АТФ.

В упрощенном виде ресинтез АТФ аэробным путем может быть представлен схемой:

Чаще всего водород отнимается от промежуточных продуктов цикла трикарбоновых кислот - цикла Кребса. Цикл Кребса - это завершающий этап катаболизма, в ходе которого происходит окисление ацетилкофермента А до С02 и Н20. В ходе этого процесса от перечисленных выше кислот отнимается 4 пары атомов водорода и поэтому образуется 12 молекул АТФ при окислении одной молекулы ацетилкофермента А.

Билет 4.

В ферменте выделяют 2 части:1)активный центр -уникальная комбинация Акных остатков,который принимает участие в ферм.р-ях.Состоит из:

-якорной площадки,который имеет высокое сродство с субстратом.

-каталитический центр,который отвечает за саму р-ю.

2)аллостерический центр связывает обычные низкомолекулярные вещества,молекулы,которые отличаются по структуре от субстратов.Присоединение сюда эффектора изменяет конфигурацию активного центра и снижает или повышает экзиматическую активность.

Сериновые протеазы (сериновые эндопептидазы) — ферменты, способные разрезать белки рассечением пептидных связей и отличающиеся от других протеаз наличием в своём активном центре аминокислоты серина. Сериновые протеазы содержатся как в многоклеточных, так и в одноклеточных организмах, они есть как у эукариотов, так и у прокариотов. Пример: Трипсин • Химотрипсин • Эластаза.

2. Кривая уравнения Михаэли-

са-Ментен: гиперболическая зависи-

мость начальных скоростей катализиру-

емой ферментом реакции от концентра-

ции субстрата.

Km-констатнта Михаэлиса-это та концентрация субстрата,при котором скорость Vo=1\2Vmax.Чем больше величина Кm,тем медленнее происходит "насыщение"фермента,т.е. тем меньше его сродство к субстрату.

Одним из наиболее существенных факторов, определяющих скорость ферментатив-

ной реакции, является концентрация субстрата (или субстратов) и продукта

(продуктов). При постоянной концентрации фермента скорость реакции

постепенно увеличивается, достигая определенного максимума

, когда дальнейшее увеличение количества субстрата практически

не оказывает влияния на скорость ферментативной реакции. В таких

случаях принято считать, что субстрат находится в избытке, а фермент

полностью насыщен, т.е. все молекулы фермента связаны с субстратом.

Ограничивающим скорость реакции фактором в последнем случае ста-

новится концентрация фермента. Именно при этих условиях определяют

величину максимальной скорости (Vmax) и значения константы Михаэлиса

(Km)

3.

ЦИТОХРОМЫ, сложные белки — переносчики электронов, простетическая группа которых представлена гемом. Содержатся в клетках всех организмов. Локализованы в мембранах митохондрий, хлоропластов, хроматофоров, эндоплазматического ретикулума и в других мембранных структурах, участвуют во всех основных группах окислительно-восстановительных процессов, протекающих в живых клетках, — дыхании, фотосинтезе, микросомальном окислении. Как правило, образуют так называемые цепи, по которым электроны последовательно переносятся от донора к конечному акцептору. При функционировании цитохромов и переносе восстановительных эквивалентов обратимо изменяется уровень окисления простетической группы [Fe(II) <—> Fe(III)]. Формула простетической группы цитохрома.

4. α-амилаза гидролизует крахмал с образованием конечных

продуктов, не дающих цветной реакции с йодом. При взаимодействии крахмала с йодом

образуется окрашенный комплекс, оптическая плотность которого при 640 нм

пропорциональна концентрации негидролизированного крахмала. Активность α-амилазы

оценивают по уменьшению интенсивности окраски. Активность α-амилазы выражают в

миллиграммах или граммах крахмала, гидролизованного 1 л исследуемого образца за

1 сек инкубации при 37 oС.

5.

Дыхательная цепь представляет собой ряд белковых комплексов, встроенных во внутреннюю митохондриальную мембрану (рис. 210). Существуют три главных ферментных комплекса. Первый, НАД·Н-дегидрогеназный комплекс принимает электроны от НАД·Н и переносит их во второй комплекс — комплекс Ь—с₁ который в свою очередь переносит их на цитохромоксидазный комплекс, а он их передает на кислород, в результате чего образуется вода. На этом окисление заканчивается. Цитохромоксидаза переносит электороны с цитохрома с на кислород, помимо гема содержит ионы меди,которые,меняя валентность,участвуют в переносе электронов.

Субстратом для комплекса 1 и 2 являюся органические вещества.

Отношение количества фосфорной кислоты (Р), использованной на фосфорилирование АДФ, к атому кислорода (О), поглощённого в процессе дыхания, называют коэффициентом окислительного фосфорилирования и обозначают Р/О. Следовательно, для NADH Р/О = 3, для сукцината Р/О - 2.

Цианид блокирует движение электронов, тем самым угнетая утилизацию кислорода. Нарушается функция клеток и наступает смерть.

Билет №5.

1) Ингибирование ферментов. Ингибитор – это вещество, вызывающее специфическое снижение активности фермента. Следует различать ингибирование и инактивацию. Инактивация – это, например, денатурация белка в результате действия денатурирующих агентов.

По прочности связывания ингибитора с ферментом ингибиторы делят на обратимые и необратимые. Необратимые ингибиторы прочно связаны и разрушают функциональные группы молекулы фермента, которые необходимы для проявления его каталитической активности. Все процедуры по очистке белка не влияют на связь ингибитора и фермента. Пр.: действие фосфорорганических соединений на фермент – холинэстеразу. Хлорофос, зарин, зоман и др. фосфорорганические соединения связываются с активным центром холинэстеразы. В результате происходит фосфорилирование каталитических групп активного центра фермента. В следствии молекулы фермента, связанные с ингибитором, не могут связываться с субстратом и наступает тяжелое отравление.

Также выделяют обратимые игнибиторы, например прозерин для холинэстеразы. Обратимое ингибирование зависит от концентрации субстрата и ингибитора и снимается избытком субстрата.

По механизму действия выделяют:

- конкурентное ингибирование;

- неконкурентное ингибирование;

- субстратное ингибирование;

- аллостерическое.

1) Конкурентное (изостерическое) ингибирование – это торможение ферментативной реакции, вызванное связыванием ингибитора с активным центром фермента. При этом ингибитор имеет сходство с субстратом. В процессе происходит конкуренция за активный центр: образуются фермент-субстратные и ингибитор-ферментные комплексы. E+SES EP E+P; E+I E. Пр.: сукцинатдегидрогеназная реакция [рис. COOH-CH₂-CH₂-COOH(над стрелкой СДГ, под ФАДФАДН₂) COOH-CH=CH-COOH]. Истинным субстратом этой реакции является сукцинат (янтарная к-та). Ингибиторы: малоновая к-та (COOH-CH₂-COOH) и оксалоацетат (COOH-CO-CH₂-COOH). [рис. фермента с 3 дырками+ субстрат+ ингибитор= комплекс ингибитора с ферментом]

Пр.: фермент холинэстераза катализирует превращение ацетилхолина в холин: (CH₃)₃-N-CH₂-CH₂-O-CO-CH₃ (над стрелкой ХЭ, под – вода) CH₃СOOH+(CH₃)₃-N-CH₂-CH₂-OH. Конкурентными ингибиторами являются прозерин, севин.

2) Неконкурентное ингибирование – торможение, связанное с влиянием ингибитора на каталитическое превращение, но не на связывание фермента с субстратом. В этом случае ингибитор может связываться и с активным центром (каталитический участок) и вне его.

Присоединение ингибитора вне активного центра приводит к изменению конформации (третичной структуры) белка, вследствие чего изменяется конформация активного центра. Это затрагивает каталитический участок и мешает взаимодействию субстрата с активным центром. При этом ингибитор не имеет сходства с субстратом и это ингибирование нельзя снять избытком субстрата. Возможно образование тройных комплексов фермент-ингибитор-субстрат. Скорость такой реакции не будет максимальной.

К неконкурентным ингибиторам относят:

- цианиды. Они связываются с атомом железа в цитохромоксидазе и в результате этого фермент теряет свою активность, а т.к. это фермент дыхательной цепи, то нарушается дыхание клеток и они гибнут. - ионы тяжёлых металлов и их органические соединения (Hg, Pb и др.). Механизм их действия связан с соединением их с различными SH-группами. [рис. фермента с SH-группами, иона ртути, субстрата. Все это соединяется в тройной комплекс]

- ряд фармакологических средств, которые должны поражать ферменты злокачественных клеток. Сюда же относятся ингибиторы, использующиеся в сельском хозяйстве, бытовые отравляющие вещества.

3) Субстратное ингибирование – торможение ферментативной реакции, вызванное избытком субстрата. Происходит в результате образования фермент-субстратного комплекса, неспособного подвергаться каталитическому превращению. Его можно снять и уменьшить концентрацию субстрата. [рис. связывания фермента сразу с 2 субстратами]

4) Аллостерическое ингибирование – торможение ферментативной реакции, вызванное присоединением аллостерического ингибитора в аллостерическом центре аллостерического фермента. Такой тип ингибирования характерен для аллостерических ферментов, имеющих четвертичную структуру. В качестве ингибиторов могут выступать метаболиты, гормоны, ионы металлов, коферменты.

Механизм действия:

а) присоединение ингибитора к аллостерическому центру;

б) изменяется конформация фермента;

в) изменяется конформация активного центра;

г) нарушается комплиментарность активного центра фермента к субстрату;

д) уменьшается число молекул ES;

е) уменьшается скорость ферментативной реакции.

[рис. фермент с 2 дырками, к одной аллостерический ингибитор и вторая меняет форму]

К особенностям аллостерических ферментов относят ингибирование по отрицателтной обратной связи. A(E₁)B(E₂) C(E₃) D (от D стрелочка к стрелке между А и В). D – метаболит, действующий как аллостерический ингибитор на фермент Е₁.

при конкурентном ингибировании увеличивается константа Михаэлиса, а максимальная скорость ферментативной реакции остается неизменной.

При неконкурентном ингибировании максимальная скорость реакции уменьшается, а константа Михаэлиса остается неизменной.

Пенициллин, одно из самых известных и распрстраненных лекарств, применяется для лечения ряда инфекционных заболеваний. Пенициллин необратимо ингибирует фермент бактерий гликопептид-трансферазу. Этот фермент участвует в синтезе бактериальной стенки, и поэтому в присутствии пенициллина размножение бактерий невозможно. Гликопептид-трансфераза содержит остаток серина в активном центре (сериновая петид-гидролаза) В МОЛЕКУле пенициллина есть амидная связь, по свойствам сходная с пептидной связью. В результате разрыва этой связи, катализируемого ферментом, остаток пенициллина оказывается необратимо связанным с ферментом.

2) Скорость ферментативных реакций, как всяких других, зависит от температуры: при повышении температуры на каждые 10 градусов С скорость увеличивается примерно вдвое. Однако для ферментативных реакций это правило справедливо лишь в области низких температур – до 50-60градусов.Приболее высоких температурах ускоряется денатурация фермента, что означает уменьшение его количества; соответственно снижается и скорость реакции. При 80-90 градусах большинство ферментов денатурируется практически мгновенно. Количественное определение ферментов рекомендуется проводить при 25 градусах.

Билет 7.

1.Субстрат-лиганд,(подвергающийся химич.превращению) взаимодействующий с активным центром фермента и образующий ферм

Продукт- субстрат, претерпевший химические превращения

Специфическое взаимодействие с субстратом- каждый фермент способен взаимодействовать с одним или с несколькими определенными субстратами.

Специфичность пути реакции –фермент превращ. присоед-го субстрата по одному из возможных путей его превращения.

Профермент- гр.протеин функционального неактивный предшественник фермента, подвергающийся тем или иным пребразованиям, в результате чего образуется каталитический активный продукт –фермент.

Энергия активации-кол-во энергии(в Дж), кот.необходимо для перевода при данной темпер. всех молекул одного моля в-ва в активир-я сост-я.

2.(ГРАФИК)
Для конц.фермента сущ.опр.значение pH, при кот.он достигает макс.каталитич.активности.

3. ФМН /окисл-е/ роль Флавинмонуклеотид В2-рибофлавин

присоед.H2 и перенос H2

3. Каталаза относится к классу оксидоредуктаз.

5. Синтез АТФ осущ-ся к-ксом АТФ синтетазой, она кат-т р-ции синтеза и гидролиза АТФ, АДФ + Н₃РО₄+7,3 ккал/моль (30,5 кДж/моль) = АТФ + Н₂О.

NADH + Н+ O2 → NAD+ H2O +Q

H2O + 2C (Fe+3) →O2+2H + 2C(Fe +2)

4e(Fe)+ Q→4e(Fe)+O2

Q2 +4e+4H→2H2O

На внутр.мембране мит-дрии

Коэф.эффективности- фосфорилир-я кол-во мол-л неорганич.фосфата, кот.включ. в АТФ в расчете на 1 атом О2

Билет 8.

1) В природе существуют как простые, так и сложные ферменты. Первые целиком представлены полипептидными цепями и при гидролизе распадаются исключительно на аминокислоты. Большинство

природных ферментов относится к классу сложных белков, содержащих, помимо полипептидных цепей, какой-либо небелковый компонент (кофактор), присутствие которого является абсолютно необходимым для каталитической активности. Кофакторы могут иметь различную химическую природу и различаться по прочности связи с полипептидной цепью. Если константа диссоциации сложного фермента настолько мала, что в растворе все полипептидные цепи оказываются связанными со своими кофакторами

и не разделяются при выделении и очистке, то такой фермент получает название холофермента (холоэнзим), а кофактор – простетической группы, рассматривающейся как интегральная часть молекулы фермента. Полипептидную часть фермента принято называть апоферментом.

2)

3) АТФ является накопителем энергии. Энергия заключается в макроэргических связях. Связи образуются между фосфорными остатками в молекуле АТФ. (Только это)

4) Единица активности фермента – это такое количество фермента, которое катализирует превращение 1 мкмоль вещества за 1 мин. Определяется по формуле

Количество превращенного субстрата, мкмоль/навеска ткани, г*время инкубации, мин= nE

5) АТФ-синтетаза – очень крупный олигомерный белок, в котором выделяют три части: выступающую в матрикс митохондрии (F1), построенную из трех пар димеров альфа-бета; трансмембранную часть (F0), Образующую гидрофильный канал, и промежуточную область FA. АТФ-синтетаза катализирует синтез АТФ из АДФ и фосфорной кислоты.
Субъединица F1 содержит активные центры, синтезирующие АТФ. Протоны движутся через канал АТФ-синтазы, и энергия этого движения используется для образования АТФ. Конкретные механизмы сопряжения, т.е. трансформации электрохимического потенциала в энергию макроэргической связи АТФ, все еще не вполне ясны.

Билет 9.
1) Классификация ферментов:
КФ 1: Оксидоредуктазы, катализирующие окисление или восстановление. Пример: каталаза,алкогольдегидрогеназа.
КФ 2: Трансферазы, катализирующие перенос химических групп с одной молекулы субстрата на другую. Среди трансфераз особо выделяют киназы, переносящие фосфатную группу, как правило, с молекулы АТФ.
КФ 3: Гидролазы, катализирующие гидролиз химических связей. Пример: эстеразы, пепсин, трипсин, амилаза,липопротеинлипаза.
КФ 4: Лиазы, катализирующие разрыв химических связей без гидролиза с образованием двойной связи в одном из продуктов.
КФ 5: Изомеразы, катализирующие структурные или геометрические изменения в молекуле субстрата.
КФ 6: Лигазы, катализирующие образование химических связей между субстратами за счёт гидролиза АТФ. Пример:ДНК-полимераза

.

2)Виды специфичности ферментов.Примеры.
Различают два главных вида специфичности ферментов: субстратную специфичность и специфичность действия.

Субстратная специфичность, это способность фермента катализировать превращения только одного определенного субстрата или же группы сходных по строению субстратов. Определяется структурой адсорбционного участка активного центра фермента.

Различают 3 типа субстратной специфичности:

· абсолютная субстратная специфичность - это способность фермента катализировать превращение только одного, строго определенного субстрата;

· относительная субстратная специфичность - способность фермента катализировать превращения нескольких, сходных по строению, субстратов;

· стереоспецифичность - способность фермента катализировать превращения определенных стереоизомеров.

Например, фермент оксидаза L-аминокислот способен окислять все аминокислоты, но относящиеся только к L-ряду. Таким образом, этот фермент обладает относительной субстратной специфичностью и стереоспецифичностью одновременно.

Дата добавления: 2015-11-14