Клостридии ботулизма.

Ботулизм (от лат. botulus колбаса) – тяжёлая пищевая интоксикация, сопровождающаяся поражением ЦНС и протекающая с явлениями характерного паралитического синдрома.

Возбудитель ботулизма – Clostridium botulinum – описан впервые Э. ван Эрменгемом в 1896 г. во время расследования вспышки ботулизма. Микроорганизм был выделен из ветчины, послужившей источником отравления людей, и из органов умерших. Затем было установлено, что вид Clostridium botulinum включает серовары (A, B, C_1(α), C_2(β), D, E, F, Q), различающиеся по антигенной структуре образуемых ими токсинов. Наибольшее значение имеют A, B и E. Каждый из токсинов клостридий ботулизма может быть нейтрализован только гомологичной сывороткой.

Морфология, физиология. Clostridium botulinum – крупные палочки, размерами 4-9 x 0.6-1.0 мкм, с закруглёнными концами, имеют до 35 перитрихиально расположенных жгутиков, образуют субтерминально расположенные споры. Палочка со спорой напоминает теннисную ракетку. Грамположительны. Капсулу не образуют.

Строгий анаэроб. Оптимальная температура роста 35°C. Размножение и токсинообразование может происходить от 10 до 55°C. Выращиваются на средах Китта-Тароцци, на плотных средах, содержащих гидролизат казеина, мясные и рыбные экстракты (с высокой концентрацией белка животного происхождения). Размножается на глюкозо-кровяном агаре, образуя неправильной формы колонии с отростками или ровными краями, зоной гемолиза вокруг колоний. В столбике агара колонии Clostridium botulinum напоминают комочки ваты или чечевицу. В жидких средах образуется равномерная муть, а затем на дно пробирки выпадает компактный осадок.

Ферментируют углеводы до кислоты и газа, обладают выраженной протеолитической активностью (признак для внутривидового деления на типы).

Антигены. При идентификации возбудителя ботулизма определяют только антигенную специфичность образуемых им токсинов.

Экология и распространение. Широко распространён в природе. Естественной средой обитания Clostridium botulinum является кишечник многих животных, рыб, моллюсков, а также почва, куда микроорганизмы постоянно попадают с испражнениями. В почве, как и в организме животных, клостридии ботулизма не только сохраняются длительное время, но и размножаются. Вегетативные формы C. botulinum малоустойчивы в окружающей среде, в отличие от спор, которые выдерживают длительное высушивание, замораживание до –253°C, кипячение от 1 до 6 ч. В 5% растворе фенола сохраняют жизнеспособность до 1 сут.

Ботулинический токсин при кипячении разрушается в течение 10 мин. Он обычно накапливается в пищевом продукте при размножении в нём Clostridium botulinum. Такими продуктами являются, как правило, консервы домашнего приготовления (овощные (т.к. возможен контакт овощей с почвой), грибные, рыбные, мясные) → заболеваемость выше там, где в рационе питания преобладают консервированные продукты.

Патогенность возбудителя и патогенез ботулизма. Ботулизм – тяжёлая пищевая интоксикация, развивающаяся в результате употребления продуктов, содержащих токсины возбудителя и сами микробные клетки. Попав в анаэробные условия, размножающиеся клостридии ботулизма выделяют в среду токсины.

Один из них – нейротоксин – является основным, определяющим клиническую картину болезни. Нейротоксин клостридий ботулизма самый сильный из всех известных биологических ядов. В 375 раз токсичнее яда гремучей змеи. Он получен в кристаллическом виде и 1 мг содержит до 100 млн смертельных доз для белой мыши (1.6 нг = 1000 молекул). У человека смерть наступает после приёма не более 0.001 мг нейротоксина.

Токсин является высокомолекулярным полипептидом (140000 – 155000 Да), относительно термоустойчив. Состоит из двух субъединиц (нейротоксин и гемагглютинин). Нейротоксин тоже состоит из двух субъединиц: цепь H и цепь L, связанные дисульфидной связью, различаются по антигенным свойствам.

Поступает в кишечник в виде протоксина, превращается в токсин под воздействием ферментов тонкого кишечника. Токсин устойчив к действию пищеварительных ферментов. Из верхних отделов ЖКТ токсин быстро всасывается в кровь, распространяется по организму и попадает в нервно-мышечные синапсы.

Три стадии действия токсина (выявляются на нервно-мышечном препарате):

1) связывание нейротоксина со специфическим рецептором (не зависит от температуры и от концентрации Ca²⁺), эта стадия обратима, если применить антитоксическую сыворотку;

2) транспорт (по типу эндоцитоза) токсинов в цитозоль нервномышечного соединения (зависит от температуры и от концентрации Ca²⁺), эта стадия труднообратима;

3) литическая стадия – необратимая, токсин блокирует освобождение ацетилхолина, блокирует проведение нервного импульса в мышцу → развиваются основные симптомы заболевания.

Человек высокочувствителен к токсинам всех типов возбудителей ботулизма.

Различают 4 клинических типа ботулизма:

1) Классический (пищевой) – связан с употреблением пищи, содержащей токсин.

2) Раневой – связан с обсеменением раневой поверхности.

3) Ботулизм новорождённых – патологическая колонизация слизистой кишечника Clostridium botulinum.

4) Ботулизм неопределённого классифицирования (причина развития заболевания неизвестна).

Клиническим проявлением действия токсина в первую очередь являются поражения бульбарных нервных центров. После короткого инкубационного периода (обычно 6-48 ч – зависит от дозы) развиваются явления общей интоксикации. Сначала нарушается функция мышц глаз, гортани, глотки – расстройство аккомодации, двоение в глазах, птоз (стойкое опущение века), поражения скелетных глазных мышц, расширение зрачков, осиплость голоса, дисфагия (нарушение глотания), повышается саливация. Вместе с этим появляются афония, головная боль, головокружение, иногда рвота. По мере развития заболевания нарушается функция дыхательной мускулатуры. Смерть наступает от паралича дыхания. Летальность высока (до 57-63%), наиболее тяжело протекает заболевание, связанное с токсином типа A.

Лабораторная диагностика. Материалом для лабораторного исследования на предмет обнаружения токсинов и возбудителя ботулизма, определения серовара служат рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, кровь. Для установления источника инфекции исследуются подозреваемые продукты, которые употребляли заболевшие. Исследования ведут параллельно на обнаружение токсина и выделение культуры возбудителя. Для обнаружения токсина используют белых мышей, которым подкожно или внутрибрюшинно вводят вместе с поливалентной антитоксической противоботулинической сывороткой (A, B, C, E) исследуемый материал, а другая группа мышей получает материал без сыворотки. В том случае, когда животные второй группы погибают, ставят развёрнутую реакцию нейтрализации для определения типа токсина.

Для получения культуры возбудителя исследуемый материал засевают в жидкие питательные среды. Выделенную культуру идентифицируют, а культуральную жидкость испытывают в реакции нейтрализации на наличие в ней ботулинического токсина определённого серотипа.

Профилактика и лечение. При появлении первых признаков ботулизма необходимо как можно раньше ввести противоботулиническую сыворотку. Это единственное средство, которое при своевременном применении может спасти жизнь больному. До установления серотипа токсина, который вызвал болезнь, вводят поливалентную сыворотку против токсинов A, B, C, E. Количество сыворотки и необходимость повторного введения определяет клиницист. Лицам, которые принимали пищу, явившуюся источником ботулизма, но ещё не заболевшим, с профилактической целью можно ввести ту же антитоксическую противоботулиническую сыворотку.

Дата добавления: 2015-08-02